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目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染。Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达。结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P<0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高。Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。 相似文献
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目的探讨敲低miR-21表达对宫颈鳞状细胞癌细胞系CaSki增殖活性与凋亡的影响。方法实时荧光定量RT-PCR法检测正常宫颈组织、CaSki细胞转染前后miR-21的表达水平,采用MTT法、流式细胞术等技术检测转染后CaSki细胞增殖活性与凋亡的变化。结果 miR-21在CaSki细胞中表达水平为正常宫颈组织的3.25倍。CaSki细胞中转染反义miR-21(AS-miR-21)可显著抑制其表达。转染后24h、48h、72h、96h,MTT检测提示10nmol与20nmolAS-miR-21转染组中细胞增殖率较对照组明显降低(P<0.05),自48h抑制作用显现,且随着转染浓度增加,抑制作用增强,呈现剂量依赖性。细胞周期检测结果显示AS-miR-21转染组的G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少(P<0.05)。AnnexinⅤ联合PI技术检测细胞凋亡,结果显示AS-miR-21转染组早期凋亡细胞率[(23.40±2.16)%]明显高于空白对照组[(5.1±2.16)%]、阴性对照组[(6.87±0.55)%](P=0.000)。结论 AS-miR-21转染可敲低CaSki细胞中miR-21表达,并有效抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡。 相似文献
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HPV多重感染在宫颈病变中的流行分布及意义 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)多重感染与宫颈病变发生、发展关系。方法应用HPV基因芯片检测技术,对287例宫颈病变患者(CINⅠ130例、CINⅡ69例、CINⅢ48例、宫颈癌40例)的宫颈液基细胞残余标本进行HPV感染基因型检测,并与组织学检测结果比较。结果287例宫颈病变中HPV感染率为89.9%(258/287),在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌多重感染率分别为48.6%、40.3%、31.1%、27.5%,CINI与CINⅢ及宫颈癌比较,P均〈0.05;HPV最常见亚型为HPV16、HPV58及HPV52;多重感染中以二重感染常见(51/105,48.6%),偶有五重感染(3/105,2.9%)。40岁以下者HPV多重感染率高于40岁以上者。结论宫颈HPV多重感染率有随宫颈病变程度增加有降低趋势,宫颈病变严重程度可能与HPV基因型多寡无关,而与感染HPV亚型的致病能力密切相关;40岁以下者HPV多重感染发生率高。 相似文献
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目的:探讨姜黄素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响。方法:原代培养孕16~18 d SD大鼠胎鼠海马神经元5 d,采用随机数字表法,将神经元随机分为5组(n=6):对照组(C组)、氯胺酮组(K组)和不同浓度姜黄素组(J1-3组,浓度分别为5,10,20 μmol·L)-1,K组加入氯胺酮(终浓度为100 μmol·L-1)孵育3 h,J1-3组给予氯胺酮前2 h加入姜黄素,使各组姜黄素浓度分别为5,10,20 mol·L-1,C组加入等量生理盐水。采用MTT法检测发育期神经元活性,流式细胞仪检测线粒体膜电位(Ψm),Western blot法测定p-CREB(ser133)、细胞色素c表达。结果:与C组相比,K组神经元活性降低,神经元线粒体膜电位(Ψm)明显降低(P<0.05) p-CREB(ser133)蛋白及BDNF、Bcl-2 mRNA表达下调,细胞色素c表达上调(P<0.05);与K组相比,J3组神经元Ψm升高,J1-3组神经元活性增加,p-CREB(ser133)蛋白及BDNF、Bcl-2 mRNA表达上调,细胞色素c表达下调(P<0.05)。结论:姜黄素通过调节p-CREB(ser133)表达,上调BDNF和Bcl-2,稳定Ψm,抑制线粒体内细胞色素c释放,进而抑制氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡。 相似文献
