苓桂术甘汤中多糖结构组成及其抗氧化活性考察

目的:研究苓桂术甘汤中多糖的结构,包括单糖组成以及官能团检测,并对其抗氧化能力进行评估,为体外生物测定法运用于苓桂术甘汤的质量评价提供基础。方法:利用高效凝胶色谱对全方多糖分子量进行研究;进一步采用气相色谱-质谱(GC-MS)柱前衍生化法及红外光谱扫描分析全方多糖结构组成;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及羟基自由基测定全方粗多糖及精多糖的抗氧化能力。结果:全方多糖由单一峰组成,且相对分子质量为3 689 Da,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖组成,摩尔比为6. 85∶1. 00∶109. 21∶1. 04∶21. 82,其中葡萄糖和果糖为主要组成成分;红外结果显示聚糖结构中存在吡喃糖及糖醛酸,并且糖苷键存在2种立体异构(α-糖苷键及β-糖苷键);抗氧化研究发现全方多糖有一定清除DPPH自由基及羟基自由基的能力,粗多糖的活性优于精多糖。进一步采用LC-Q-TOF-MS对粗多糖中的其他成分进行定性分析,提示这与甘草中五环三萜类成分的吸附有关。结论:苓桂术甘汤中多糖及五环三萜类物质均是苓桂术甘汤抗氧化作用的物质基础,利用体外生物测定法测定抗氧化活性可作为全面控制苓桂术甘汤质量的评价指标。     

单孔腹腔镜与传统腹腔镜胆囊切除术治疗效果比较

目的 探讨单孔腹腔镜(SILC)与传统腹腔镜两种术式的安全性和可行性.方法 选取胆囊疾病患者54例随机分为SILC组(n=26)和三通道腹腔镜胆囊切除术(3PLC)组(n=28).收集患者年龄、体质量、身高、体质量指数(BMI)、手术时间、疼痛分数、中途转换手术率、切口满意度评分等临床资料,并进行了12个月的随访.结果 两组患者在性别、年龄、体质量、身高和BMI方面比较差异无统计学意义(P＞0.05).SILC组手术时间长于3PLC组[(56.9 ±15.8) min比(35.2±8.7) min,P＜0.01].应用相同的麻醉药品后SILC组在术后第1天较3PLC组疼痛分数更高,总的疼痛分数两者相似,差异无统计学意义(P＞0.05).SILC组患者术后伤口并发症发生率更高,但术后疝发生率相同.SILC组切口满意度评分分数更高[(11.7±0.8)分比(10.1±1.2)分,P＜0.05].结论 SILC较3PLC治疗单纯胆道疾病安全、有效.     

广地龙特异性引物序列的设计及其混伪品的鉴别

目的?通过设计特异性引物来鉴定广地龙及其混伪品。方法?提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增,并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,找出广地龙的变异位点,设计出广地龙的特异性引物,用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性考察。结果?COⅠ序列不存在特异性,不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750?bp大小的片段,无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中,只有广地龙可以获得574?bp的基因片段,其他混伪品未扩增出相应条带。结论?设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙,与其他混伪品区分,为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。      

不同来源莪术中姜黄素类成分的含量差异研究

目的：用高效液相色谱法测定不同来源的莪术中3种姜黄素成分,比较姜黄素（cur_cumin,Ⅰ）、去甲氧基姜黄素（demethoxycurcumin,Ⅱ）和双去甲氧基姜黄素（bisdemethoxycurcum_in,Ⅲ）的含量差异。方法：采用Kromasil色谱柱,流动相为乙腈-水（0.5%冰乙酸）,流速为1 mL· min-1,检测波长为425 nm。结果：姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的线性范围分别为0.04~0.16μg （r=0.9991）、0.037~0.150μg （r=0.9990）、0.00015~0.00062μg （r=0.9996）;平均回收率（n=9）分别为103.32%、100.32%、100.06%。结论：不同来源的莪术中姜黄素类成分的含量存在着明显的差异。     

UPLC法测定金宁口服液中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷、蒙花苷的含量

目的 建立超高效液相色谱法(UPLC)测定金宁口服液中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷、蒙花苷含量的方法.方法采用Acquity BEH C18(2.1 mm×100mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸水为流动相,梯度洗脱;流速0.3 mL/min;检测波长300 nm;柱温40℃.结果 全宁口服液中绿原酸、隐绿原酸...     

