IL-22诱导小鼠输卵管上皮细胞表达趋化因子的初步研究

目的探讨细胞因子IL-22对小鼠输卵管上皮细胞趋化因子CXCL9、CXCL10表达的影响。方法流式细胞术检测体外培养的小鼠输卵管上皮细胞膜表面IL-22R表达水平。重组鼠IL-22(100 ng/ml)刺激小鼠输卵管上皮细胞,ELISA检测不同时间(0、12、24、48、72 h)CXCL9、CXCL10表达情况,Trans AM ELISA检测转录因子STAT3 DNA结合活性。不同质量浓度的重组鼠IL-22(0、25、50、100、200 ng/ml)刺激小鼠输卵管上皮细胞,ELISA检测CXCL9、CXCL10表达情况。结果小鼠输卵管上皮细胞膜表面表达IL-22R。比较6个时间点CXCL9、CXCL10表达差异,发现CXCL9、CXCL10表达具有时间依赖性。比较不同质量浓度IL-22处理下CXCL9、CXCL10表达差异,IL-22 100 ng/ml为最佳干预浓度,且CXCL9、CXCL10表达与IL-22质量浓度具有依赖关系。IL-22刺激组STAT3 DNA结合活性显著升高,与阴性对照组比较有显著差异(P0.05)。结论 IL-22能显著诱导小鼠输卵管上皮细胞生成并释放CXCL9、CXCL10,且具有时间和剂量依赖性。     

猪苓多糖经TLR4刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞成熟

目的：研究猪苓多糖（polyporus polysaccharides,PPS）诱导小鼠骨髓树突状细胞（dendriticcell,DC）表型及功能成熟的分子机制。方法：从小鼠骨髓中分离单个核细胞（MNC）,用rmGM-CSF、IL-4培养5 d后将其分为三组：实验组中加入50μg/mL PPS;阳性对照组中加1μg/mL LPS;加等量RPMI 1640培养基作为阴性对照组,继续培养48 h。苏木精-伊红（HE）染色观察细胞形态;流式细胞仪（FACS）分析DC表面CD80、CD86及MHC II（I-A/I-E）表达情况;经20μg/mL Toll-like receptor（TLR）4、TLR2单抗作用1 h后,ELISA法检测培养上清中IL-12 p40含量;混合淋巴细胞反应（MLR）检测DC对T淋巴细胞的刺激能力。结果：PPS处理的DC具有毛刺状突起,呈典型的DC形态;细胞表达MHC II、CD80及CD86增加;对T淋巴细胞刺激能力增强;分泌IL-12增加且可被抗TLR4单抗所阻断。结论：PPS通过TLR4促进体外培养的小鼠骨髓DC表型与功能成熟。     

细胞膜异位表达钙网蛋白的CD4~+T细胞诱导EAE小鼠保护性免疫

目的:研究细胞膜表面异位表达钙网蛋白(calreticulin,CALR)对T细胞疫苗(T-cell vaccine,TCV)诱导的保护性免疫效果的影响。方法:采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,分别以MOG_(35-55)特异性T细胞(CALR~+T及CALR~-T)为疫苗,通过尾静脉注射免疫小鼠。检测指标包括EAE小鼠临床评分比较、脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比测定及血清中细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-10和IL-17A含量测定。结果:射线照射可诱导活化CD4~+T细胞表面异位表达CALR;CALR~+T免疫组症状显著轻于CALR~-T免疫组(P0.01);CALR~+T免疫组小鼠脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比及血清中IL-4和IL-10含量显著高于对照组(P0.01),而IFN-γ和IL-17A含量显著低于对照组(P0.01),结论:细胞膜表面异位表达CALR与TCV诱导的保护性免疫效果有关。     

