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用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定人外周血淋巴细胞分裂抑制率,从而判断细胞膜LDL受体活性,同时设 ̄3H-TdR掺入法进行对照。共检测正常人75例,家族性高胆固醇血症(FH)纯合子7例、杂合子12例,人群中高血脂患者52例。结果表明MTT比色法可以替代 ̄3H-TdR掺入法进行人群FH患者的筛检,初步确定FH患者的诊断标准为淋巴细胞分裂抑制率大于20%,并从高血脂人群中检出了3例FH患者。 相似文献
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泡沫细胞形成过程中清道夫受体的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
轻度修饰低密度脂蛋白对小鼠肝、脾中清道夫受体mRNA表达的影响姜传仓,陈兵,范乐明,邵莉君,蔡海江(南京医科大学动脉粥样硬化研究中心,南京210029)小鼠静注轻度氧化修饰LDL(mildlymodifiedLDL,mm-LDL)可使其肝、脾清道夫受... 相似文献
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范乐明 《中国动脉硬化杂志》2005,13(3):249-253
虽然1856年就已提出动脉粥样硬化是动脉内膜炎症的观点长期未被普遍接受,炎症反应在许多疾病特别是慢性疾病过程中存在已是不争的事实。炎症反应在动脉粥样硬化从起始发病到出现临床事件都发挥重要作用的认识也已获得广泛认同,因而对动脉粥样硬化炎症机制进行重新审视,特别是对近年来有关研究成果加以梳理,无疑有益于我们对动脉粥样硬化发病机理的更深理解和防治措施的合理制订。本文概要介绍动脉粥样硬化炎症机制的近代观点以及脂蛋白、分子标志和遗传等几个方面在炎症机制中的可能作用。 相似文献
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目的探讨家兔新基因Gnas在高脂血症中的功能。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型,分别用胆固醇、25羟胆固醇、低密度脂蛋白刺激HepG2细胞,采用荧光半定量逆转录聚合酶链反应技术检测GenBank中登录号为AY248719的家兔新基因表达情况。结果高胆固醇兔动物模型复制成功,该组血浆和肝脏的总胆固醇及肝脏甘油三酯水平增加均超过10倍,血浆甘油三酯也显著增高。高脂组Gnas基因表达水平明显高于对照组。胆固醇、25羟胆固醇刺激HepG2细胞后Gnas表达无明显改变,400 mg/L低密度脂蛋白刺激HepG2细胞后Gnas表达增强2.15倍。结论对家兔新基因Gnas的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。 相似文献
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新型白蛋白微泡经超声介导破裂促进EGFP基因在Cos-7细胞的表达 总被引:4,自引:2,他引:4
目的:根据超声介导白蛋白微泡破裂空化效应可以增加真核细胞膜对大分子(如DNA)通透性的原理,探讨一种新的转基因方法,以便安全有效和定向地转移目的基因。方法:实验中选择绿色荧光蛋白基因EGFP为标记基因,以自制的白蛋白微泡为载体,用超声介导微泡破裂的方法在体外进行Cos—7细胞的基因转化,同时以脂质体为对照,激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率。锥虫蓝染色观察细胞的活性。结果:体外试验发现0.8MHz、1.0W/cm^2、10%占空比(dutycycle)、60s超声介导10%白蛋白微泡破裂可以有效稳定地转化EGFP基因在Cos—7细胞表达,且对细胞无毒副作用。结论:自制白蛋白微泡是一种安全、有效的新型基因载体,在一定超声条件控制下,能增强基因的转导与表达,有良好的靶向性,提示该技术有应用于临床基因治疗的广阔前景。 相似文献
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目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因R2 19K单核苷酸多态性位点与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病易感性的关系。方法 采用聚合酶链反应—限制片长多态性方法检测 133名正常人和 4 9名家族性高胆固醇血症患者三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因相应片段的多态性。结果 家族性高胆固醇血症患者组三磷酸腺苷结合盒转运子A12 19K等位基因频率显著低于正常人群 (P =0 .0 0 0 1)。家族性高胆固醇血症患者组中 ,K等位基因携带者组 (RK基因型 +KK基因型组 )与RR基因型组比较 ,甘油三酯水平明显降低 (1.14± 0 .5 5mmol/L比 1.76± 0 .5 8mmol/L ,P =0 .0 0 1) ,高密度脂蛋白胆固醇水平有增高趋势 (1.39± 0 .5 4mmol/L比 1.2 1± 0 .32mmol/L ,P =0 .0 6 1)。结论 三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因R2 19K多态性中 ,2 19K等位基因与家族性高胆固醇血症患者甘油三酯水平降低和高密度脂蛋白胆固醇水平增高相关联 ,可能对家族性高胆固醇血症患者不早发冠心病起保护作用 相似文献
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激素敏感脂酶基因高度表达对泡沫细胞形成的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
中国仓鼠卵细胞在给予β-VLDL后,细胞内蓄积胆固醇酯,形成泡沫样细胞。以腺病毒基因转移方法书激素敏感脂酶基因转染到中国仓鼠卵细胞中,得到了来自激素敏感脂酶的胆固醇酯水解活性高度表达,此时,β-VLDL导致的胆固醇酯蓄积作用被阻断,提示增加胆固醇酯水解可以防止泡沫细胞形成。 相似文献
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目的观察人载脂蛋白E(apoE)在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH内表达的分布情况及对细胞生长的影响。方法构建含apoEcDNA和绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体,转染至SK-N-SH细胞,经G418结合荧光动态监测筛选稳定表达人apoE基因的细胞克隆,荧光显微镜下观察GFP-apoE融合蛋白在SK-N-SH细胞中的表达。采用MTT法和流式细胞术观察apoE3、apoE4对细胞增殖和细胞周期的影响。结果经酶切和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,经G418筛选得到的SK-N-SH细胞克隆中存在apoE基因表达,其表达分布与GFP不同,呈点状分布。转染apoE3的细胞增殖速度加快,G0G1期细胞比例降低,S期细胞增加;而转染apoE4的细胞则相反,表现为增殖速度减缓,G0G1期细胞比例增加,S期细胞减少。结论神经母细胞SK-N-SH细胞内apoE的表达对其生长具有表型特异性。通过建立稳定表达不同多态性的apoE的细胞克隆,为进一步研究apoE在神经细胞中的生物学功能以及apoE在阿尔茨海默病发病机制中的作用奠定了基础。 相似文献
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目的 寻找新的高脂血症相关基因,探讨其分子机理。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型,采用抑制性消减杂交技术克隆高脂血症相关基因,快速扩增cDNA末端技术扩增全长,用基因芯片和荧光半定量聚合酶链反应技术检测其表达,并用逆转录一聚合酶链反应法观察该基因的组织分布。结果获得一个新的家兔高脂血症相关基因,GenBank登录号为AY24719,长1386bp,编码321个氨基酸,与人类G蛋白α亚基同源性达92%。该基因在家兔心、肝、骨骼肌等组织中广泛表达,其中以胰腺的表达最强。结论对AY248719基因的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。 相似文献