标本放置时间对PL-11检测血小板功能的影响

目的 探讨标本在室温保存时,不同放置时间对血小板功能检测仪PL-11结果的影响.方法 采集我院2012级学员队20位健康学员及2013年我院门诊20位服用氯吡格雷和阿司匹林的冠心病患者肘静脉枸橼酸钠抗凝全血,应用PL-11分别在采血后不同保存时间点(2 h、4 h、8 h)测定不同血小板活化诱导剂诱导的血小板聚集率.结果 健康组:以花生四烯酸(arachidonic acid,AA)为血小板活化诱导剂时,2 h、4 h、8 h的放置时间对血小板聚集功能未产生影响(P>0.05);二磷酸腺苷(adenosine di-phosphate,ADP)为诱导剂时,血小板聚集率在4 h明显降低(P<0.01),8 h时已经降低至4.3%(P<0.01);胶原(collagen,Col)诱导的血小板聚集率在采血后4 h时较2 h明显降低(P<0.01),但与8 h差异无统计学意义(P>0.05).服用抗血小板药物组:AA诱导的血小板聚集率2 h、4 h、8 h两两差异均无统计学意义(P>0.05),ADP诱导的血小板聚集率在4 h时明显降低(P<0.01),4 h与8 h差异无统计学意义(P>0.05),Col诱导的血小板聚集率在8 h后出现明显降低(P<0.01).结论 枸橼酸盐抗凝血标本采集后放置时间对PL-11血小板功能检测存在影响,在检测健康人组或已服用双联抗血小板药物患者组时,AA诱导血小板聚集受时间影响较小,ADP与胶原诱导血小板聚集时随着标本放置时间延长,血小板聚集率降低.结合凝血功能检测对枸橼酸盐抗凝血的要求,PL-11检测血小板功能时,AA诱导聚集可在采血后4 h内完成,ADP与胶原诱导应在采血后2 h内完成.     

中性粒细胞碱性磷酸酶在传染性非典型肺炎诊断与鉴别诊断中的价值

目的　探讨中性粒细胞碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase ,ALP)活性在传染性非典型肺炎 (严重急性呼吸综合征 ,SARS)患者诊断与鉴别诊断中的应用价值。方法　抽取 138例临床确诊的SARS患者、14 4例除外SARS的其他发热患者和 15 7名正常健康人 (男 80例 ,女 77例 )静脉血 ,制备血涂片。所有血涂片依改良Gomori氏法进行ALP细胞免疫组织化学染色 ,显微镜油镜观察 10 0个中性粒细胞 ,以阳性率和积分记录结果。结果　正常健康人群中性粒细胞碱性磷酸酶染色 (NAP)阳性率和积分中位数均为 10 0 0 ,差异无统计学意义 (P >0 0 5 ,P >0 0 5 ) ;非SARS发热患者组、SARS患者组中性粒细胞ALP阳性率 (中位数 )分别为 4 0 0 0、16 0 0 ,积分分别为 5 0 5 0、17 0 0 ,经统计学处理表明 ,不论NAP阳性率还是积分 ,非SARS发热患者高于SARS患者 ,SARS患者高于正常对照 (P<0 0 1)。结论　正常健康人群、非SARS发热患者、SARS患者间中性粒细胞碱性磷酸酶存在差异 ,将中性粒细胞碱性磷酸酶用于SARS的诊断与鉴别诊断有待进一步观察。     

氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法比较

目的氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法比较:Verifynow抗血小板治疗监测系统与流式细胞仪法.方法随机收集72例门诊、住院患者静脉血标本,同时采用Verifynow抗血小板治疗监测系统与流式细胞仪法检测血小板聚集功能.结果 Verifynow的测试结果P2Y12 Reaction Units(PRU)19例<240(26.4%);血小板膜糖蛋白分子PAC-1(Fg、Ca2+与血小板GPⅡb/Ⅲa形成复合物的受体)活性值主要集中在20-60,2例<20,12例>60;血小板膜糖蛋白分子CD62p(P选择素)活性值主要集中在10以下,3例>20;血小板膜糖蛋白分子PAC-1与CD62p活性值呈正相关(r=0.812,P<0.01);PAC-1、CD62p的活性值分别与PRU呈正相关(r=0.565,P<0.01;r=0.314,P<0.01);PRU与Verifynow测试的血小板聚集抑制百分率(INHI)呈负相关(r=-0.0802,P<0.01).结论 PAC-1、CD62p活性值与PRU呈正相关,相关性良好,PRU与INHI呈负相关.氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法存在同一性效用,但流式细胞仪法检测过程繁琐,对检验人员操作水平要求严格,若想得到药物的具体效用结果,必须在服药前、后分别抽血取样测定才能得出药物的抑制率;Verifynow操作简单快速,只需在服药后抽取一份样本即可得到样本的聚集基础值、服药后聚集值和药物的抑制率.     

