急性脑梗死患者血浆循环DNA测定的意义

目的探讨循环DNA在急性脑梗死患者中的应用价值。方法采集20例急性脑梗死患者(研究组)发病后24h内静脉血2ml,采用双重荧光定量PCR技术检测血浆DNA水平,同时检测血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)。采集同期20例健康体检者静脉血为对照组。结果治疗前研究组血浆循环DNA水平显著高于对照组(t=5.237,P=0.000),研究组hs-CRP显著高于对照组(t=4.890,P=0.000);治疗后循环DNA显著下降(t=4.461,P=0.000);hs-CRP治疗前后差异有统计学意义(t=3.964,P=0.000)。脑梗死患者血浆循环DNA水平与其血清hs-CRP水平呈正相关(r=0.613,P=0.022)。结论循环DNA可作为反映脑梗死后脑组织细胞出现损伤及严重程度的一项指标。     

胆汁分离病原菌分布及耐药特征分析

目的研究南京医科大学第一附属医院临床送检胆汁培养的主要病原菌分布及耐药菌感染特征,为临床胆道感染提供诊疗依据。 方法回顾性分析胆汁培养病原菌1 264株及耐药菌感染患者的临床资料,采用VITEK 2 Compact 全自动微生物鉴定及药敏系统进行细菌鉴定、药物敏感性试验,应用 WHONET 5.6进行药敏结果分析,SPSS 22.0统计软件进行耐药菌感染预后分析。 结果临床胆汁培养阳性率为32.1%,共分离阳性菌株1 264株,其中革兰阴性菌780株（61.7%）,革兰阳性菌417株（33.0%）,真菌67株（5.3%）,菌株以大肠埃希菌（25.9%）、肺炎克雷伯菌（10.9%）、屎肠球菌（11.7%）、粪肠球菌（8.9%）为主。药敏结果显示肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物、氨基糖苷类药物、哌拉西林/他唑巴坦敏感性较高(＞59.9%);非发酵菌中铜绿假单胞菌除氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明外对其余抗菌药物敏感性较高(＞52.6%);鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物敏感性均＜47.4%;肠球菌属对高浓度庆大霉素、高浓度链霉素、利奈唑胺、万古霉素敏感性较高（＞63.3%）,除对万古霉素天然耐药的肠球菌,暂未发现对万古霉素耐药的肠球菌。共分离碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌（Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae CRE）50株,以肺炎克雷伯菌（62.0%）、大肠埃希菌（26.0%）为主。胆道感染CRE患者多为男性、50岁以上、有恶性肿瘤、肝移植、外伤等严重的原发疾病、有外科手术及胆汁引流史,易合并血流感染,患者预后受CRE细菌类型和有无消化道出血影响,其中碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌（Carbapenem-Resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KPN）是胆汁培养CRE阳性患者预后不良的独立危险因素。 结论本院胆道感染病原菌以肠杆菌科细菌及肠球菌属为主,胆道CRE感染严重。临床应重点防范多重耐药菌,根据胆汁培养CRE类型可判断预后并及时干预,高危患者应主动筛查并及早去除定植耐药菌,降低胆道感染的病死率。     

不动杆菌属5年耐药性监测结果分析

目的:了解不动杆菌属(包括鲍曼不动杆菌、醋酸钙不动杆菌等)的分离率,监测并分析其对临床常用抗菌药物的耐药性变化.方法:采用API鉴定系统鉴定细菌;K-B纸片扩散法测定抗菌药物敏感性;WHONET5.4软件进行数据分析.结果:2002～2006年不动杆菌的临床分离率逐年上升,由2002年的3.3%上升至2006年的6.8%;不动杆菌对多种常用抗菌药物的耐药率有不同程度的上升,其中耐药率增幅较大的是:阿米卡星21.9%～59.6%、哌拉西林/他唑巴坦25.4%～54.6%、头孢他啶41.5%～69.1%.结论:不动杆菌对多种常用抗菌药物耐药率呈上升趋势,应加强监测;同时对于不动杆菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和头孢他啶等药物耐药率的快速增长应引起重视,合理选用抗菌药物.     

