人外周血淋巴细胞和粒细胞褪黑素受体亚型mt1 的检测

目的 检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体(MR)亚型mt1和其细胞内定位。方法 分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞，应用RT-PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA，阳性产物用自动测序仪测序；同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片，应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布。结果 RT-PCR产物电泳显示：人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带，片段长度约370bp，测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合；免疫组化结果显示：人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白，分布于细胞膜、细胞浆和细胞核，以细胞膜和细胞浆为主。结论 人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官，提示褪黑素在生理及病理情况下可能对免疫系统有调节作用。     

人胰腺褪黑素受体亚型基因及其蛋白表达的研究

人胰腺褪黑素受体亚型基因及其蛋白表达的研究     

小鼠脾脏褪黑素受体及其昼夜节律的研究

目的：研究小鼠脾脏是否存在褪黑素(M)结合位点,该结合位点是否存在昼夜节律。方法：应用放射配体结合法检测小鼠脾脏M结合位点（MR）。每4 h处死一批动物,研究不同时间脾脏MR的差异;分别持续光照及注射M 21 d,观察MR结合量及昼夜节律的改变。结果：小鼠脾脏存在MR,其特点为低结合容量,高亲和力,对M具高度特异性,符合特异结合位点的基本条件;昼夜节律研究显示,MR结合量峰值在12:00-16:00,谷值在0:00-4:00,F检验峰谷值间差异显著(P<0.01)。结论：小鼠脾脏存在MR,其MR有昼夜节律变化;持续光照及注射M不影响MR节律,表明MR昼夜节律的机制是自主的,具生理学意义。     

树鼩视网膜褪黑激素受体

视网膜具有合成,释放褪黑激素(MEL)的能力。MEL作为局部激素,可调节视网膜内多种神经递质的释放及视敏度。近年来应用~(125)IMEL作为放射性配体,证明鸟类视网膜存在MEL受体。本文报道了灵长类动物——树鼩视网膜MEL受体的结合特性。将成年树鼩断买处死后立即分离视网膜,制备匀浆、分离膜组份,进行放射配体受体结合     

大豆提取物(CKBN)对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的观察大豆提取物（CKBN）对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法腹腔注射环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）建立免疫功能低下小鼠模型,观察1、25、50、100 mg/kg剂量CKBN对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果25 mg/kg组的CKBN可显著增加免疫低下小鼠的脾指数;25、50、100 mg/kg组均能明显抑制环磷酰胺对小鼠外周血白细胞数量的影响,1 mg/kg组可显著提高单核细胞百分率,50 mg/kg组可显著提高中性粒细胞百分率;100 mg/kg组的IgG2a水平高于环磷酰胺组;1、25、50 mg/kg可显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能;25 mg/kg组可显著提高NK细胞杀伤活性。结论CKBN能显著增强CTX造成的免疫低下小鼠的免疫功能。     

人胚胎中枢神经系统褪黑素受体的鉴定及生物学特性

目的：证实人胚胎脑及脊髓组织是否存在褪黑素（Mel)受体（MR）,阐明Mel生物学行性及对神经系统作用的机制。方法：应用放射配体结合法检测人胚胎脑及脊髓组织^125I-Mel特异结合情况。结果：视网膜^125I-Mil特异结合量最高,视交叉及嗅球次之,其次为下丘脑、海马、脑干;动力学分析表明Mel与其受体的结合为可逆性结合;特异性结合分析提示对Mel呈高度特异性;10和50umol/LGTPγS使^125I-Mel特异结合降低。结论：人胚胎脑和脊髓组织均存在^125I-Mel特异结合位点,GTPγS对^125I-Mel特异结合及亲和力均有一定的影响。支持MR与抑制性G蛋白偶联的观点。     

人胚胎肾上腺皮质褪黑素受体亚型蛋白的分布

目的：研究褪黑素（Mel)受体亚型在人胚胎肾上腺皮质的分布。方法：应用免疫组化染色检测Ｍel受体亚型的人胚胎肾上腺皮质的分布。结果：在人胚胎肾上腺皮质的球状速、束状带和网状带均存在Ｍel受体mt1(Mella)和ＭＴ２（Ｍellb)亚型蛋白的表达,且主要分布于细胞质。结论：人胚胎肾上腺皮质存在Ｍel受体mt1和ＭＴ２亚型。     

人胚胎肝脏褪黑素受体的鉴定

目的 :应用免疫组织化和核酸原位杂交技术检测人胚胎肝脏的ＭＥＬ受体及其亚型分布 ,为进一步研究ＭＥＬ对肝脏功能的调节作用提供证据。方法 :1 研究对象 :中期水囊引产人胎儿 ,取出心脏和主动脉 ,立即用 4%多聚甲醛 0 .1 %ＤＥＰＣ固定 ,石蜡包埋组织 ,4℃冰箱贮存待检测。 2 ＭＥＬ探针制备 :培养含有ＭＥＬ1Ａ或ＭＥＬ1Ｂ受体质粒的大肠杆菌 ,抽提质粒 ,酶切 ,地高辛标记探针 (宝灵曼公司 )。 3 核酸分子原位杂交 :原位杂交检测试剂盒、ＡＰＥＳ、Ｐｏｌｙ -Ｌ -Ｌｙｓｉｎｅ(多聚赖氨酸 )和专用盖玻片均购自武汉博士德生物工程公司…     

人外周血淋巴细胞和粒细胞褪黑素受体亚型mt1的鉴定及生物学特征

目的:检测人外周血淋巴细胞和粒细胞是否存在褪黑素(Mel)受体亚型mt1,为进一步研究Mel对免疫系统的调节作用提供证据.方法:选择健康成年人,抽取外周血,应用密度梯度离心法分离淋巴细胞和粒细胞.采用免疫组织化学法、RT-PCR和基因序列法,检测其mt1蛋白及mRNA的表达.结果:(1)免疫组织化学染色结果显示,人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白,分布于细胞膜、细胞质和细胞核,以细胞膜和细胞质为主.(2)RT-PCR产物电泳均出现阳性条带,大小均相当于370核苷酸左右,经测序证实与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合.结论:人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在mt1受体蛋白及mRNA的表达,提示Mel对外周血淋巴细胞和粒细胞有直接作用.     

长科制剂增强试验动物的免疫功能

通过在体试验探讨长科制剂(CKBM)对机体免疫力的影响。按每千克体重50mg给予环磷酰胺(cycIophosphamide,Cy)腹腔注射诱发小鼠免疫力低下模型,观察高、中和低剂量长科制剂对脾指数、巨噬细胞吞噬率、吞噬指数及NK细胞杀伤活性等免疫功能指标的影响。结果表明长科制剂可明显改善免疫力低下小鼠模型的部分免疫功能,而对正常小鼠的免疫力无影响。