成人中性粒细胞碱性磷酸酶影响因素探讨

目的：探讨成人中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilic alkaline phosphatase，NAP)在不同条件下多种因素对NAP染色阳性率和积分的影响。方法：随机抽取398例健康成人新鲜静脉血，EDTA-K2真空管抗凝，制备血涂片；同时取其中157例新鲜末梢血，制备血涂片；另将同一EDTA-K2真空抗凝管中的血分成三份，分别置4℃、22～25℃、37℃条件下，在不同时间段制备血涂片；将上述血涂片依改良Gomori法进行NAP细胞组化染色，显微镜油镜观察100个中性粒细胞，以阳性率、积分记录结果。结果：EDTA-K2抗凝静脉血NAP阳性率和积分参考范围分别为：1％～50％，1—56；末梢血NAP阳性率和积分参考范围分别为：4％～56％，5～70。抗凝剂、试剂pH、标本保存温度与时间、温浴时间等均为NAP染色结果的重要影响因素，但NAP无性别和年龄差异。结论：多种因素均对NAP实验结果构成影响，各实验室应根据自身实验条件而建立参考范围且实验过程中应注意质量控制。     

VerifyNow对比血小板聚集仪分析氯吡格雷药效

目的比较检测氯吡格雷抗血小板功能的2种实验方法的异同。方法随机收集207例门诊和住院急性冠状动脉综合征患者,其服用氯吡格雷后,抽取静脉血,同时进行光比浊法二磷酸腺苷诱导的血小板聚集实验与Ver-ifyNow抗血小板治疗监测系统实验,并进行分析。结果血小板聚集仪测得的血小板聚集率(PAgP)156例在40%～80%,占75.4%,25例<40%,占12.1%,26例>80%,占12.6%。VerifyNow分析P2Y_(12)受体的化学反应数值(PRU)126例在240～350,占60.9%,50例PRU<240,占24.2%,31例PRU>350,占15.0%。PAgP与PRU呈正相关,PAgP与抑制血小板聚集率(INHI)呈负相关,PAgP+INHI趋近于一个定值。结论 VerifyNow抗血小板治疗监测系统可作为氯吡格雷药效监测的良好实验方法 。     

PL-11两种诱导剂监测健康人服用氯吡格雷后的血小板功能变化

目的：评价新型血小板功能检测方法PL-11两种诱导剂对氯吡格雷短期效应的监测。方法与以二磷酸腺苷（adenosine diphosphate,ADP）诱导的光比浊法（ADP-LTA）为参照,比较ADP（ADP-PL-11）与胶原（Col-PL-11）诱导的PL-11对健康人服用氯吡格雷后血小板功能变化的监测。结果25名健康青年男性平均年龄（27.5±3.7）岁,服药6 d后,血小板功能均有所降低。Col-PL-11在基础值范围64.7%-83.6%（95%PI）,ADP-LTA结果在基础值范围是65.9%-89.1%（95%PI）,ADP-PL-11为67.2%-86.8%（95%PI）。服药前后Col-PL-11结果存在部分重叠区域。各方法相关性分别为ADP-PL-11 vs LTA, r=0.757,P＜0.001;ADP-PL-11 vs Col-PL-11,r=0.764,P＜0.001;Col-PL-11 vs LTA,r=0.521,P=0.009。以ADP活化LTA结果在服药后比服药前基础值降低至少10%（＞10%）为氯吡格雷低反应性的标准,ROC分析得到ADP-PL-11（临界值66%）敏感度和特异性分别为84.6%,88.2%;Col-PL-11（60.0%）敏感度和特异性分别为69.2%,70.6%。结论 PL-11检测氯吡格雷治疗时ADP比胶原具有较高的敏感度,ADP-LTA与ADP-PL-11之间结果可能存在可交换性,使ADP激活的PL-11检测可能成为替代经典光比浊法的血小板功能监测方法。     

