Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性与广州番禺人群2型糖尿病的相关性研究

目的探讨广州市番禺区人群2型糖尿病(T2DM)与Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性的相关性。方法提取来自番禺人群的非糖尿病人(对照组)和T2DM患者(T2DM组)的DNA,采用PCR-RFLP,检测其Preproghrelin基因rs696217位点的基因型,比较组间基因型、等位基因频率分布的差异。结果对照组116例样本中,CC 96例、AC 20例,AA 0例;基因型频率分别为:0.828、0.172、0。T2DM组118例样本中,CC 89例、AC 24例、AA 5例,基因型频率分别为:0.754、0.203、0.043。对照组和T2DM组的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。组间基因型和等位基因频率差异无统计学意义。结论未发现Preproghrelin基因rs696217位点单核苷酸多态性与广州市番禺区人群2型糖尿病直接相关。但在T2DM组中检测到AA基因型,预测等位基因A在T2DM发生中可能有某种作用,有待进一步研究。     

研究式教学模式在生物化学实验教学中应用的研究?

探讨研究式教学模式在生物化学教学中的应用效果。在学生实验课中,以基本实验为基础,开展学生自己设计研究课题、研究方案试点。以问卷调查的方式了解学生对研究式教学效果的评价,结果显示:90%以上的学生愿意接受或支持研究式教学模式;80%以上的学生认为,研究式教学模式有利于学习主动性、合作性、研究性、创新性的提高。因此研究式教学模式是多数学生支持和认可的一种新的模式,值得研究、试点和推广。     

结直肠癌合并糖尿病与淋巴结转移的关系

目的探讨结直肠癌合并糖尿病与淋巴结转移的关系。方法对选取2006年1月^至2011年12月间收治的313例结直肠癌患者进行病例对照研究,分析合并糖尿病的结直肠癌患者的淋巴结转移情况。结果 313例结直肠癌患者中,有45例合并糖尿病,占14.4%。45例结直肠癌合并糖尿病患者的淋巴结转移率为51.1%,268例无糖尿病结直肠癌患者的淋巴结转移率为32.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌合并糖尿病患者的淋巴结转移率较高。     

乙醛脱氢酶2基因G1510A多态位点等位基因的克隆及应用

目的 克隆乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因G1510A多态位点(rs671位点)的野生型和突变型等位基因,为该位点的基因分型提供参照品.方法 分别以经测序证实的rs671位点野生型纯合子和突变型纯合子样品为模板,PCR扩增跨越该位点的DNA片断,采用胶回收试剂盒纯化PCR产物,T-A克隆构建重组质粒,PCR和测序验证重组质粒是否构建成功,PCR-RFLP法检验其应用效果.结果 PCR和测序均证实目的基因被成功克隆,将重组质粒用于PCR-RFLP法基因分型之中,能正确区分样品的基因型.结论 成功构建了rs671位点的野生型和突变型等位基因重组质粒,可用作该位点基因分型的参照品.     

BMPR-Ⅱ基因mRNA荧光定量PCR检测标准品的构建

目的构建检测BMPR-Ⅱ基因mRNA表达水平差异的标准品。方法以人胚肺成纤维细胞的总RNA为模板、O ligo(dT)18为引物逆转录产生cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人BMPR-Ⅱ基因相应的cDNA片断,构建pMD-18-BMPR-Ⅱ重组质粒,经鉴定测序,用荧光定量PCR制作标准曲线。结果成功克隆了人BMPR-ⅡcDNA,并以其为标准制作出荧光定量PCR标准曲线。结论成功构建了BMPR-Ⅱ基因荧光定量PCR标准质粒,为今后BMPR-ⅡmRNA的荧光定量PCR检测打下了基础。     

广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性研究

目的研究广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性。方法PCR扩增跨越CYP2C9基因T269C位点的DNA片断,用MvaI酶切PCR产物,通过PAGE-银染判断基因型。结果在接受检测的158例健康广东人中,共检出2名CYP2C9 T269C位点杂合子个体,其余156人均为野生型纯合子个体。结论广东人群存在CYP2C9 269C即CYP2C9*13等位基因,其频率为0.006;中国人群和韩国人群CYP2C9*13等位基因频率差异无显著性。     

