EB病毒转染冻存全血建立新疆和田长寿老人永生细胞株

目的 改进EB病毒转化冻存全血为人B淋巴母细胞的方法,提高转化效率,克服远距离分散采样造成的实验不便,建立新疆和田维吾尔族长寿老人永生细胞株.方法 采集新鲜肝素抗凝血样,冻存时添加小牛血清和DMSO作为冷冻保护液,复苏后以新鲜制备的EB病毒进行转化,对照组为仅添加10％ DMSO的传统冻存全血法.结果 以改进的冻存全血法成功建立了9株新疆和田维吾尔族长寿老人永生细胞,建系成功率为100％ (9/9),以传统冻存全血法建系成功一例(1/14).HLA基因分型结果在建系前后完全一致.结论 与传统冻存全血法相比,改进后的方法能更有效地转化长寿老人永生细胞株,可为长寿的分子遗传机制研究以及某些细胞生物学性状的检测提供充足的实验材料.     

抗-Di~a试剂血清的制备及应用

目的:制备人源IgG抗-Di a试剂血清,调查乌鲁木齐地区献血者人群中Di a抗原分布频率。方法:用吸收试验方法制备IgG抗-Di a,用间接抗人球方法对987例无血缘关系的献血者进行Di a抗原的筛选,对含有Di a抗原个体用PCR-SSP方法进行基因分型。结果:既去除了B型血清中的抗-A,又未使IgG抗-Di a效价降低,检测效价及特异性符合IgG抗-Di a试剂血清要求,Di a抗原在本地区献血人群中的基因频率为0.011 1。结论:采用吸收方法,解决了人源抗-Di a试剂血清购置困难,同时获得了本地区献血人群中Di a抗原基因频率分布,为临床输血安全提供了保障。     

献血者IgM抗-P_1 12例分析

<正>抗-P1属于冷抗体,最佳反应温度为4℃,在25℃以上不出现凝集反应,故很少有临床意义,但抗-P1直接影响抗体筛选和交叉配血的结果。偶尔有抗-P1在37℃被检出及出现溶血反应的个案报道。现将我室鉴定为抗-P1抗体12例报告如下。1病例介绍我中心化验室对献血者抗体筛选阳性标本进行送检,经鉴定结果为抗-P1抗体12例,一般信息及免疫史调查结果见表1。2血型血清学检查     

1例Rh抗原变异体分子机理研究

目的:研究RhD抗原阳性(变异)、产生IgG-D抗体致新生儿溶血病个体的RHD基因结构。方法:采用常规血清学方法,检测1例RhD抗原,鉴定个体体内引发新生儿溶血病抗体的性质。采用PCR-SSP方法检测分析RHD/RHCE基因。结果:RhD抗原检测符合部分D类,体内存在IgG-D抗体。基因分析发现RHD与RHCE基因交换形成一种新的RHD-CE(3~6)-D融合基因。RHD杂合性试验显示为RHD /RHD-。结论:该个体Rh血型为RH DVIⅢ型(部分D类)。     

异常体液患者5-HTT基因多态性分布比较

目的 探讨异常体液(根据维吾尔医学理论诊断标准和WHO诊断标准)与5-羟色胺转运体(5-HTT)基因启动子区和内含子2区多态性的相关性.方法 按维吾尔医学理论将患者分为4种体液,利用PCR技术检测102例异常黑胆质型患者、44例其他异常体液型患者和45例正常对照组的2种基因多态性的分布频率.结果 异常黑胆质型患者组、其他异常体液型患者组和对照组的5-HTT(5-HTTLPR)多态性的SS基因型频率分别为39.21%,加40.90%,40.00%;S等位基因频率分别为65.19%,65.90%,62.22%,组间差异均元统计学意义.对照组的L/L纯合子基因型频率为15.56%,高于异常黑胆质型患者组的8.83%和其他异常体液型患者组的9.10%.5-HTT.(5-HTTVNTR)多态性各基因型(12/12,12/10,10/10)频率在异常黑胆质型患者组中分别为74.50%,20.59%,4.91%;在其他异常体液型患者组中分别为75.00%,20.45%,4.55%;在对照组中分别为77.77%,17.78%,4.45%,各基因型组间差异均无统计学意义.此外异常黑胆质型患者组5-HTTLPR和5-HTTVNTR的基因型和等位基因频率与其它异常体液型患者组间的差异也无统计学意义.结论 5-HTTL L/L纯合子基因型可能是异常体液疾病发病的保护因子,5-HTT基因多态性与异常体液患者组之间的关系尚需进一步探讨.     

