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目的:了解乙型肝炎病毒DNA序列在乙型肝炎病毒转基因小鼠中的整合情况。方法:用头尾相接的乙型肝炎病毒全序列基因,通过原核显微注射法产生转基因小鼠,用C区特异性引物扩增鼠尾DNA检测整合,对其中10只阳性鼠的扩增产物测序。结果:128只仔鼠中,14只整合阳性。对10只阳性鼠测序,9只与所转基因序列完全相同,1只在1739、1740位缺失两个碱基。结论:外源乙型肝炎病毒基因确实整合至小鼠基因组,多数为 相似文献
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研究HBV转基因小鼠免疫耐受状态机制。以正常ICR小鼠为对照 ,检测转基因小鼠脾树突状细胞 (DC)表面Ia(MCH Ⅱ )和CD80 (B7)表达水平及其免疫功能 ;脾及外周血T淋巴细胞表面CD8和CD2 8及肝细胞膜上MHC I和腹腔巨噬细胞MHC Ⅱ抗原表达情况。结果发现 ,HBV转基因小鼠DC表面MHC Ⅱ及CD80表达水平 ( 13.34± 1.11及 12 .2 4± 1.31)明显低于对照组 ( 2 0 .4 7± 1.78及 15.83± 1.52 ,P <0 .0 5) ;其DC体外诱发T淋巴细胞增殖能力 ( 640 9.67cpm± 4 4 5.71cpm)明显低于对照组 ( 13870 .67cpm… 相似文献
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用巢式mpPCR-RFLP方法检测经大剂量胸腺肽治疗HBeAg阴转的慢性乙型肝炎患者25例,以探讨HBeAg阴转是否与前C区A83点变异有关。结果显示,25例HBeAg阴转患者中有2例治疗前后均检出A83点变异,而未见治疗后出现变异者。提示本组大剂量胸腺肽治疗患者,其HBeAg转阴与前C区A83点变异无关。 相似文献
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乳腺癌术后予环磷酰胺(CTX)、阿霉素(ADM)或表阿霉素(EP1)和氟脲嘧啶(5-Fu)组成的CAF或CEF方案是目前常用的一线标准辅助化疗方案,其中ADM/EPI的累积性心脏毒性较大。而放射性心肺损伤亦为胸部肿瘤在放射治疗中常见的并发症。为探讨乳腺癌手术和化疗后,胸壁电子束照射对心肺毒性的影响,笔者自1999年11月至2002年8月在本院门诊收治乳腺癌根治术和化疗后患者220例,采用不同能量电子束照射胸壁,现报道如下。 相似文献
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慢性肝病患者HBV与HCV重叠感染的调查及其意义 总被引:5,自引:0,他引:5
为了解我国HBV与HCV重叠感染及其与三种慢性肝病的关系,本文以天津地区患者为对象,选择119例慢性肝病患者,用ELISA检测HBsAg和抗-HCV,巢式PCR检测HCVRNA,并对所得结果进行了分析。材料和方法一、研究对象天津市传染病医院和肿瘤医院1992年6月~1993年10月临床确诊的患者, 相似文献
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细胞内细胞因子mRNA的检测技术 总被引:1,自引:0,他引:1
人体内细胞因子的性质和含量影响着许多生理和病理变化过程,也是调节机体对病原体应答的主要因素。临床检测和分析人体内的细胞因子水平,对了解受检者的免疫应答水平、发病机理以及判断病情、预后均具有重要意义。血浆或体液等标本中特定细胞因子的含量可用生物学或免疫学技术测定其活性或抗原性,但无法测得细胞或组织中的细胞因子含量。随着分子生物学技术的发展,以聚合酶链反应(PCR)为基础的新的基因分析技术已在临床上得到有效的应用。它是目前检测细胞因子最敏感的方法,尤其适用于极微量的标本,或仅有少数细胞才能表达细胞因子基因或… 相似文献
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目的;探讨HBV转基因小鼠树突状细胞(DC)功能与其免疫耐受状态的相羞生。方法:按改良Steinman方法,对正常非转基因小鼠和HBV转基因小鼠脾脏树突状细胞进行分离,DC经HBeAg预刺激后,再用此DC与ConA共刺激淋巴细胞增殖反应。结果:HBV转基因小鼠的DC细胞数为10^2/孔、10^3/孔、10^4/孔,分别刺激各组小鼠淋巴细胞时,HBV转基因小鼠及非转基因小鼠的淋巴细胞^3H-TdR掺入量均显著低于对照组。结论:提示HBV转基因小鼠的DC提呈功能低下。 相似文献
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乙型肝炎病毒转基因小鼠用于研究治疗乙型肝炎药物初探 总被引:8,自引:1,他引:7
目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠模型,探讨该模型能否用于抗HBV药物的验证,筛选,方法:原核显微注射法制备HBV转基因小鼠,用巢式PCR,Southern杂交,免疫组化学,ELISA等检测HBV基因的整合与表达,筛选60只血清HBVDNA,HBsAg阳性的小鼠,随机分为6组,3组为实验组,分别给予拉米夫定灌胃,胸腺肽腹腔注射,HBVS基因DNA疫苗,多点肌肉注射,另3组分别为生理盐水对照组,结果:显微注射产生的HBV转基因小鼠中有HBV的复制和表达,拉米夫定,胸腺肽,DNA疫苗用于转基因小鼠后,均能使血清HBVDNA阴转,以拉米夫定阴转率最高,并可看出作用开始,持续时间及反跳情况,结论:拉米夫定,胸腺肽,DNA疫苗可抑制转基因小鼠HBV的复制,HBV转基因小鼠有可能成为抗HBV药物验证,筛选的有力工具。 相似文献
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HBV转基因小鼠的建立和应用初探 总被引:1,自引:0,他引:1
HBV转基因小鼠的问世 ,为乙型肝炎发病机制及其防治深入研究开辟了一条新的途径 ,特别是为在活体进行抗HBV药物疗效验证、评价、比较和筛选提供了较理想的动物模型。但如何建成稳定高表达的HBV转基因小鼠 ,怎样将其用于研究乙型肝炎及抗HBV药物筛选等 ,仍属待探讨的领域。现通过构建、筛选出高表达的HBV质粒 ,并通过原核显微注射等方法建成了较为理想的稳定、高表达HBV转基因小鼠模型 ,解决了长期困扰乙型肝炎研究中缺乏理想动物模型的难题。为了证明这些模型的应用价值 ,用此新的活体模型探索了乙型肝炎发病机理 ,并验证… 相似文献