HGF/c-Met轴介导EPCs治疗大鼠HPAH的初步实验研究

目的：探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）/c-Met轴介导内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）移植入低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary artery hypertension,HPAH）大鼠对大鼠的肺动脉压力和肺血管重构的影响。方法：构建HPAH模型大鼠;大鼠骨髓原代EPCs提取、培养和鉴定;构建c-Met腺病毒并转染EPCs;将大鼠分为c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组,每组10只。前2组大鼠通过尾静脉分别输注c-Met-EPCs细胞和EPCs细胞,后2组大鼠输注生理盐水;饲养一周后检测平均肺动脉压力（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）和右心室肥大指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）;透射电镜检测肺动脉超微结构改变,肺组织病理切片观察肺小动脉改变;ELISA法测定血清内皮素-1（endothelin-1,ET-1）含量,Griess法测定血清一氧化氮（nitric oxide,NO）含量。结果：c-Met-EPCs细胞组、EPCs细胞组、肺动脉高压组和正常组4组大鼠的mPAP值分别为（23.17±3.07）、（30.85±3.15）、（33.55±5.47）、（20.30±1.99） mmHg;RVHI值分别为（32.48±2.38）%、（37.54±4.42）%、（38.53±2.81）%、（26.05±3.05）%;血清ET-1值分别为（69.45±6.32）、（95.76±7.31）、（99.14±8.39）、（62.35±6.06） ng/L;血清NO值分别为（99.63±11.40）、（56.07±3.32）、（48.83±6.56）、（125.50±12.26） μmol/L。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的mPAP、RVHI和血清ET-1含量明显高于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显降低（P<0.05）。EPCs细胞组、肺动脉高压组大鼠的血清NO含量明显低于正常组（P<0.05）;c-Met-EPCs细胞组较EPCs细胞组、肺动脉高压组明显升高（P<0.05）。透射电镜显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀、内皮细胞中断不连续,而c-Met-EPCs细胞肺动脉中膜平滑肌细胞线粒体和内质网肿胀不显著。肺组织病理切片显示EPCs细胞组、肺动脉高压组肺血管重构明显,而c-Met-EPCs细胞组肺血管重构减轻。结论：HGF/c-Met轴介导内皮祖细胞移植入低氧性肺动脉高压大鼠后可明显降低肺动脉压力和和改善肺血管重构,其机制可能与抑制ET-1释放和促进NO产生有关。     

HGF/c-Met促进大鼠骨髓内皮祖细胞迁移能力

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)迁移能力的影响及其机制。方法提取、培养和鉴定大鼠骨髓EPCs;重组腺病毒载体介导c-Met基因转染EPCs,用real-time PCR、Western blot和CCK8分别检测c-Met的表达和细胞增殖;分别用0、5、10、20和50 ng/m L HGF处理Ad-c-Met-EPCs,并通过Transwell迁移系统检测Ad-c-Met-EPCs的迁移能力;选取适宜浓度的HGF处理EPCs、Ad-GFP-EPCs和Ad-c-MetEPCs,并设置PBS对照组和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002组(同时加入HGF和10 g/L的LY294002),通过Transwell迁移系统和Western blot分别检测各组细胞的迁移能力、Akt和P-Akt的表达。结果 1)Ad-c-Met-EPCs中c-Met基因与蛋白均为高表达(P0.05)。2)c-Met基因对EPCs的增殖无明显影响。3)HGF在0~50 ng/m L范围内呈浓度依赖性促进Ad-c-Met-EPCs迁移。4)HGF+Ad-c-Met-EPCs组的迁移能力和P-Akt的表达显著高于对照组、HGF+EPCs组、HGF+Ad-GFP-EPCs组和HGF+LY294002+Ad-c-Met-EPCs组(P0.05)。结论 HGF/c-Met能够显著提高EPCs的迁移能力;HGF/c-Met可能通过PI3K/Akt信号通路促进EPCs的迁移。     

轻度贫血简单先天性心脏病患儿无血预充的临床研究

目的：探讨对于术前有轻度贫血的简单先心病患儿采用无血预充的安全性及可行性。方法：回顾性分析2014年2月至2016年2月于我院行先天性心脏病根治术治疗的术前有轻度贫血的99名简单先心病患儿[最终分为无血手术组（n=87）和术中输血组（n=12）]的术前一般情况,围术期血气分析情况及术后恢复情况。结果：无血手术组患儿及术中输血组患儿术前一般情况、围手术期血气分析指标均无明显差异,且术后呼吸机辅助通气时间、24 h引流量、ICU停留时间、术后住院时间等无明显差异（P值分别为0.85、0.91、0.22、0.84）。结论：对于术前轻度贫血的简单先心病患儿实施无血手术可节约术中用血,并且对患儿术后恢复情况无明显不良影响,是安全可行的,对于目前提出的无血预充患儿术前尽量纠正贫血至正常的要求可酌情适当放宽,以降低延误病情的风险,同时准确把握无血预充患儿术中输血指征可进一步平衡临床输血与贫血的矛盾,降低临床不合理用血,积极应对血源紧张形势。     

儿童肋骨分叉畸形的临床诊治

目的探讨儿童肋骨分叉畸形的临床诊治经验,以期提高对该疾病的认识,降低漏诊和误诊的发生率。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院心胸外科2011年4月至2015年4月收治的44例肋骨分叉畸形患儿的临床资料,其中男29例、女15例,年龄2.5~14.0(5.9±2.8)岁,均行手术治疗。分析总结临床特点、诊断、治疗方法和手术时机等。结果 44例患儿中男女比例约为2∶1;右侧畸形32例(72.7%),左侧畸形10例(22.7%),双侧多发畸形2例(4.5%),右左侧畸形比例约为3∶1;右侧第4肋骨畸形有15例(34.1%),右侧第5肋骨畸形有16例(36.4%);合并其他疾病者13例(29.5%)。其中29例采用畸形肋骨切除术,15例采用畸形肋骨切除术和胸廓矫形术,术后病理均符合肋骨分叉畸形。术后随访1~5年,患者胸廓形态恢复良好,均无远期并发症发生。结论 CT三维成像是肋骨分叉畸形诊断的有效辅助手段。肋骨分叉畸形一经确诊需密切随访,若发展较快或严重影响胸廓形态,推荐手术治疗,通过随访提示手术治疗效果良好。