聚合酶链反应结合探针杂交检测幽门螺杆菌

目的建立特异、灵敏的聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌（ＨＰ）的方法。方法用ＰＣＲ产物直接克隆并测序，以含ＨＰＤＮＡ序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养、单纯ＰＣＲ和ＰＣＲ结合杂交（ＰＣＲ－Ｓｂ）检测经胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部炎症、十二指肠溃疡的胃活检组织、唾液和粪便标本中的ＨＰ。结果检测胃活检标本７９份，ＰＣＲ－Ｓｂ阳性率为９９％，单纯ＰＣＲ及细菌培养的阳性率分别为９５％和６５％，ＰＣＲ－Ｓｂ的灵敏度达到１ｆｇ。唾液标本的检测阳性率为３５％，粪便标本的检测结果均为阴性。结论测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性。ＰＣＲ结合长臂光敏生物素探针杂交是特异、灵敏、简便和对人体无害的检测ＨＰ的方法。     

利用Internet国际计算机网络检索医学和分子生物学数据库

利用Ｉｎｔｅｒｎｅｔ国际计算机网络检索医学和分子生物学数据库陈建魁尹秀云曾艺芝牟兆钦随着医学技术的发展，医学文献增长十分迅速，数量非常庞大，查找所需文献费时费力，计算机联机和联网检索大大改善了数据库文件的利用，促进了资源共享。联机检索具有内容新、范围...     

用套式PCR法诊断系统性念珠菌病时血清优于全血

用ＰＣＲ法诊断系统性念珠菌病既可以使用血清 ,也可以使用全血 ,但比较这两种类型样本检测的结果还未见正式报道。作者设计了含有 5对特异性内引物的嵌套式ＰＣＲ方法 ,可以扩增白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、克鲁斯念珠菌和光滑念珠菌的核糖体ＲＮＡ(ｒＲＮＡ)的特异性靶序列。真菌特异性通用引物为 :ＩＴＳ1 :ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ ;ＩＴＳ4:ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ。白念珠菌的内引物为 :ＣＡＬ1 :ＡＡＣＴＴＧＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＧＧＣ ;ＣＡＬ3 :ＴＧＧＡＣＧＴＴＡＣＣＧＣＣＧＣＡ…     

应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定常见医学真菌

近年来 ,机会性真菌感染呈不断上升趋势 ,这主要归因于器官移植、骨髓移植的广泛开展 ;艾滋病患者的大量增多及皮质类固醇激素、免疫抑制剂和广谱抗生素的应用等 ;另外不同真菌菌种对抗真菌药物具有不同的天然耐药性 ,这就不仅要求实验室快速检出感染的病原菌 ,而且还应准确鉴定到种 ,才能使临床采取有效措施控制感染。目前 ,真菌的分离培养鉴定仍是主要诊断方法 ,但存在耗时长且不敏感等问题。为建立快速、敏感、特异的检测与鉴定方法 ,我们用真菌通用引物扩增广范围医学真菌的细胞色素Ｐ4 5 0羊毛固醇 14α 去甲基化酶 (Ｌ1Ａ1)基因的 1…     

用聚合酶链反应和限制性内切酶技术快速鉴定医学真菌

介绍了一种基于聚合酶聚链反应（ＰＣＲ）结合限制性内切酶分析技术区分临床重菌的方法，首先利用９种真菌的通用引物扩增其１８ＳｒＲＮＡ基因，然后用ＨａｅⅢＢｇｌＩ和ＮｈｅＩ三种限制性内切酶将扩增产物消化成不同数量和不同大小的ＤＮＡ片段，可以对白色念珠菌，新型隐球菌和烟曲霉菌等９种临床上常见的医学真菌作出快速鉴定，该技术具有快速，敏感，不需杂交，可在２４ｈ以内完成鉴定等优点，有良好的临床应用前景。     

