对肝炎病毒感染几个重要问题的初步探讨

我科于1982年6月～1983年4月,应用灵敏度很高的放射免疫测定法(RIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测技术,在广州地区针对病毒性肝炎几个较为重要的问题,进行血清流行病学调查,现将结果分析和探讨如下。正常人群的乙型肝炎(HBV)感染我们检测不同年龄的各阶层正常人群,结果发现乙型肝炎表面抗原     

乙肝肝硬化门静脉高压性胃病的相关因素分析

目的研究乙型肝炎肝硬化门静脉高压性胃病(PHG)与各相关因素的关系,探讨PHG的发病机制.方法对乙肝肝硬化门静脉高压症159例病人,分别进行门静脉压力、肝功能状态、肝硬化程度、食管与胃底静脉曲张程度、脾功能亢进程度、乙肝病毒和幽门螺杆菌感染等项目的检测,分析各因素与PHG轻重的相关关系.结果 Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级PHG的自由门静脉压的差异比较无统计学意义(F=0.029,P=0.972).肝功能Child-Pugh分级与PHG轻重无相关性(r=0.140,P=0.153).Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级PHG的肝组织胶原纤维相对面积百分比(%)的差异无统计学意义(F=0.225,P=0.801).食管静脉曲张的程度与PHG的轻重明显相关(r=0.386,P＜0.001).胃底静脉曲张中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级发生PHG的阳性率差异无显著意义(χ(2)/()=4.509,P=0.209).脾脏功能亢进的程度与PHG轻重呈正相关(r=0.283,P=0.003).7例PHG患者胃壁组织内均未发现HBsAg和HBcAg.HP的感染率为21.43%,有无HP感染PHG差异无显著意义(χ(2)/()=0.578,P=0.7491).结论 食管静脉曲张的程度与PHG的轻重呈正相关;胃底静脉曲张存在与否与PHG的程度不相关.脾脏功能亢进程度与PHG的程度呈正相关.门静脉压力、肝功能Child-Pugh分级和肝硬化程度与PHG的轻重无明显相关性.在PHG患者的胃组织内未发现乙肝病毒感染的证据.乙肝肝硬变PHG患者HP的感染率低.     

肾透析患者血清中庚型肝炎病毒核酸的检测和与乙、丙型肝炎病毒同时感染分析

目的:了解肾透析患者庚型肝炎病毒(HGV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)合并感染的状况。方法:应用逆转录多聚酶链反应扩增庚型肝炎病毒基因,采用蛋白酶K裂解法提取血清中HGV RNA,逆转录为cDNA后进行巢式扩增,获得238bp的特异性片段。用此方法对28例肾透析患者血清标本进行检测。结果:发现28例患者血清中有4例HGV RNA阳性。这4例患者同时合并HCV感染,其中2例为HBV、HCV、HGV合并感染。结论:肾透析患者是HGV感染的高危人群,HGV在肾透析患者中常与HCV、HBV合并感染。     

输血传播病毒在原发性肝癌患者中的感染状况研究

目的 了解新型肝炎病毒输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）在原发性肝癌（ＰＬＣ）患者中的感染状况。方法 在ＴＴＶ长的ＯＲＦ保守区设计引物，建立巢式聚合酴链反应（ＰＣＲ）技术，检测了１５１例原发性肝癌患者血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 １５１例原发性肝癌患者中有２８例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性，阳性率为１８．５％；而同时检测１２５例正常人血清只３例ＴＴＶ阳性，阳性率     

丙型肝炎病毒感染及其抗原表达与细胞凋亡的关系

目的：细胞模型上研究表明，ＨＣＶ抗原能抑制细胞凋亡。本研究在体内研究水平进一步探讨ＨＣＶ抗原表达对细胞凋亡的影响。方法：采用原位细胞凋亡、免疫组织化学及其双染色等技术，对７０例肝细胞癌（ＨＣＣ）和１０例慢性肝炎的组织标本进行研究。结果：ＨＣＶ感染或组织ＨＣＶ抗原表达阳性的患者中，细胞凋亡指数与阴性患者无显著性差异。而仅有纤维化的慢性肝炎组织较伴有肝硬变的癌周组织的凋亡指数显著升高（２０２７±２４１ｖｓ８４７±３２４，Ｐ＜００１）。在分布上，慢性肝炎组织中细胞凋亡与抗原分布一致，与炎症反应密切相关，而癌周组织中两者常不一致。结论：在组织水平上ＨＣＶ抗原表达对细胞凋亡的影响相对复杂。感染早期，ＨＣＶ抗原主要通过炎症反应而促进细胞凋亡。感染后期则主要表现为抑制细胞凋亡     