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背景与目的: 人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性浸润性乳腺癌对抗于HER2新辅助治疗的反应显著,然而不同患者的反应并不一致,部分反应较差。本研究旨在探讨HER2阳性乳腺癌新辅助治疗反应的预测因子,并进一步评估新辅助治疗前后HER2状态的不一致性。方法: 收集深圳市人民医院2019—2021年经术前粗针穿刺活检确诊的110例HER2阳性乳腺癌患者,经新辅助治疗后行手术切除。采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测术前穿刺标本中的HER2表达状态,并评估新辅助治疗后手术切除标本的病理学完全缓解(pathological complete response,pCR)状态及残余肿瘤负荷(residual cancer burden,RCB)分级,评价不同HER2状态对新辅助治疗效果的影响,并进一步比较新辅助治疗前后HER2、雌激素受体(estrogen receptor,ER)及孕激素受体(progesterone receptor,PR)状态的一致性。结果 :110例乳腺癌患者根据HER2 IHC表达状态分为弥漫3+组(81例)、异质性3+组(20例)和2+且FISH基因扩增(2+FISH+)组(9例)。HER2弥漫3+组pCR率为54.3%,明显高于异质性3+组(5.0%)和2+FISH+组(11.1%),差异有统计学意义(P<0.05),而异质性3+组和2+FISH+组的RCB分级更高。多因素分析显示,HER2弥漫3+是pCR的独立预测因子。7例(11.9%)HER2阳性乳腺癌患者在新辅助治疗后HER2转为阴性,大多数(85.7%)为异质性3+组和2+FISH+组病例。结论: HER2异质性会影响HER2阳性乳腺癌的新辅助治疗反应,评价穿刺活检标本中HER2 IHC异质性,并对新辅助治疗后残留癌灶HER2、ER和PR状态重新评估,有利于指导下一步治疗。新型抗体药物偶联物(antibody-drug conjugate,ADC)的出现有望为HER2异质性阳性乳腺癌患者带来生存获益。 相似文献
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目的探讨肺原发性肝样腺癌的临床病理特征、免疫表型、诊断和鉴别诊断。方法对2014年1月收集的1例肺原发性肝样腺癌的临床表现、大体及组织学形态、免疫组化等进行观察研究,并复习相关文献。结果患者为64岁吸烟男性,因咳嗽、咯血8 d入院。肿物大体呈卵圆形,切面灰白,境界清楚;镜下具有肝细胞癌样和腺癌分化特征,间质可见丰富的血窦。免疫组化示肿瘤细胞Hepatocyte、AFP、CK8/18、CK19、CK(pan)阳性;而CK7、CK14、CK5/6、TTF-1、CEA、Vimentin等阴性。结论肺肝样腺癌是原发于肺的上皮性恶性肿瘤,诊断的确立主要依赖发现相似于肝细胞癌的形态(肝样结构),并通过临床病理与免疫组化检测除外肝细胞癌等疾病的转移。 相似文献
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目的:探讨右美托咪定联合浅低温对脑缺血损伤大鼠神经的保护作用。方法:雄性SD大鼠60只随机分为5组,假手术组(SH组),缺血损伤组(I组),浅低温组(T组),右美托咪定组(D组),浅低温复合右美托咪定(DT组)。建立大鼠脑缺血损伤模型,SH组仅分离出颈部血管不处理,同时维持颞肌温度约37.5℃;I组,于恒温箱中保持体温37.5℃,分离并结扎右颈总动脉和颈内动脉,60min后松开结扎线复灌;T组,保持体温约35℃,其余处理同I组;D组,保持体温约37.5℃,于结扎前30min腹腔注射右美托咪定100μg/kg,其余处理同I组;DT组,保持体温约35℃,其余处理同D组。术后72h对大鼠进行神经功能评分后,断头取脑采用干湿重法测量缺血脑组织含水量,用ELISA法检测血清中TNF-α,IL-6含量。结果:复灌72h结束后,T组、D组、DT组脑组织含水量较I组明显减少(P<0.05),T组、D组及DT组血清中TNF-α和IL-6含量较I组明显减少(P<0.05)。结论:右美托咪定联合浅低温对脑缺血损伤大鼠神经有保护作用。 相似文献
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目的 比较超声引导下肌沟联合腋路正中、桡、尺神经阻滞与单纯肌间沟阻滞的起效时间和麻醉效果.方法 随机选择30例肘前手术给予0.5%罗哌卡因20 mL单纯肌间沟阻滞.另选30例给予0.5%罗哌卡因,肌间沟11 mL,腋路正中、桡、尺神经9 mL.专人评估注射局麻药后10、15 min前臂正中、桡、尺神经的感觉和运动评分(未阻滞=3,完全阻滞=0).结果 阻滞10、15 min时联合组总得分(运动+感觉)11.5(9.7~13.2),6.8(5.5~8.3)较肌间沟组13.8(11.7~15.9),9.4(7.4~11.8)有明显减少(均P<0.05).结论 肌间沟联合腋路阻滞明显提高麻醉效果,使阻滞时间提前. 相似文献