“8”形贯穿缝合法治疗PPH术后残余痔核及皮赘临床观察

目的观察“8”形贯穿缝合治疗痔上黏膜环切（PPH）术后残余痔核及皮赘的效果。方法对32例PPH术后残余痔核及皮赘患者采用吻合口上下“8”形贯穿缝合,将残余的痔核及皮赘悬吊、还纳于肛门内。结果32例手术均成功,肛门外观较满意。同一部位缝合2次者4例、缝合3次者1例。术后均无出血及肛门疼痛、狭窄等并发症。结论对PPH术后残余痔核及皮赘采用“8”形贯穿缝合法进行悬吊、还纳,效果好,保留了PPH术的优点,是PPH术简便实用、安全有效的补救措施。     

基于指纹图谱及化学模式识别方法优选经典名方温经汤中莪术药材产地

目的基于高效液相色谱(HPLC)指纹图谱、聚类分析以及定量分析方法,评价不同产地莪术的质量,优选最佳产地。方法采用HPLC,流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,检测波长为210 nm,对7个不同产地的26批莪术药材进行指纹图谱及3种有效成分含量测定研究,应用聚类分析与显著性差异分析等化学模式识别方法对莪术药材质量进行评价,进而优选最佳产地。结果7个不同产地26批莪术的指纹图谱相似度差别较大,莪术酮、吉马酮和呋喃二烯的含量分别为0.08%~0.98%、0.05%~0.18%、0.03%~0.29%;聚类分析可分为3类,第1类产地为四川省成都市崇州市、四川省成都市、云南省红河州和云南省楚雄州;第2类产地为广西玉林市和广西南宁市;第3类产地为广西钦州市。通过显著性差异分析,进一步评价不同产地间质量的差异,从而发现云南省楚雄州的广西莪术质量较优。结论不同产地之间莪术存在一定的质量差异,但同一产地不同批次间莪术质量较稳定。通过指纹图谱与含量测定相结合,应用聚类分析与显著性差异分析化学模式识别方法可全面综合评价莪术质量。此方法的建立为优选经典名方温经汤中莪术药材产地提供了有效的参考依据。     

UFLC-MS/MS法分析蜈蚣中3种多肽成分以及在蜈蚣鉴别中的应用

  目的  建立超高效液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)法分析蜈蚣中3种酶解多肽成分TD1(LEEDLERSEERL)、TD2(EEKDKALQNAEGEVAAL)、TD3(MILPTGASSF), 比较不同品种蜈蚣中肽类成分的差异, 寻找蜈蚣特异性多肽, 用于蜈蚣的鉴别。  方法  3种肽类成分的UFLC-MS/MS法, 色谱柱为XSelect HSS T₃(4.6 mm×150 mm, 3.5 μm); 流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱。采用三重四极杆质谱检测器, 电喷雾离子化(ESI), 正离子模式下多反应监测(MRM)进行信号采集。样品采用正交试验方法, 对蛋白提取方法进行优化, 最终确定提取方法为蛋白裂解液超声处理60 min。得到的蜈蚣蛋白提取溶液经胃蛋白酶酶解并脱盐后, 注入液质联用仪分析。测定了20批蜈蚣及8批其他动物药中3种肽类成分, 并对结果进行比较。  结果  在地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎中未检出TD2和TD3, TD1与TD2在少棘巨蜈蚣与哈氏蜈蚣、墨江蜈蚣中存在较大差异, TD3在少棘巨蜈蚣与黑头蜈蚣、多棘蜈蚣中有较大差异。  结论  该方法可用于区分少棘巨蜈蚣与地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎, 同时通过比较3种肽段的差异, 区分药典品种少棘巨蜈蚣和4种常见非药典品种蜈蚣, 为蜈蚣的质量评价和基础研究提供参考。      

半夏及不同炮制品中总游离有机酸含量比较

目的建立半夏及其不同炮制品中总游离有机酸的含量测定方法，比较半夏及其炮制品中总游离有机酸的含量。方法采用电位返滴定法，以琥珀酸为对照品，测定生品及炮制品中总游离有机酸的含量。结果分别测定了3批生品及清半夏、姜半夏中游离有机酸含量，姜半夏和清半夏中游离有机酸含量相对于生品有不同程度的提高。加样回收率为95．20％，RSD=1．81％。结论本法简便、准确、可靠，可作为半夏及其炮制品清半夏和姜半夏中游离有机酸测定方法。