Klotho RNA干扰对人主动脉平滑肌细胞钙化和表型转化的影响

目的探讨抗衰老因子(Klotho)RNA干扰对人主动脉血管平滑肌细胞钙化和表型转化的影响。方法采用慢病毒抑制人主动脉平滑肌细胞的Klotho表达,通过荧光显微镜、荧光定量PCR及Western印迹法验证转染效率。采用微量法检测细胞内钙离子含量及碱性磷酸酶活性,酶联免疫吸附试验检测骨桥蛋白水平,采用荧光定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、平滑肌(SM)22α、骨桥蛋白等相对表达量。结果慢病毒转染人主动脉平滑肌细胞后Klotho表达明显下调。转染Klotho能显著增加人主动脉平滑肌细胞内钙水平,增加碱性磷酸酶活性,提高α-SMA、SM22α及表型转化标记物骨桥蛋白的mRNA表达水平,同时细胞裂解液中骨桥蛋白水平也显著增加。结论Klotho表达减少可促进人主动脉平滑肌细胞钙化,并促进细胞从收缩型向分泌型转化。