乌鲁木齐市献血者IgM不规则抗体筛查工作流程初探

目的:初步建立乌鲁木齐市献血者IgM型不规则抗体筛查工作流程。方法:检验科采用微板法对血浆标本进行O细胞检测,O细胞反应阳性标本报送血型室进一步进行抗体鉴定。结果:44530份标本共筛查O细胞反应阳性19例,分别是抗-H 8例,抗-P1 3例,抗-Leb 1例,抗-M 1例,自身冷抗体6例。结论:该工作流程能筛查出IgM型不规则抗体,提高输血安全,同时为稀有血型库的建立奠定一定的基础。     

乙型肝炎病毒的核酸检测技术

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）是乙型肝炎的病原体,自1965年Blumberg等发现“澳大利亚抗原”,1970年Dane等在电镜下鉴定了Dane颗粒,即HBV颗粒,从而阐明了颗粒的表面成分,病毒表面抗原（HBsAg）、核壳成分HBcAg和HBeAg。HBV属嗜肝DNA病毒,是不完全环状双链DNA病毒,全长约3．2kb,是目前已知对人类致病的最小双链DNA病毒,严重威胁着人类生命健康。我国HBV的人群携带率约10％,每年新发病例50万,而目前我国仍以HBsAg阳性与否作为筛查献血者HBV感染的指标,     

新疆克里雅人β-珠蛋白基因多态性分析

目的 探讨血红蛋白病的点突变有关β-珠蛋白AvaII位点基因多态性的分布规律.方法 以居住于塔克拉玛干沙漠腹地克里雅河下游封闭人群(克里雅人群)为研究对象,采用聚合酶-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术和凝胶成像分析方法,对54例无血缘关系的健康克里雅人群的染色体进行检测,应用SPSS 12.0统计软件分析基因型频率、基因频率分布,并与其他种族进行比较.结果 调查人群β-珠蛋白AvaII位点基因的等位基因频率:β-Gg1=42.59%,β-Gg2= 57.41%;基因型频率依次为:β-Gg1/2=48.15%,β-Gg1/1=18.52%,β-Gg2/2=33.33%,3种基因型的分布符合哈迪-温伯格(Hardy-Weinberg)平衡吻合度定律.与外国人群相比,β-Gg1/1型分布频率显著高于韩国和柬埔寨人群(χ2 =7.154 3,χ2=6.102 4,P=0.005)而Gg2/2型分布频率显著低于中国南方汉族人群(χ2=6.216 3,P=0.01).β-Gg1和β-Gg2等位基因频率分析显示,克里雅人群同样与中国南方汉族和日本人群的差异有统计学意义(χ2=10.9351,P=0.001).而与其他的人群比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 新疆健康克里雅人群β-珠蛋白AvaII位点基因分布特征及其等位基因频率分布与其他人群不完全相同,存在不同民族与区域上的差异.     

新疆柯尔克孜族人群血小板抗原1～6、15系统基因多态性分析

目的 探讨新疆柯尔克孜族人群人类血小板抗原HPA1-6,15(Gov)系统多态性,分析HPA基因在柯尔克孜族人群中的遗传多态性.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法105例无血缘关系的新疆柯尔克孜族血样进行HPA基因分型.结果 新疆柯尔克孜族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a基因频率分别是0.900 0、0.923 8、0.576 2、1、0.952 4、1、0.566 7;HPA-1b、2b、3b、4b、5b、6b、15b基因频率分别是0.100 0、0.076 2、0.423 8、0、0.047 6、0、0.433 3,新疆柯尔克孜族HPA基因频率与新疆汉族相比,HPA-1a、1b、2a、2b、15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).与新疆维吾尔族相比,HPA-15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).结论 新疆柯尔克孜族人群中HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,其中HPA-3,15系统具有高度多态性,这使免疫暴露的机会增加.