2013—2015年血培养主要病原菌分布及药物敏感性分析

目的：统计分析2013—2015年南京医科大学第一附属医院血培养主要病原菌分布及药物敏感性变迁情况。方法：血培养采用BACTEC FX全自动血培养仪;细菌和真菌鉴定及药物敏感试验采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统,链球菌药敏为纸片扩散法(K-B法),真菌药敏采用ATB FUNGUS 3方法,WHONET5.6软件进行统计分析。结果：2013—2015年南京医科大学第一附属医院血培养阳性率10.4%(2 056/19 799),双侧双瓶采血的标本阳性率显著高于单侧双瓶/双侧单瓶和单瓶采血组(P＜0.01)。前5位病原菌分别是大肠埃希菌(21.3%)、肺炎克雷伯菌(11.4%)、金黄色葡萄球菌(6.0%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.4%)和铜绿假单胞菌(4.3%)。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物敏感性最高(＞60%),但耐药株逐渐增多,尤其是耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌。铜绿假单胞菌对除氨曲南以外的抗菌药物均有较好的敏感性(＞70%),而鲍曼不动杆菌对常见抗菌药物敏感性均较低(＜40%)。革兰阳性球菌对万古霉素、利萘唑胺和替考拉宁敏感性较好。结论：双侧双瓶血培养的采血模式有助于提高血培养阳性率,监测污染率。血流感染病原菌中多重耐药株有增多趋势,加强抗菌药物管理和感染控制有重要意义。     

完全胸腔镜与传统开放肺叶切除术对非小细胞肺癌患者围手术期影响的比较

目的:比较完全胸腔镜与传统开放行非小细胞肺癌肺叶切除术对患者围手术期临床疗效?创伤及急性期反应?方法:将40例非小细胞肺癌患者分为完全胸腔镜手术(VATS)组和传统开放手术(TOS)组,每组20例?比较肺叶切除术围手术期临床疗以及血浆游离DNA浓度和血清C反应蛋白(CRP)水平,并进行统计分析?结果:两组无死亡病例,均未出现术后不良并发症,VATS组无中转开胸?两组的手术时间?清扫淋巴结站数及个数?术后引流时间?引流量无统计学差异(P > 0.05)?VATS组的术中失血量?术后疼痛评分?术后下床活动日?术后住院天数明显低于TOS组,有统计学差异(P < 0.05)?两组术前血浆DNA浓度和CRP水平无统计学差异(P > 0.05),术后第1?3和5天各时间点VATS组血浆DNA浓度和CRP水平均明显低于同时间点TOS组(P < 0.05)?结论:完全胸腔镜下非小细胞肺癌肺叶切除术与传统开放手术相比,围手术期疗效没有明显差异,却明显减轻了对机体的创伤?急性期反应和病人的痛苦,具有明确的微创性?     

血浆循环DNA水平与颅脑损伤严重程度的关系

目的 探讨脑外伤患者的严重程度与血浆循环DNA水平的关系.方法 40例颅脑损伤患者按照格拉斯哥昏迷分级(GCS)评分分为轻度12例、中度17例和重度11例,分别采集其受伤48 h内静脉血和30例正常人静脉血各2 ml,提取血浆循环DNA,采用双重荧光定量PCR技术检测血浆DNA水平.结果 颅脑损伤组显著高于对照组且颅脑损伤轻度组、中度组和重度组之间差异有统计学意义(P<0.05);血浆循环DNA水平与GCS评分呈负相关(r=-0.887,P=0.036).结论 血浆循环DNA水平不但对于诊断颅脑损伤有一定诊断价值,而且与其损伤严重程度显著相关.     