以精品课程建设为依托，促进留学生医学免疫学教学

根据对留学生班的全英语教学的经验,笔者就留学生的医学免疫学教学方法进行初步探讨,并就面临的问题和解决的办法提出了自己的见解。     

猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用

目的观察猪苓多糖(PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用,并研究Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法用PPS12.5,25,50及100mg·L-1刺激C3H/HeN小鼠和TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠脾细胞72h或腹腔巨噬细胞24h,以[3H]TdR掺入法检测脾细胞增殖反应;以Griess法测定腹腔巨噬细胞培养上清一氧化氮(NO)水平,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;以溴化氰活化多糖的方法制备荧光胺(Flu)标记的PPS(Flu-PPS)及Flu-葡聚糖,应用流式细胞仪及激光共聚焦显微镜检测Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合。结果 PPS可明显促进C3H/HeN小鼠脾细胞增殖并诱导腹腔巨噬细胞分泌NO,IL-1β和TNF-α,且具有浓度依赖性(r=0.999,P<0.01)。用抗TLR4单抗20mg·L-1与C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞预孵育1h后加入PPS50mg·L-1,与单独PPS50mg·L-1孵育比较,巨噬细胞培养上清IL-1β和TNF-α浓度分别由(0.38±0.06)μg·L-1和(0.29±0.05)μg·L-1降至(0.18±0.01)μg·L-1和(0.12±0.02)μg·L-1,降幅达52.6%和58.6%(P<0.01)。PPS对C3H/HeN小鼠的脾细胞增殖、腹腔巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α的作用明显强于C3H/HeJ小鼠:PPS12.5～100mg·L-1组脾细胞增殖分别增加了2.4,1.7,1.5和22.2倍,IL-1β增加了0.9,1.3,1.2和1.1倍,TNF-α增加了1.3,0.9,0.6和0.6倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪及激光共聚焦显微镜分析结果表明,Flu-PPS1mg·L-1与小鼠腹腔巨噬细胞结合的荧光强度显著高于Flu-葡聚糖,增加Flu-PPS浓度至5mg·L-1,荧光强度并未相应增强,表明Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合具有饱和性;未标记的PPS100mg·L-1及抗TLR4单抗200mg·L-1可明显阻断Flu-PPS与巨噬细胞的结合。结论 PPS可能通过TLR4活化小鼠腹腔巨噬细胞。     

输注盐酸莫西沙星氯化钠致哮喘发作、过敏性休克1例

1病例介绍患者男,63岁,既往有支气管哮喘史,已5年未发作,无药物及食物过敏史。2011年6月15日因＂咳嗽、咳痰5d,发热1d＂就诊我院呼吸内科门诊,查体：T37.40C,右下肺可闻及少许湿罗音,无喘鸣音。经相关检查诊断为＂右下肺炎＂,根据《社区获得性肺炎（CAP）诊断与治疗指南》予盐酸莫西沙星氯化钠注射液（拜复乐,     

猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠骨髓来源树突状细胞作用研究

目的研究猪苓多糖(Polyporus umbellatus polysaccharides,PPS)活化小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow dendritic cells,BMDC)功能调节的作用机制,进一步阐明PPS的免疫学活性机制。方法以3H-TdR掺入法、ELISA及流式细胞术检测BMDC表型和功能的各项指标。结果 PPS刺激小鼠BMDC表达CD11c、CD86及白细胞介素-12、-10(IL-12、IL-10)产生,并且具有剂量依赖效应。另外,较阴性对照组,经PPS诱导成熟的BMDC其活化初始T细胞的能力显著提高而吞噬能力显著下降。抗小鼠Toll样受体4(TLR4)单抗可抑制PPS刺激BMDC产生IL-12 p40及阻断荧光标记猪苓多糖(fluorescence-labeled PPS,f-PPS)与BMDC的结合,而抗TLR2及补体受体3(CR3)单抗却无此效应。结论 PPS可经TLR4活化小鼠BMDC发挥免疫调节活性。     

心源性休克的护理体会

心源性休克是心脏功能极度减退，导致心排血量锐减，各重要器官和周围组织灌注不足而发生的一系列代谢与功能障碍综合征，由于急性心泵功能障碍或严重的心律失常所导致的休克。发病环节是心输出量迅速降低，微循环障碍、手足发冷、血压下降均为早期临床表现。因其发病急骤，死亡率高，预后差，因此早期积极的治疗、护理异常重要。     

猪苓多糖刺激/诱导小鼠树突状细胞成熟

研究猪苓多糖对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表型及功能成熟的影响。从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNC),用rmGM-CSF、IL-4培养5 d后,实验组加入猪苓多糖(50μg/ml),空白对照组加等量RPMI 1640,阳性对照组加LPS(1μg/ml),3组分别同时作用48 h。扫描电镜观察其体外培养过程中的形态特征,流式细胞仪(FACS)分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其功能。用猪苓多糖刺激的小鼠骨髓MNC具典型的DC形态;细胞表达I-A/I-E、CD11c和分泌IL-12能力比空白对照组增加,具有极强的激发MLR的能力,显示成熟DC的特征。猪苓多糖可以促进体外培养的小鼠骨髓DC的成熟,促进DC诱导的免疫应答启动。