黄花蒿Dof基因家族鉴定及在GA-UV处理下对青蒿素生物合成的影响＊

目的 Dof（DNA binding with one finger）家族是高等植物中特有的一类转录因子家族，参与植物中光、激素、非生物胁迫等多种胁迫响应调控。本研究基于全基因组数据对黄花蒿Dof（AaDof）转录因子家族进行鉴定及表达模式分析，探究Dof家族基因在青蒿素合成调控中的作用。方法 经PFAM数据库鉴定获得AaDof序列，通过生物信息学软件分析其理化性质、亚细胞定位、基因结构、蛋白保守结构以及启动子序列结合元件等，并基于赤霉素（Gibberellic acid， GA）、紫外线B（UV-B）及二者协同胁迫下黄花蒿转录组数据对其表达模式进行分析。结果 本研究从全基因组水平共鉴定出51个AaDof基因，均含有保守的C₂-C₂单锌指结构，依据系统发育分析分为8个亚族，同一亚族内基因结构与蛋白保守结构域相对保守。亚细胞定位预测显示12个AaDof蛋白定位在细胞外，其余均定位在细胞核。启动子元件分析发现AaDof家族基因启动子区富含光、激素等多种响应元件。对AaDof在GA、UV-B和GA+UV-B处理下的表达模式分析发现，AaDof基因对GA胁迫处理响应较弱，仅有少量基因敏感，其表达主要受到UV-B胁迫影响。C1及C2.1亚族大部分基因在UV-B胁迫下上调表达，而A亚族大部分基因在UV-B胁迫下下调表达。qRT-PCR验证表明AaDof1、AaDof17和AaDof44在GA和UV-B处理下表达量显著上调，推测其可能通过参与GA和UV-B调控网络，正向调控青蒿素生物合成。结论 本研究系统鉴定了黄花蒿AaDof家族基因并筛选了3个可能正向调控青蒿素生物合成的候选AaDof基因，为黄花蒿Dof家族基因功能研究及其在青蒿素生物合成中的调控机制解析奠定基础。     

Epsin3在结直肠癌中的差异表达及生物信息学分析

目的 探讨介导内吞作用的衔接蛋白epsin 3（EPN3）在结直肠癌中的表达及意义,为深入研究EPN3的调控模式提供实验依据。 方法 分别运用GEPIA和GEDS数据库分析EPN3在结直肠癌组织和细胞中的表达情况,并通过SMART和cBioPortal数据库分析EPN3基因甲基化和拷贝数变异与其表达水平的关系;利用Metascape数据库对EPN3相关的共表达基因集进行GO富集和通路分析;运用BioPlex蛋白互作数据库分析EPN3在HCT116细胞中的蛋白作用网络。为了对EPN3进一步验证,我们收集13对结直肠癌癌旁组织和癌组织标本,用Real-time PCR检测EPN3 mRNA表达;并通过敲减EPN3观察其对肿瘤细胞增殖、集落形成和迁移能力的影响。 结果 GEPIA、GEDS、SMART和cBioPortal等数据库分析显示,EPN3在结直肠肿瘤组织中高表达(P<0.01)。其表达水平与甲基化和拷贝数变异相关。EPN3相关基因的富集结果显示主要与细胞黏附相关。EPN3与UBB、CCDC130、TNFAIP1、PHGDH、EPN2等构成的蛋白相对作用网络与蛋白泛素化有关。Real-time PCR结果显示,EPN3在癌组织中高表达(P<0.05)。通过沉默EPN3可以抑制HCT116和HT29细胞的增殖、集落形成和迁移能力。 结论 EPN3在结直肠癌组织中高表达,且与细胞黏附和蛋白泛素化等生物学过程有关,敲低EPN3可抑制结直肠癌细胞系HCT116和HT29的增殖、集落形成和迁移等过程。     

