内质网应激在高糖所致血管平滑肌细胞钙化中的作用与机制

目的：探讨内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激在高糖引起的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化中的作用与机制。方法35 mmol/L D-葡萄糖(高糖)处理 VSMCs,模拟糖尿病状态,观察高糖能否引起 VSMCs 的 ER 应激和 VSMCs 表型转化(收缩型转变为成骨样细胞),观察 ER 应激的抑制剂对VSMCs 钙化的效应,采用比色法、o-cresolphthalein 法和 western blot 观察碱性磷酸酶活性、钙沉积和骨分化转录因子(Runx2)等指标。结果应用35 mmol/L D-葡萄糖分别处理 VSMCs 3 d 或7 d,可引起 VSMCs 的 ER 应激蛋白表达上调、碱性磷酸酶活性增加、钙沉积和骨分化标志蛋白增多;苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)预处理在抑制 VSMCs 的 ER 应激的同时,能阻断高糖所致 VSMCs 钙化(表现为碱性磷酸酶活性、钙沉积和骨分化标志蛋白下降)。结论高糖能激活 VSMCs 的 ER 应激,继而引起 VSMCs 凋亡和钙化,提示 ER 应激在高糖引起的VSMCs 钙化中起着重要作用。     

hTERT基因对移植的内皮祖细胞在体内的增殖和血管新生的影响

目的研究h TERT基因对移植的内皮祖细胞(EPC)在体内的增殖和血管新生影响的机制。方法将90只健康雄性Sprague-Dawley大鼠(200～300 g)随机分为3组:对照组(n=30)、EPC转染组(n=30)和h TERT-EPC转染组(n=30)。选择三个梗死病灶区域通过心肌内注射移植EPC和h TERT-EPCs,对照组的大鼠注射磷酸缓冲盐溶液;通过苏木精-曙红染色的心肌的石蜡切片,观察心肌梗死区域的毛细血管再生;通过RT-qPCR和蛋白质免疫印迹检测血管内皮细胞标记物(CD31、CD34、CD105和CD146) mRNA和蛋白的表达量;通过检测对照组和模型组小鼠体外骨髓EPCs的增殖评估h TERT对EPC功能的影响;使用酶标仪检测NO浓度和乳酸脱氢酶(LDH)浓度,通过商业测定试剂盒检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性水平;通过酶联免疫吸附试验试剂盒检测血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶含量。结果与EPC转染组相比,h TERT-EPC转染组毛细血管在心肌梗死区增生较多;与EPC转染组相比,h TERT-EPC转染组CD31、CD34、CD105、CD146 mRNA和蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P0. 05);与对照组(173. 52±20. 17) EPC相比,模型组(32. 14±12. 33)小鼠的EPC显示受损的增殖,h TERTEPC转染组(122. 14±13. 44)增加了受损EPC的增殖,差异有统计学意义(P0. 05); h TERT-EPC转染组中NO(18. 23±3. 15)、LDH(4. 03±0. 44)和i NOS(4. 52±1. 13)的分泌均高于EPC转染组[(14. 62±2. 18)、(3. 24±0. 67)、(3. 83±0. 82)],差异有统计学意义(P0. 05); h TERT-EPC转染组血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶与EPC转染组相比升高,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 h TERT基因促进移植的内皮祖细胞在体内的增殖和血管新生。     

冠状动脉介入联合心脏再同步化治疗缺血性心肌顽固性心力衰竭

目的：探讨冠状动脉介入联合心脏再同步化治疗缺血性心肌病顽固性心力衰竭的临床疗效。方法通过对50例缺血性心肌病顽固性心力衰竭患者,随机分为对照组和实验组（n=25）。对照组患者给予冠状动脉治疗,实验组患者冠状动脉介入联合心脏再同步化治疗。观察比较2组患者的治疗效果、并发症发生情况、心功能差异。结果实验组患者治疗总有效率为96%,对照组患者为80%,差异有统计学意义（P<0.05）;实验组患者心律失常、脑血栓、再发心肌梗死和死亡并发症发生率分别为4%、8%、8%和4%,明显低于对照组患者（P<0.05）;实验组患者超声心电图LVEF（左心射血分数）为（49.9±9.7）%,较对照组患者明显提高（P<0.05）;LVEDD（左室舒张末径）为（60.2±12.1）mm,较对照组患者明显降低（P<0.05）;6 min步行距离为（387±53）m,较对照组患者明显提高（P<0.05）。结论对缺血性心肌病顽固性心力衰竭患者采取冠状动脉介入联合心脏再同步化可明显提高治疗效果,降低并发症发生率,改善患者心功能。冠状动脉介入联合心脏再同步化对治疗缺血性心肌病顽固性心力衰竭具有重要临床意义。     

内质网应激介导了高糖引起的血管平滑肌细胞钙化

目的探讨内质网应激是否介导了高糖引起的血管平滑肌细胞(VSMC)钙化。方法体外高糖(35μmol/L D-葡萄糖)处理VSMC模拟糖尿病环境,观察高糖是否引起VSMC内质网应激反应和凋亡,探索高糖是否引起VSMC表型转化(收缩型转变为成骨样细胞),观察内质网应激诱导剂和抑制剂对VSMC钙化的影响,碱性磷酸酶(ALP)活性、钙沉积和骨分化转录因子(Runx2和Osterix)通过比色法、O-cresolphthalein法和Western blot测定。结果应用35μmol/L D-葡萄糖分别处理VSMC不同时间,可以上调VSMC内质网应激标志蛋白表达、ALP活性、钙沉积和骨分化标志蛋白;然而,4-PBA预处理抑制VSMC内质网应激反应的同时,也能阻断高糖引起的VSMC钙化,表现为ALP活性、钙沉积和骨分化标志蛋白下降。结论高糖可以激活VSMC的内质网应激和凋亡,进而促VSMC钙化的发生,提示可能内质网应激介导了此激活过程。