CEA,p53、Ki-67、GST-π在大肠癌组织表达及其相关性研究

[目的]探讨大肠癌中CEA、p53、Ki-67、GST-π的表达与临床病理分期之间的关系。[方法]回顾性分析2004年1月-2007年6月收治的63例大肠癌患者的临床、病理资料，对肿瘤石蜡标本采用免疫组化SP染色法检测CEA、p53、Ki-67、GST-π，分析其免疫组化特点及其与临床病理之间的关系。[结果]CEA、p53、Ki-67、GST-π在大肠癌切片中的阳性率依次为95.2％、55．6％、52．4％、82．5％。p53、Ki-67与肿瘤的Dukes’分期和淋巴结转移有关，在Dukes’C、D期的阳性表达率明显高于Dukes’A、B期患者。p53、Ki-67表达之间呈现明显的正相关：GST-π和p53两者的表达呈正相关。[结论]大肠癌CEA、p53、Ki-67、GST-π表达与其发生发展和浸润转移密切相关，联合检测对了解大肠癌的生物学行为和判断患者预后有一定的实用价值。     

广东地区人群CYP2C9基因启动子区-1189C/T位点的多态性

目的:检测中国广东地区人群CYP2C9基因启动子区-1189C/T位点的多态性并调查其等位基因及基因型频率.方法:提取152例广东药学院新生外周血基因组DNA,PCR扩增含CYP2C9基因-1189C/T位点的DNA片段,用MboⅡ酶切PCR产物,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染判断基因型.结果:在检测的152例样本中,CYP2C9基因-1189C/T位点基因型:C/C 21例、C/T 82例、T/T 49例,其相应的频率分别为0.14、0.54、0.32,符合Hardy-Weinberg平衡;等位基因-1189C和-1189T的频率分别为0.41和0.59,与日本人群和西班牙人群相比,差异没有统计学意义.结论:本研究建立了一种基于PCR-RFLP的简单、快速、灵敏的检测CYP2C9基因-1189C/T位点多态性的方法;CYP2C9基因-1189C/T位点多态性在中国广东地区人群中极为常见,是一个较好的遗传标志.     

广州地区HCMV临床病毒株UL137基因的结构特征与多态性

【目的】研究广州地区新生儿感染人巨细胞病毒（HCMV）临床低传代分离株UL137基因的结构特征与基因多态性。【方法】从62份被证实为临床HCMV感染的新生儿尿液标本中分离获得3株低传代临床病毒株，经多重PCR鉴定后分别命名为HCMVD2、D3和D52。对3株临床分离株进行HCMVUL137基因全序列PCR扩增，PCR产物纯化后进行基因克隆，构建HCMVUL137-pMD18-T重组质粒；基因测序；将HCMVUL137基因序列呈报GenBank，并进行基因生物信息学分析。【结果】成功从广州地区新生儿感染HCMV患儿体内分离3株HCMV临床病毒株。克隆测序后呈报GenBank并被收录，收录序列号分别为：DQ180388、DQ180376、DQ180360。通过序列分析，结果显示低传代分离株UL137基因DNA序列高度保守，同源性在96．91％～100％之间．其变异均为碱基替换：编码蛋白均由96个氨基酸残基组成，同源性在90．63％～100％之间，超半数的变异发生在第61～81位氨基酸残基之间：编码蛋白翻译后修饰位点包括PKS、MYS、cAMPs三类，其中4个PKS和44～49位的MYS高度保守，cAMPs位点仅在5株病毒出现；编码蛋白等电点在11．50～12．00之间，呈强碱性。【结论】广州地区临床低传代分离株HCMVUL137基因核苷酸序列及其编码蛋白的氨基酸序列极为保守，但仍存在-定多态性。提示HCMVUL137ORF可能是-个具有重要功能的基因。