光学比浊法与连续血小板计数法监测血小板聚集功能的比较

目的评价血小板功能检测仪PL-11应用的连续血小板计数方法 （PL-11）监测血小板功能的价值。方法通过光学比浊法（light transmittance aggregometry,LTA）与PL-11连续血小板计数法检测本院2012年26例服用氯吡格雷抗凝治疗的心血管病患者和45例健康志愿者的血小板聚集功能,分析两种方法相关性及差异。结果血小板聚集诱聚剂二磷酸腺苷（adenosine diphosphate,ADP）诱导的LTA与PL-11最大血小板聚集率（maximal aggregation ratio,MAR）存在较好相关性（r=0.766,P〈0.000 1）。分别用LTA与PL-11检测健康志愿者组、服药患者组,最大血小板聚集率均存在统计学差异（P〈0.000 1）。在两组人群中,LTA测得最大血小板聚集率范围均较PL-11广。PL-11在每例标本检测过程中,各测试点提供的平均血小板体积（mean platelet volume,MPV）变化趋势与检测期间血小板聚集率变化情况一致。结论 PL-11连续血小板计数法与＂金标准＂的光学比浊法检测血小板聚集功能时有较好的相关性,其应用价值可供临床及实验室参考。富血小板血浆标本与全血标本可能是两种方法检测结果差异的原因。     

SARS病人核鼓槌体的细胞形态学观察

目的　了解SARS患者中性粒细胞核鼓槌体的临床意义。方法　观察 2 2 0例SARS病人、12 0例SARS复诊病人、6 0例服用大剂量激素治疗的非SARS病人、10 0例高热病人外周血细胞核鼓槌体变化。结果　SARS患者每 10 0个中性粒细胞细胞核有一个鼓槌体的占 34个 ,两个鼓槌体的占 17个 ,三个鼓槌体的占 4个 ;服用大剂量激素治疗的非SARS病人一个核鼓槌体占 4个 ,SARS复诊病人有一个核鼓槌体者占 8个。结论　中性粒细胞核鼓槌体形成可能与SARS病程有关     

富血小板血浆中血小板浓度对血小板聚集的影响

目的探讨富血小板血浆（PRP）血小板浓度对血小板聚集的影响。方法随机收集107名门诊体检健康志愿者静脉血浆,分离PRP和PPP（贫血小板血浆）后,用血液分析仪测定PRP血小板浓度,按PRP浓度用自身PPP配成50×109/L～400×109/L浓度梯度的血浆,用血浆比浊法测血小板聚集率。结果 PRP血小板浓度在50×109/L～400×109/L,二磷酸腺苷（ADP）和花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集率分别为（10.4±8.7）%至（55.3±9.9）%和0%至（75.2±10.1）%,血小板聚集率随血小板浓度的增高而增高,血小板浓度为250×109/L时,聚集率增幅减缓,血小板浓度小于150×109/L时,血小板聚集率明显降低。结论 PRP血小板浓度对血小板聚集的影响明显,血小板聚集试验PRP血小板浓度大于150×109/L;血浆比浊法血小板聚集试验适宜的血小板浓度为250×109/L。     

富血小板血浆血小板浓度与全血血小板浓度和红细胞比容相关性探讨

目的 探讨富血小板血浆(PRP)血小板浓度与全血血小板浓度、红细胞比容(HCT)相关性.方法 随机收集162例门诊体检志愿者静脉血标本,以EDTA-K2,枸橼酸钠抗凝.枸橼酸钠抗凝血800 r/min(离心半径19 cm)离心5 min,分离富含血小板血浆(PRP),应用Sysmex XE-2100血液分析仪测定全血血小板浓度(X1)和HCT(X2),PRP血小板浓度(Y).以HCT 0.35为界,将数据分为正常组和低值组.结果 所得数据采用多元相关性统计分析得到回归方程Y总=1.309 51X1 +744.294 5X2-262.068(R2 =0.897 8);Y正常组=1.380 208X1 +855.884 8X2-323.374(R2=0.892 9);Y低值组=1.088 972X1 +465.228 8X2-123.101(R2=0.961 1).结论 全血血小板浓度、红细胞比容与富血小板血浆血小板浓度相关显著,由全血血小板浓度和红细胞比容可初步推算富血小板血浆血小板浓度.