炭疽杆菌芽胞染色法的改进

芽胞是某些细菌在一定条件下形成的特殊结构 ,不同种类的细菌其芽胞的形态、染色和位置等有较大差异 ,因此直接观察细菌的芽胞可作为鉴定细菌的方法之一。常用的芽胞染色方法很多 ,但这些常规方法用于炭疽杆菌芽胞染色 ,效果总是不很满意。我们通过用微波多次加热菌液 ,对炭疽杆菌芽胞常规染色方法进行了改进 ,取得了较好的效果。1　材料和方法1 .1　材料　 1石碳酸复红染液 :取碱性复红酒精饱和溶液 1 0ml,加 5 %石碳酸水溶液 90 ml。 2 95 %酒精 ;3美兰染液 :取2 %美兰酒精饱和溶液 3 0 ml,加 0 .0 1 %KONa水溶液 1 0 0 ml。4炭疽杆菌…     

血管性认知功能损害的P300特点及其相关因素

目的研究血管性认知功能损害(vascularcognitiveimpairment,VCI)患者P300的变化特点,探讨P300在早期识别VCI中的应用价值。方法采用听觉Oddball程序,测定40例VCI和15例血管性痴呆(vasculardementia,VD)患者的P300,同时测定MMSE,并与影像学特点、相关危险因素综合分析评价。结果VCI和VD两组患者P300潜伏期显著延长,波幅明显降低(P<0.01,P<0.001),并与MMSE的评分降低显著相关(r=-0.599,P<0.05);以病灶位于额、颞叶者P300的异常更显著;患有糖尿病者P300的异常变化更明显。结论P300波能客观的反映患者的认知机能,且较MMSE敏感,能更早地反映细微的认知障碍或智能障碍;P300测定对于早期确定患者有无认知障碍及其程度以及对患者预后的预测有很重要的临床应有价值。     

藏药“佐太”长期给药对大鼠肾脏潜在氧化损伤的初步研究

目的:初步探讨长期给予藏药"佐太"对大鼠肾脏可能存在的氧化损伤,以期揭示藏药"佐太"长期用药对肾脏可能存在的过氧化毒性作用,为"佐太"制剂在临床上的安全合理使用提供一定的理论依据。方法:将120只SD大鼠随机分为空白对照组和藏药"佐太"高、中、低剂量组,通过对大鼠给予"佐太"混悬液90天、180天及停药恢复30天,对动物进行一般观察,检测大鼠肾脏中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,计算其肾脏系数并进行肾组织病理学检查。结果:连续给药"佐太"90天、180天及停药30天后,与空白对照组比较,藏药"佐太"各给药组大鼠外观体征、行为活动、进食及排便情况均无明显异常,各给药组大鼠肾脏中MDA含量、SOD活性、肾脏系数及肾组织病理学与空白对照组比较均无明显差异(P0.05)。结论:推测长期使用藏药"佐太"对大鼠肾脏不产生明显的氧化损伤和肾脏毒性作用,但其安全性问题仍然需要广泛而深入地研究。     

宫颈鳞癌组织中血管生成拟态及HIF-1α的表达

目的研究宫颈鳞癌组织中是否存在血管生成拟态(VM),以及其与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与宫颈鳞癌发生发展浸润转移的关系和临床意义。方法 收集2010年1月至2011年12月泸州医学院附属医院经病理证实为人宫颈鳞癌组织石蜡标本67例,进行CD34/过碘酸雪夫染色(PAS)双重染色检测是否存在VM;采用免疫组化检测HIF-1α在宫颈鳞癌组织中的表达,分析VM与HIF-1α的相关性及临床病理特征。另随机选择同期因子宫肌瘤行子宫全切手术的正常宫颈组织标本20例作为对照。结果 宫颈鳞癌组织中VM和HIF-1α阳性率分别为38.81%(26/67)、64.18%(43/67),显著高于正常宫颈组织[0(0/20)],差异均有统计学意义(P<0.05);不同病理分级、国际妇产科联盟(FIGO)分期及有无淋巴结转移患者宫颈鳞癌组织中VM阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤大小及有无淋巴结转移患者HIF-1α阳性率比较,差异也均有统计学意义(P<0.05)。VM与HIF-1α呈正相关(r=0.339,P<0.05)。结论 宫颈鳞癌组织中存在VM、HIF-1α高表达可能促进VM的形成,可能共同促进宫颈鳞癌的浸润和转移。     

