新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良

目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4 d内稳定获得小胶质细胞 1. 0×10~6个/60 mm培养皿,纯度≥98%,活力 98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3. 2、1. 5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。     

早期分步控制性减压手术治疗重症高血压脑出血患者的疗效分析

目的 探讨早期分步控制性减压手术治疗重症高血压脑出血患者的临床疗效。方法 将43例高血压脑出血患者按入院的先后顺序分为早期分步控制性减压手术组(分步减压组,21例)和对照组(22例)。分步减压组患者行早期分步控制性减压术清除血肿,对照组患者行传统开颅血肿清除术治疗。对两组患者术中去骨瓣率、术后并发症(术区渗血、脑梗死)发生率、不同时间的脑水肿体积,以及预后进行分析比较。结果 两组患者的性别、年龄、术前血肿量、术前格拉斯哥昏迷量表(Glasgow coma scale,GCS)评分的差异均无统计学意义。两组患者的术中去骨瓣率、术后脑梗死发生率和术后6个月病死率、预后不良率比较,差异均无统计学意义(均P0. 05)。与对照组比较,分步减压组患者的术区渗血率明显降低,术后6个月的格拉斯哥预后量表评分明显增高,差异均有统计学意义(均P 0. 05)。两组患者术后不同时间之间的脑水肿体积的差异均有统计学意义(均P 0. 001);而分步减压组术后不同时间的脑水肿体积又显著低于对照组(均P 0. 001)。结论 早期分步控制性减压手术治疗高血压脑出血操作简单、可行性强,较传统开颅血肿清除术的并发症少、术后脑水肿轻;可以在一定程度上改善患者的预后。     

再程序化脂肪干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的机制

目的制备再程序化脂肪干细胞(ADSCs),并在体研究再程序化ADSCs移植入大鼠脊髓损伤模型后促进损伤脊髓神经功能恢复的作用和机制。方法体外培养、纯化和鉴定大鼠ADSCs,并利用慢病毒包装神经元生成素2(Ngn2)基因转染ADSCs制备再程序化干细胞。体内实验将48只雌性SD大鼠随机分成3组:SCI对照(A)组、单纯ADSCs移植(B)组和Ngn2-ADSCs移植(C)组。采用BBB评分评价大鼠运动功能,并通过HE染色、免疫组化和免疫荧光等方法检测脊髓组织学改变和相关蛋白的表达水平,进而观察实验动物脊髓功能恢复情况。结果 Ngn2-ADSCs移植组在运动功能评分、胶质瘢痕的形成、脊髓损伤后病理变化和分泌神经营养因子BDNF和VEGF蛋白含量明显优于其他组。结论 Ngn2-ADSCs移植后能有效地存活,并分化为神经细胞,抑制胶质瘢痕形成,减小脊髓损伤空洞,增加BDNF和VEGF表达,最终促进SCI大鼠的运动功能恢复,较单纯应用ADSCs能更好地促进SCI修复。     

颅脑损伤大骨瓣减压术后半球间积液与并发脑积水的相关性研究

目的研究重度颅脑损伤患者去骨瓣减压术后出现半球间积液与并发脑积水之间是否存在关联性。方法回顾性分析黄山市人民医院21例重度颅脑损伤术后的患者,并对这些患者的相关情况（年龄、性别、受伤机制、颅外损伤情况、GCS评分、四肢肌力、及瞳孔情况、CT表现）进行总结;所有研究对象均行标准重度颅脑损伤去大骨瓣减压术治疗,定期随访6月;同时采用SPSS18．0软件,应用Fisher确切概率法检验,P〈0．05为差异有统计学意义。结果去骨瓣减压术后患者半球间积水和脑积水之间的关联性具有统计学意义（P〈0．05）;术后患者并发脑积水的概率为38．09％。结论重度颅脑损伤标准去大骨瓣减压术后出现半球间积液可能是预测早期脑积水发生的影像学指标。重度颅脑损伤患者发生脑积水可能与以下两个因素有关：①重度颅脑损伤的原发性损伤破坏了脑脊液循环机制;②颅内压力平衡机制的改变影响脑脊液的循环。同时通过连续观察CT片,发现很多患者半球间积水有向脑积水演变的过程,笔者推断重度颅脑损伤去骨瓣减压术后出现脑积水可分为脑内压力变化组织移位和蛛网膜颗粒的功能降低、消失两个阶段。所以我们可以根据是否发生半球间积液来指导临床：如患者早期即出现半球间积液,那么我们可进行积极治疗预防脑积水的发生,改善患者的预后。     

分泌性脑膜瘤瘤周水肿发生的因素

分泌性脑膜瘤(secretory meningiomas)是一种少见的良性脑膜瘤亚型,在所有脑膜瘤中占1.0％～4.4％[1-3],在神经系统肿瘤的WHO(2000)分类中WHO分级Ⅰ级,1986年由Alguacil -Garcia首先命名并报道[4],主要原发于颅内,也有报道原发于颞骨表现为中耳炎,生长缓慢,但可以引起严重的脑水肿和危及生命的并发症[5],其确切的发病机制还不是十分明确[2].预后相对较好,主要与手术的切除程度有关,目前报道的全切除者中均无复发.在以往的研究中,男女比例不尽相同,但可以肯定女性高发,根据以往的研究[1-3,6]:女性患者所占的比例在75％到100％之间,平均为85％,但是最新的一项研究为59％[5].     

结合血清谷氨酰胺水平变化建立aSAH患者的医院获得性感染预测模型

目的 探讨肠内营养治疗的动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）患者血清谷氨酰胺（Gln）水平变化与医院获得性感染（HAI）之间的关系。方法 选取2015年11月—2019年8月黄山市人民医院神经外科收治的aSAH患者115例,根据住院期间有无HAI分为感染组和未感染组。比较两组入院第1天与第2天血浆C反应蛋白、白蛋白差值和Gln下降率等临床资料,应用多因素Logistic回归分析患者发生HAI的相关因素,构建影响因素的列线图模型并验证。结果 两组患者性别、住院时间、Hunt和Hess分级、BMI、收缩压、高血压、动脉瘤部位比较,差异无统计学意义（P >0.05）,感染组年龄、糖尿病比例高于未感染组（P <0.05）。两组患者白蛋白差值、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖比较,差异无统计学意义（P >0.05）,感染组CRP差值、Gln下降率均高于未感染组（P <0.05）,血红蛋白低于未感染组（P <0.05）。逐步多因素Logistic回归分析结果显示,CRP差值［O^R=1.750（95% CI：1.148,2.668）］和Gln下降率［O^R=2.219（95% CI：1.536,3.207）］为aSAH患者发生HAI的独立危险因素（P <0.05）,血红蛋白［O^R=0.930（95% CI：0.886,0.976）］为独立保护因素（P <0.05）。列线图预测HAI的一致性指数为0.920（95% CI：0.876,0.939）。结论 接受肠内营养治疗的aSAH患者Gln下降率与HAI相关,结合Gln水平动态变化所构建的列线图具有良好的HAI预测价值。