血浆DNA定量检测在晚期肺癌患者个体化治疗中的应用

目的通过监测晚期肺癌患者化疗过程中血浆DNA水平的变化,探讨其在疗效预测以及个体化治疗中的应用。方法采集35名晚期肺癌患者化疗前、后静脉血,用磁珠法提取血浆循环DNA和内参照质粒DNA,双重荧光定量PCR技术进行DNA定量检测,以100名体检健康者为对照。结果晚期肺癌患者化疗前血浆DNA平均含量为66.4(33.1~105.0)ng/ml,显著高于健康对照组血浆DNA平均含量22.4(16.2~30.0)ng/ml(P<0.01)。一线药物化疗后,部分缓解组肺癌患者血浆DNA值较化疗前显著下降(P<0.01),且与病情稳定组、病情进展组患者血浆DNA值有显著差异(P均<0.05),而与健康对照组已无差异。生存曲线分析显示,化疗后血浆DNA<50 ng/ml的患者生存率高于血浆DNA≥50 ng/ml的患者(P<0.01)。结论血浆DNA的变化可敏感地反映晚期肺癌患者化疗疗效,在肿瘤个体化治疗中发挥重要作用。     

血浆DNA定量用于重症肝炎患者肝细胞损伤评估

目的定量重症肝炎患者血浆DNA的水平,与ALT比较,评估鉴别重症肝炎的临床应用价值。方法收集30例重症肝炎患者外周血标本6ml,以急性肝炎(20例)、慢性乙肝(90例)、肝硬化(45例)和健康体检者(100例)作为对照。用磁珠法提取血浆DNA,双重实时荧光定量PCR测定血浆DNA。结果乙型肝炎患者的血浆DNA水平(中位数)显著高于健康对照(104.2ng/mlvs.23.4ng/ml,P=0.0000)。血浆DNA水平在重症肝炎患者和急性肝炎、慢性乙肝及肝硬化患者之间都具有显著性差异(P=0.0018、0.0000和0.0000)。乙型肝炎患者的血清ALT水平(中位数)显著高于健康对照(107.5U/Lvs.24.1U/L,P=0.0000)。重症肝炎患者的血清ALT水平与急性肝炎之间有显著差异(P=0.0024),但与慢性乙肝和肝硬化之间没有差异(P=0.0600和1.0000)。ROC曲线分析显示,在鉴别重症肝炎和肝硬化以及慢性乙肝时,血浆DNA的鉴别能力显著优于血清ALT(AUC,0.95vs.0.51,P=0.0000;0.86vs.0.34,P=0.0000)。结论用双重荧光定量PCR检测血浆DNA...     

甜菜碱对铜绿假单胞菌生物膜形成与分散及耐药性的影响

目的探讨甜菜碱对铜绿假单胞菌生物膜形成抑制及分散的作用,及其生物膜的形成与抑制对铜绿假单胞菌耐药性的影响。方法收集20株临床铜绿假单胞菌,采用结晶紫染色法进行生物膜形成能力试验及甜菜碱对铜绿假单胞菌的生物膜抑制与分散试验,并比较铜绿假单胞菌在生物膜形成与抑制情况下对环丙沙星的最低抑菌浓度(MIC)变化。结果 20株铜绿假单胞菌均形成生物膜,24 h时即可形成成熟生物膜,吸光度(A_(590 nm))为1.90±0.66。与对照组比较,甜菜碱作用24 h则可明显抑制铜绿假单胞菌生物膜形成(t=4.36,P0.01),48 h可达最大抑制作用,_(590 nm)为1.12±0.60;甜菜碱对铜绿假单胞菌的成熟生物膜分散作用24 h即可达最大分散作用。环丙沙星对20株铜绿假单胞菌MIC范围0.03~4μg/mL,MIC_(50)为0.25μg/mL,MIC_(90)为2μg/mL,甜菜碱抑制生物膜后环丙沙星MIC无变化。形成成熟生物膜后环丙沙星MIC均大于16μg/mL。结论甜菜碱可有效抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成并能分散成熟生物膜,为临床感染的治疗带来更多选择。环丙沙星在有甜菜碱参与抑制时,对产膜细菌杀菌效果无变化。     

基于主题学习的自主学习模式在微生物检验课程中的应用

随着医学科学和信息化技术的飞速发展,培养医学生的自主学习能力显得尤为重要。笔者所在教学团队为提高学生的自主学习能力,自2009年起探索不同教学模式在医学检验技术专业微生物检验课程中的应用,认为对学生自主学习能力的培养可以采用以课堂理论知识为基础、自主学习主题任务的自主学习教学模式,能够在保证教学质量的基础上,培养学生自主学习的能力,促进微生物检验教学质量。