白色念珠菌感染的分子生物学诊断研究进展

综述了白色念珠菌感染的分子生物学诊断研究进展，包括核型分析，限制性片段长度多态性分析，特异的ＤＮＡ探针及ＰＣＲ等方法。     

明串珠菌所致菌血症一例报告

明串珠菌属(Leuconostoc spp)原来一直被认为是生产奶制品、发酵、酿酒和制糖工业中所需要的细菌,而不是致病菌.1984年,Shlaes等[1]首次报道了明串珠菌造成的感染,自此以后国外有6人陆续报道了有关明串珠菌造成的人体感染.经检索中国生物医学期刊数据库,在国内还没有明串珠菌感染人体的报道.我们于近期在一例慢性粒细胞白血病患者的血液中培养出明串珠菌,现报道如下. 病历资料:患者,男,38岁,汉族 ,已婚.于2000年5月19日入院.5个月前无明显诱因出现乏力,伴腹胀、纳差.4个月前查血象WBC 304×109/L,幼稚细胞占3%,Hb近100?g/L.查体脾大、肋下15?cm,胸骨压痛阳性,骨髓增生活跃,原粒+早幼粒细胞占4.5%,最后确诊为慢性粒细胞白血病.应用COAP方案(环磷酰胺、长春新碱、阿糖胞苷和泼尼松)治疗后用羟基尿和干扰素治疗.近来,患者持续发热,体温一直保持在37.5～39.2℃,脉搏80～100/min,血压18.6/10.6?kPa(140/80?mmHg).使用抗白血病药物后,WBC 降至2.4×109/L,PLT 18×109/L.患者曾有腹泻,大便显微镜检查WBC: 0～3/HP,RBC: 8～12/HP.血清ALT 59?U/L,总蛋白35.8?g/L,白蛋白24.6?g/L,球蛋白11.2?g/L;血清总胆红素134.5?μmol/L,直接胆红素85.5?μmol/L.患者有胸水,胸水总蛋白为13.5?g/L.使用去甲万古霉素(0.8?g/d)治疗7?d不能控制体温.     

宋内氏福氏2a双价志贺氏菌芳香族氨基酸营养缺陷型减毒株的构建

ＦＳ５４是本室构建的宋内氏福氏２ａ双价志贺氏菌杂交株，具有志贺氏菌的毒力。本研究通过遗传重组，给ＦＳ５４株引入了ａｒｏＤ基因的转座于Ｔｎ１０插入失活物（ａｒｏＤ：：Ｔｎ１０），构建了ＦＳ５４株的芳香族氨基酸营养缺陷型减毒株，并进一步去除了Ｔｎ１０所携带的四环素抗性和宋内氏１相大质粒（ｐＳＳ１２０：：Ｔｎ５）上所携带的卡那霉素抗性，得到了宋内氏福氏２ａ双价志贺氏菌芳香族氨基酸营养缺陷型减毒株Ｆｓ５４－７ｂ．     

PCR结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺旋杆菌

幽门螺旋杆菌（Ｈｐｙ）是急性胃炎和大多数慢性胃炎的病原菌，与胃、十二指肠溃疡的病理改变关系密切，与胃癌也有很高的相关性。对Ｈｐｙ清除不彻底是胃及十二指肠疾病复发的重要原因之一，所以检测微量、残存的Ｈｐｙ有着重要的临床意义。本文建立ＴＨｐｙ的ＰＣＲ检测技术，用ＰＣＲ产物直接克隆构建重组质粒ｐＨＰ０１，测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性，并用常见的胃肠道细菌证实了扩增的特异性。建立了ＰＣＲ微量快速扩增法，最低可检出Ｈｐｙ基因组ＤＮＡ１００ｆｇ，用长臂光敏生物素标记探针进行转印杂交检测Ｈｐｙ的ＰＣＲ产物，检…     

吐温酵母肉汤培养基用于诱导白念珠菌芽管的形成

吐温酵母肉汤培养基用于诱导白念珠菌芽管的形成牟兆钦尹秀云陈建魁白念珠菌（简称白念）是临床常见的致病真菌。用生化生理和形态学指标可对白念作出确切鉴定，但费时费事。迄今，对白念快速鉴定基于它在人血清中可形成芽管这一特性，但人血清的使用受到一定限制［１］。...