小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的培养及鉴定

目的探索小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的分离培养,为组织工程血管、补片或带瓣管道的制备找新的种子细胞来源.方法采集小儿骨髓,梯度密度离心法分离单核细胞,内皮细胞培养液EGM-2培养,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿进行体外扩增,分别取48 h内贴壁细胞和48 h后贴壁细胞,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮细胞系列标志:CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子以及祖细胞标志CD133.结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子,部分表达CD133.培养至第5代细胞形态基本相似,细胞总数可以达到108以上.结论自小儿骨髓可以分离培养出内皮细胞和内皮祖细胞并能体外扩增,可以作为构建组织工程血管、补片或带瓣管道的种子细胞来源.     

心内直视手术围术期血浆细胞因子的变化

目的：观察低温体外循环心内直视手术中细胞因子的变化,探讨体外循环对其影响。方法：应用ELISA法测定IL－8,TNF－α,IL－10在心脏直视手术围期的血浆浓度,结果：IL－8,IL－10在体外循环结束后明显高于体外循环前（P＜0．05）,TNF－α无明显变化,结论：L-8.IL－10作为重要心炎性介质,参与了缺血再灌注损伤的过程。     

双心室体外循环的肺保护作用

目的 探讨用自体肺氧合的双心室体外循环是否比采用膜肺氧合的常规体外循环对肺组织有更好的保护作用.方法 将12只小猪随机分为双心室体外循环组(实验组)和常规体外循环组(对照组).双心室体外循环方法是在升主动脉、左右心耳和肺动脉插管后,通过左心耳和升主动脉插管组成左心灌注系统,通过右心耳和肺动脉插管组成右心灌注系统.两组均测定转流前、阻断主动脉60min和转流结束时的肺静态顺应性.测定试验前后两组的肺泡-动脉氧分压差.检测实验前后灌注液中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素-6(inter-leukin-6,IL-6)变化.实验结束时取左下肺小块组织测湿干比并进行光镜和电镜观察.结果 实验组肺静态顺应性、湿干比指标均明显优于对照组(P＜0.05),灌注液中的TNF-α含量显著低于对照组(P＜0.05),光镜和电镜下的肺损伤程度轻于对照组.结论 双心室体外循环较之常规体外循环对肺组织有较好的保护作用.     

心脏器质性病变并感染性心内膜炎的外科治疗

目的：讨论心脏器质性病变合并感染性心内膜炎（IE）时的外科治疗及围术期处理。方法：对7例心脏器质性病变合并IE的患者进行手术矫正原发畸形，清除感染病灶及抗感染治疗。结果：1例术后感染复发死亡，其余6例痊愈出院。结论：心脏器质性病变并IE患者经过彻底的清除病灶，矫正原发畸形，正规的抗感染治疗，可以得到满意的疗效。     

TISSUE-ENGINEERED GRAFT CONSTRUCTED BY SELF-DERIVED BONE MARROW MONONUCLEAR CELLS AND HETEROGENEOUS ACELLULARIZED TISSUE MATRIX

Objective To create a method for constructing a tissue-engineered graft with self-derived bone marrow cells and heterogeneous acellular matrix. Methods The mononuclear cells were isolated from bone marrows drawn from piglets and cultured in different mediums including either vascular endothelial growth factor （VEGF） or platelet derived growth factor BB （PDGF-BB） to observe their expansion and differentiation. The aortas harvested from canines were processed by a multi-step decellularizing technique to erase. The bone marrow mononuclear cells cultured in the mediums without any growth factors were seeded to the acellular matrix. The cells- seeded grafts were incubated in vitro for 6 d and then implanted to the cells-donated piglets to substitute parts of their native pulmonary arteries. Results After 4 d culturing, the cells incubated in the medium including VEGF showed morphological feature of endothelial cells （ECs） and were positive to ECs-specific monoclonal antibodies of CD31, FLK-1, VE-Cadherin and vWF. The cells incubated in the medium including PDGF-BB showed morphological feature of smooth muscle cells （SMCs） and were positive to SMCs-specific monoclonal antibodies of α-SMA and Calponin. One hundred days after implantation of seeded grafts, the inner surfaces of explants were smooth without thrombosis, calcification and aneurysm. Under the microscopy, plenty of growing cells could be seen and elastic and collagen fibers were abundant. Conclusion Mesenchymal stem cells might exist in mononuclear cells isolated from bone marrow. They would differentiate into endothelial cells or smooth muscle cells in proper in vitro or in vivo environments. The bone marrow mononuclear cells might be a choice of seeding cells in constructing tissue-engineered graft.     