大黄甘草汤汤剂与煎膏剂中药效成分的比较研究

目的采用HPLC-DAD法分析大黄甘草汤剂和煎膏剂中12种药效组分。方法采用HypersilGold-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量0.8 mL/min,进样量20μL。二蒽酮类(流动相:甲醇–0.1%磷酸,梯度洗脱,时间25 min,柱温30℃,检测波长340 nm),蒽醌类(流动相:乙腈–0.1%磷酸,时间40 min,柱温20℃,检测波长254 nm),黄酮类和三萜类(流动相:乙腈–0.2%甲酸,梯度洗脱,时间55 min,柱温25℃,检测波长254、276、370 nm)。结果 2种二蒽酮类(番泻苷A、番泻苷B)和5种蒽醌类(大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素)的含量在汤剂中明显低于煎膏剂。而三萜类(甘草酸)和3种黄酮类(甘草苷和异甘草苷、甘草素)的含量在汤剂中高于煎膏剂,特别是甘草苷。煎膏剂中12种成分的总量与汤剂相当。结论煎膏剂的制备方法可能更利于大黄中二蒽酮类和蒽醌类成分的溶出或延缓了二蒽酮类成分的分解,同时抑制了甘草中三萜类和黄酮类成分的溶出或加快了这些成分的分解速度。由于二蒽酮类和蒽醌类是本方发挥药效作用的主要成分,且是君药大黄中主成分,因此大黄甘草煎膏剂可能比汤剂更有效。     

社区护理运用于老年高血压患者社区管理中的价值评价

目的:探讨社区护理在老年高血压患者社区管理中的价值。方法:将社康中心老年高血压患者120例随机分为观察组和对照组各60例,对照组行一般管理,观察组在对照组基础上行社区护理,对比护理效果。结果:观察组患者血压、血糖、甘油三酯、胆固醇、不良生活方式和行为习惯等指标显著优于对照组,P0.05。结论:社区护理运用于老年高血压病人社区管理能有效促进患者形成良好生活方式和行为习惯,提高治疗率及病情控制率。     

低分子肝素钠联合华法令治疗对妇科恶性肿瘤术后DV T防治作用研究

目的探讨低分子肝素联合华法令治疗对妇科恶性肿瘤患者术后深静脉血栓(DVT)形成的预防效果,观察并分析其对患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、P选择素(P-selection)水平的影响。方法选择2014年9月至2017年7月由该院收治的144例妇科恶性肿瘤术后患者为研究对象进行研究,采用随机数字表法将其随机分为对照组72例和联合组72例,其中对照组患者给予低分子肝素钠治疗,联合组患者在对照组治疗基础上联合给予华法令钠片口服治疗。比较两组患者术后下肢DVT的发生率,治疗前后凝血指标包括:凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、血小板计数(PLT);下肢周径、血液流变学指标(全血低切黏度、全血中切黏度、全血高切黏度、血浆黏度);术后出血事件发生情况;比较两组患者治疗前后血清Hcy及P-selection水平变化情况。结果联合组DVT发生率为5.56%,显著低于对照组的18.06%,差异有统计学意义(χ2=5.403,P=0.020);治疗后联合组PT、APTT显著长于对照组,D-D、FIB则显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后联合组全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后联合组下肢周径为(20.14±3.52)cm,明显小于对照组的(21.73±3.40)cm,差异有统计学意义(t=2.757,P=0.007);对照组术后出血事件发生率为4.17%,联合组为9.72%,两组比较差异无统计学意义(χ2=1.719,P=0.190);两组患者治疗前血清Hcy和P-selection水平差异无统计学意义(P0.05),治疗后较治疗前均明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且联合组血清Hcy和Pselection均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论低分子肝素钠联合华法令治疗对于行手术治疗的妇科恶性肿瘤患者术后DVT的形成具有显著的效果,其有利于改善血液高凝状态和血液流变性,减小下肢周径,降低患者术后血清Hcy和P-selection水平,而且不会增加抗凝治疗导致出血事件的发生风险,具有较高的临床推广应用价值。