沙门菌致病岛1蛋白促进神经母细胞瘤Warburg效应的作用及分子机制

目的探讨沙门菌致病岛1(SPI1)蛋白在神经母细胞瘤中调控有氧糖酵解(即Warburg效应)的作用及分子机制。方法运用公用数据库,解析神经母细胞瘤中调控Warburg效应的候选关键转录因子SPI1;经嘌呤霉素筛选,获得稳定过表达/敲低SPI1的SK-N-BE(2)细胞株,分为空载体对照(Mock)组、SPI1过表达(SPI1)组、随机干扰(sh-Scb)组、SPI1干扰(sh-SPI1)组;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、染色质免疫共沉淀、双荧光素酶报告基因及蛋白质印迹法(Western blot)检测靶基因启动子活性和表达水平;分光光度计法和糖酵解压力试验检测有氧糖酵解水平;软琼脂克隆形成和基质胶侵袭检测瘤细胞的增殖和侵袭活性。组间比较采用t检验。结果SPI1组己糖激酶2(HK2)表达高于Mock组(3.63±0.53比1.00±0.05,t=17.462,P<0.05),磷酸甘油酸激酶1(PGK1)表达高于Mock组(3.28±0.39比1.00±0.03,t=17.651,P<0.05),细胞外酸化率(ECAR)高于sh-Scb组[(32.17±3.15)mpH/min比(9.82±1.49)mpH/min,t=10.352,P<0.05],克隆形成数高于Mock组[(163.30±7.59)个比(48.02±4.85)个,t=17.840,P<0.05],侵袭细胞数高于Mock组[(184.70±10.58)个比(88.33±5.56)个,t=8.214,P<0.05]。sh-SPI1组HK2表达低于sh-Scb组(0.33±0.02比1.00±0.04,t=14.370,P<0.05),PGK1表达低于sh-Scb组(0.34±0.02比1.00±0.03,t=19.192,P<0.05),ECAR值低于sh-Scb组(3.07±0.48比10.05±1.37,t=7.580,P<0.05),克隆形成数低于sh-Scb组[(21.33±3.96)个比(44.67±5.69)个,t=5.916,P<0.05],侵袭细胞数低于sh-Scb组[(40.67±3.48)个比(88.00±6.89)个,t=4.994,P<0.05],差异均有统计学意义。结论转录因子SPI1通过增强HK2和PGK1表达,促进神经母细胞瘤的Warburg效应和肿瘤进展。     

DOG-1蛋白在胃肠间质瘤中的表达及其意义

目的探讨DOG．1在胃肠间质瘤（GIST）中的表达及其与GIST临床病理特征的关系。方法应用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测80例GIST及40例正常胃肠道组织中DOG-1及CD117的表达情况。结果80例GIST组织中有76例（95．0％）表达DOG．1,67例（83．8％）表达CD117,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;而40例正常胃肠道组织中,均未见CD117及DOG．1阳性表达。梭形细胞型GIST中,DOG．1与CD117阳性表达率均为96．0％（49／51）：上皮样细胞型GIST两者表达率分别为94．1％（16／17）和52．9％（9／17）;混合细胞型GIST分别为91．7％（11／12）和75．0％（9／12）。DOG．I的阳性表达与GIST患者的年龄、性别、肿瘤的发生部位及病理学分级均无关（均P〉0．05）。结论DOG．1在GIST组织中高表达。特别是在以上皮样细胞为主型中存在高表达,在正常胃肠道组织中不表达,有望作为诊断GIST的一种新型的标志物。     

腹腔镜辅助下小儿骶尾部畸胎瘤切除术15例

目的探讨腹腔镜辅助切除小儿Ⅲ型骶尾部畸胎瘤的可行性、安全性及操作要点。方法回顾分析腹腔镜辅助手术治疗15例小儿Ⅲ型骶尾部畸胎瘤的临床资料。先经腹腔镜结扎肿瘤供应血管并游离瘤体的腹腔部分,后经骶尾部完整切除肿瘤。结果 12例顺利完成手术,3例中转开腹。术后均顺利恢复,经半年以上的随访未发现复发病例。结论腹腔镜辅助小儿骶尾部畸胎瘤切除术是有效、安全可行且损伤小的手术方法。     