乙型肝炎病毒HBx蛋白抑制阿霉素诱导的HepG2细胞凋亡

目的探讨乙型肝炎病毒HBx蛋白对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡的影响。方法将adr亚型HBx基因片段定向插入绿色荧光蛋白（GFP）真核表达载体pEGFPCl，构建重组体pGFP—HBx。将pEGFPCl、pGFPHBx转染HepG2细胞，采用G418筛选抗性克隆、荧光显微镜观察及RT—PCR检测HBx基因表达情况以建立稳定表达细胞株HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx。用阿霉素（2．5μg／m1）分别处理HepG2、HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx细胞，处理后不同时间在显微镜下观察细胞形态变化，并用锥虫蓝染色计数死亡细胞；流式细胞仪检测阿霉素处理36h后细胞凋亡率。结果HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx细胞传70代后，仍表达强的GFP；RTPCR检测显示在HepG2／GFP—HBx细胞有HBx基因转录表达。锥虫蓝染色检测表明阿霉素处理的HepG2、HepG2／GFP细胞发生了明显的时间依赖性细胞死亡，而在HepG2／GFPHBx和对照组细胞未见明显细胞死亡；流式细胞仪检测显示阿霉素处理36h后，HepG2／GFP—HBx细胞凋亡率为3．94％，明显低于HepG2（59．03％）、HepG2／GFP细胞（61．38％）（P〈0．01），而与未处理对照组细胞凋亡率（2．12％，2．78％，2．55％）差异无统计学意义（P〉0．05）。结论成功建立了稳定表达GFP、GFPHBx的HepG2细胞株；HBx能够抑制阿霉素诱导的HepG2细胞凋亡。     

HBVe抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系研究

探讨ＨＢＶｅ抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系。方法将６６７例乙肼表面抗原阳性患者分成ｅ抗原阳性、抗－ＨＢｅ阳性和两者均阴性等三级进行丁型肝炎病毒标志物的检测和分析。结果６６７例乙肝患者ＨＤＶ感染４３例（６．４％）,其中ＨＢｅＡｇ阳性组为５．３％（１１／２０６）。抗－ＨＢｅ阳性组为１０．９％（２６／２３７）,ｅ抗原抗体 性组ＨＤＶ为２．３％（６／２２５）。抗ＨＢｅ性组ＨＤＶ感染明显升高（Ｐ〈０．     

肝细胞癌患者和献血员中庚型肝炎病毒感染检测分析

调查庚型肝炎病毒在肝细胞癌患者中的感染情况,方法采用蛋白酶Ｋ裂解法提取血清中ＨＧＶＲＮＡ,逆转录为ｃＤＮＡ后进行巢式聚合酶链反应,获得２３８ｂｐ的特异性片段者为阳性结果。用此技术对１４５例ＨＣＣ患者、６９例献血员和３０４例体检者血清进行了检测分析。     

广东地区肝炎患者血清中庚型肝炎病毒RNA的检测

目的了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染在不同临床类型肝炎患者中的存在状况。方法用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对７２１例肝炎患者血清进行了ＨＧＶＲＮＡ检测。结果发现８０例ＨＧＶＲＮＡ阳性，以非甲、乙、丙、丁或戊型肝炎中阳性率为高；慢性丙型肝炎（ＨＣＶ）和慢性乙型混合丙型肝炎（ＨＢＶ＋ＨＣＶ）次之；在慢性重型肝炎和肝硬化时较低。结论庚型肝炎病毒在广东地区现症肝炎患者中有一定程度的流行     

门静脉主干及脾静脉宽度与肝组织纤维化程度的关系研究

目的　了解门静脉主干和脾静脉宽度与肝组织纤维化程度的关系。方法　 151例住院患者在B超引导下行肝活检 ,肝组织按肝纤维化分级标准分为S0 ～S4 。B超测量门静脉主干和脾静脉宽度。结果　S1至S4组门静脉主干和脾静脉宽度分别是 :S1为 (11 89± 1 39)mm和 (5 78± 1 33)mm ,S2 为 (12 2 2± 1 19)mm和(6 2 5± 1 2 8)mm ,S3为 (12 4 3± 1 2 6 )mm和 (7 0 3± 1 54)mm ,S4 为 (13 0 7± 1 2 3)mm和 (8 0± 1 80 )mm。S4组和S1、S2 组之间门静脉主干宽度差异具有显著性 (P值均 <0 0 1) ,S3组和S1组之间 (P值 <0 0 1)脾静脉宽度有显著性差异。结论　随着纤维化的发展 ,门静脉主干及脾静脉逐渐扩张。动态观察门静脉主干及脾静脉宽度对了解患者肝纤维化和门脉高压程度有一定的临床意义