73例大动脉调转术非典型冠状动脉解剖类型分析

目的 分析73例大动脉调转术非典型冠状动脉解剖类型,从临床角度探讨其分类和描述.方法 2001年1月至2008年12月,采用大动脉调转术治疗完全性大动脉转位伴室间隔缺损型(TGA/VSD)38例,完全性大动脉转位伴室间隔完整型(TGA/IVS)35例.根据术中所见冠状动脉解剖,采用Leiden分类标准进行分类,图例参考Marie-Lannelongue医院绘制图例制作.结果 非典型冠状动脉17例,发生率约23%,其中TGA/VSD 10例,TGA/IVS 7例.根据Leiden分类标准可分9类,但有12种描述,7例Leiden标准尚不能准确的分类或全面的描述.结论 TGA 病儿非典型冠状动脉的发生率较高,类型多样,其中有较多的解剖类型Leiden标准尚不能准确描述,为便于临床手术操作,对于非典型冠状动脉的解剖最好足Leiden分类结合补充描述的方法.     

肝切除术并发胸腔积液的影响因素分析及诊治体会

目的：探讨肝切除术后并发胸腔积液的影响因素及防治方法。方法：回顾分析123例肝切除术后并发胸腔积液35例患者的临床资料。35例胸腔积液患者均予以保肝、营养支持及利尿治疗;对其中10例中等量以上积液者同时采用B超定位下胸腔穿刺引流治疗,3例合并膈下积液者行膈下积液穿刺引流并加强抗感染治疗,3例合并肺部感染者依据药敏加强抗感染及排痰治疗。结果：本组肝切除术后胸腔积液发生率为28．5％（35／123）;其发生与患者术前肝功能、肝切除量、术中肝门阻断时间及术后腹水量有关（P〈0．05）,与患者的性别、年龄无关（P〉0．05）。35例中,治愈34例;另1例治疗过程中出现肝衰,并发多脏器功能衰竭死亡。结论：胸腔积液是肝切除术后的常见并发症。严格掌握肝切除术适应证、控制肝切除范围,加强术前术后保肝治疗,根据积液量和合并症情况选择合适的治疗方案,对于胸腔积液的预防和治疗具有十分重要的意义。     

单纯性圆锥动脉干畸形22q11.2微缺失发生率及临床表型研究

目的 探讨单纯性圆锥动脉干畸形(CTD)染色体22q11.2微缺失发生率及临床表型分析.方法 应用多重连接探针扩增法(MLPA)对77例0～10岁单纯性CTD患儿进行染色体22q11.2微缺失筛查,并对阳性样本进行荧光原位杂交(FISH)验证.采用Fisher精度检验,P＜0.05有统计学意义.结果 用MLPA对77例单纯性CTD患儿进行了22号染色体微缺失筛查,其中55例法乐四联症(TOF),4例肺动脉闭锁伴室间隔缺损(PA-VSD),8例右室双出口(DORV),10例大动脉转位(TGA).6例(7.8%)患儿存在染色体22q 11.2微缺失,其中4例为TOF,1例为PA-VSD,1例为DORV;10例TGA患儿中均未发现22q11.2缺失.结论 单纯性CTD染色体22q 11.2微缺失发生率约为7.8%.单纯性CTD患儿中,PA-VSD,DORV及TOF比TGA更易发生染色体22q11.2微缺失.应加强对单纯性CTD患儿的遗传筛查及咨询.     

门静脉高压症手术方式及疗效分析

目的探讨不同条件下门静脉高压症的手术方式及疗效。方法回顾性分析2001年3月至2008年10月经过不同的手术方式治疗的96例门静脉高压症患者的疗效。结果随访3个月至5年,57例脾切除门奇断流术中2例,9例布加氏综合征、8例肝移植、14例部分脾栓塞术中各1例围手术期死亡．门奇断流和脾栓塞术中4例、2例再发上消化道出血,其余各例以及8例门奇断流联合门腔分流术者临床治愈。结论门静脉高压症病情复杂,应根据具体情况谨慎选择术式。     

腹腔镜胆囊切除术后胆漏原因及处理探讨

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术后胆漏发生的原因及处理措施。方法:回顾分析5例腹腔镜胆囊切除术后发生胆漏的临床资料。结果:胆囊管残端漏3例,迷走胆管漏1例,胆总管壁烧灼伤发生胆漏1例。其中1例胆囊管残端漏及1例胆总管壁烧灼伤发生胆漏的患者保持腹腔引流通畅;1例胆囊管残端漏患者再次行腹行胆囊管结扎术;迷走胆管漏患者行ERCP放置鼻胆管引流,同时再次行腹腔镜置管引流;1例胆囊管残端漏患者行ERCP放置鼻胆管引流。5例均痊愈出院。结论:胆囊管残端钛夹滑脱,迷走胆管损伤,胆总管壁烧灼伤及肝外胆管损伤是腹腔镜胆囊切除术后胆漏发生的主要原因。通畅腹腔引流、ERCP放置鼻胆管及及时再次手术是处理腹腔镜胆囊切除术后胆漏的重要措施。