嗜酸性粒细胞性胃肠炎32例临床诊治分析

目的 分析嗜酸性粒细胞性胃肠炎(eosinophilic gastroenteritis,EG)的临床特点、内镜下表现、病理特点及诊治要点,以提高对该病的认识.方法 回顾性分析湖北医药学院附属太和医院消化内科2001年1月～2011年5月收治的32例EG患者临床资料,对病史、临床表现、实验室结果、内镜结果及治疗情况汇总分析.结果 32例患者黏膜型25例,浆膜型6例,黏膜-肌层混合型1例;患者多以腹痛为首发症状(84.38％);外周血和骨髓嗜酸粒细胞(ensinophils,EOS)计数明显增高(14.2％ ～49.5％ vs 12.5％ ～42.5％);镜下表现为黏膜充血水肿、糜烂、红斑,病变多分布在胃窦部、十二指肠和结肠;活检和腹水检测有大量EOS浸润;糖皮质激素治疗后患者症状缓解,复发用药亦有效.结论 EG多以腹痛起病,胃窦部、十二指肠、结肠为常见病变部位,内镜活检和腹水中见EOS浸润有助于明确诊断,糖皮质激素疗效好.     

30例以消化道出血为主要表现的遗传性出血性毛细血管扩张症的系统回顾分析

遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)又称Osler-Weber-Rendu病,是一种常染色体显性遗传病,患病率为1/5 000～1/8 000,以复发性鼻出血、黏膜皮肤毛细血管扩张、内脏动静脉畸形(AVM)和HHT家族史为特征[1].约80％的HHT患者有胃肠毛细血管扩张,可通过纤维电子胃镜和肠镜或胶囊内镜检查发现,其...     

抗胃癌MG7单链抗体与重组超抗原SEB融合蛋白在体内外对胃癌细胞的杀伤作用研究

目的 研究SEB-scFv融合蛋白对胃癌的抑制作用.方法 在体外通过MTT法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响;在电子显微镜下观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.采用胃癌动物模型观察治疗后肿瘤重量和存活时间.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应;1.0μg/ml和10μg/ml高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带;在电子显微镜下可观察到被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化;融合蛋白0.1μg/ml、1.0μg/ml、10μg/ml组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者的凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%,而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异具有统计学意义(P＜0.05).融合蛋白治疗组大鼠移植瘤的瘤重明显低于其他各组(P＜0.05),抑瘤率高达61.3%,其生存时间为(31.7±2.1)d,存活时间延长达54.6%.结论 SEB-scFv融合蛋白作为一种新的抗肿瘤生物制剂有明显的抑癌效应.     

锤头状核酶阻断雄激素受体基因表达的研究

目的　探讨核酶 (RZ)在细胞水平调节雄激素受体 (AR)基因表达的作用。方法　设计并合成针对AR的锤头状核酶序列 ,分子克隆技术构建活性核酶和无活性核酶表达载体 ,脂质体介导下转染雄激素受体表达阳性细胞株T47D。转染第 1～ 3天 ,应用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测细胞内AR基因表达水平。结果　AR活性核酶表达载体转染后 ,T47D细胞ARmRNA水平降低 2 2 .4%～ 50 .7% (P <0 .0 5) ,AR蛋白阳性细胞减少 7.1 0 %～1 1 .90 % (P <0 .0 5)。而无活性核酶对细胞AR基因表达差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　成功构建AR锤头状核酶表达载体 ,能特异性切割ARmRNA ,阻断雄激素受体基因表达     

以消化道症状为主要表现的肺小细胞癌误诊分析

自 1996年 4月～ 1999年 7月 ,我院收治的肺癌患者中 ,7例以消化道症状为主要表现的肺小细胞癌均误诊为消化系统疾病 ,现报道如下。1　临床资料1·1　一般资料　本组 7例中 ,男 5例 ,女 2例 ;年龄 4 9～ 72岁 ,平均 5 6 5岁 ;有吸烟史者 5例。均以恶心、呕吐、上腹痛等消化道症状就诊于消化科 ,无咳嗽、咯血、胸痛等呼吸道症状。其中恶心、呕吐 5例 ,呕吐伴发热1例 ,呕吐伴神志恍惚 1例。1·2　辅助检查　本组患者均行胃镜检查 ,其中胃炎 5例 ,胃溃疡 1例 ,食管炎 1例。 1例Ｂ超检查提示胆囊结石。 4例头颅ＣＴ未见明显异常。 7例查血钠均…