低氧对恶性黑素瘤A375细胞中Nodal及细胞迁移相关蛋白表达的影响

目的：明确低氧对恶性黑素瘤A375细胞中Nodal及细胞迁移相关蛋白表达的影响。方法：体外培养A375细胞，CoCl₂构建细胞内低氧模型。细胞分为空白对照组，CoCl₂组，SB-431542（Nodal抑制剂）组和CoCl₂ +SB-431542组。通过Western Blot技术检测Nodal、类激活素激酶4/7（ALK4/7）、与恶性肿瘤进展相关的上皮钙黏附蛋白（E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2（MMP 2)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平。结果：CoCl₂组细胞内Nodal及ALK7蛋白浓度，高于其他组（P<0.05）。各处理组均没有检测到ALK4蛋白；CoCl₂组细胞中Vimentin和MMP2蛋白的浓度高于其他组（P<0.05）；各处理组E-cadherin蛋白水平差异不具统计学意义。结论：低氧环境可诱导A375细胞中Nodal和细胞迁移相关蛋白MMP2和Vimentin的高表达。     

Nrf2信号通路调控自噬对UVA诱导人真皮成纤维细胞凋亡的作用

目的 探讨Nrf2信号通路介导的细胞自噬在UVA诱导人皮肤成纤维细胞凋亡过程中的作用。方法 体外培养正常人皮肤成纤维细胞，分为对照组、UVA组、自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin, RAPA)组、自噬抑制3-甲基嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)组、核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组及干涉(siRNA)组；各实验组经8 J/cm²的UVA照射；采用流式细胞术检测成纤维细胞凋亡；CCK-8检测细胞活性变化；Western blot检测细胞自噬及凋亡关键分子、p62及Nrf2蛋白表达水平。结果 经8 J/cm²的UVA照射后成纤维细胞凋亡比例增加、胞内自噬水平显著升高；自噬抑制剂3-MA处理后可显著促进UVA照射引起的成纤维细胞凋亡；而自噬促进剂RAPA处理细胞后，细胞凋亡率较UVA组相比显著降低(P<0.01);与对照组相比，UVA照射后胞核Nrf2表达显著增高；ML385阻断Nrf2入核及使用siRNA干涉Nrf2表达后，自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ降低(P<0.01),p62表达显著减少(P&...