血管紧张素Ⅱ受体的分子生物学研究近况

ProgressofMolecularBiologyofAngiotensinⅡReceptorSunJuzhong(DivisionofBiochemistry,CardiovascularInstitute,FuWaiHospital,CAMS,Beijing)血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）通过AngⅡ受体的介导引起血管收缩、醛固酮分泌和钢的重吸收，对局部组织的生长和功能也有刺激作用[1]。为深入了解AngⅡ的作用，必须对AngⅡ受体进行详细研究，但是，由于AngⅡ受体的稳定性差，细胞表面含量少，受体的提纯至今没有成功[2]，故从蛋白水平研究AngⅡ受体是相当困难的。放射配基结合分析（RLBA）提示，AngⅡ受体可能有1个以上的类型。近来用AngⅡ…     

碱性成纤维细胞生长因子对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞肾素-血管紧张素系统的作用

以培养的自发性高血压大鼠（SHR）和正常血压（WKY）大鼠主动脉平滑肌细胞（ASMC）为模型,采用Northern印迹和逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术分别检测ASMC中血管紧张素原（Ang N）和血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）的AT_1型受体的基因表达,并用紫外法和放射免疫法分别测定培养液中的血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性和AngⅡ的含量。结果表明,基础状态及给予外源性碱性成纤维细胞生长因子（bFGF,10 ng/ml）刺激后,SHR的ASMC中上述4种实验参数的水平均明显高于WKY大鼠。提示SHR ASMC中的肾素—血管紧张素系统（RAS）处于高功能状态;bFGF能促进Ang N基因表达、激活ACE,进而导致Ang Ⅱ生成增加,同时它对AT_1受体基因表达也有调节作用,bFGF的上述作用可能是高血压时血管RAS高功能状态发生和维持的一个重要机制。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠主动脉平滑肌细胞心钠素合成、分泌和基因表达的影响

培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）及其对照ＷＫＹ大鼠的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）能合成和分泌心钠素（ＡＮＦ）。ＳＨＲ的ＡＳＭＣ合成和分泌的ＡＮＦ量分别为０．８１±０．０５和０．４０±０．０３ｎｇ／１０６ｃｅｌｌｓ，而ＷＫＹ大鼠为１．００±０．０７和０．７０±０．０３ｎｇ／１０６ｃｅｌｌｓ，前者明显低于后者（Ｐ＜０．０１）。应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检出ＡＳＭＣ中存在特异的ＡＮＦｍＲＮＡ．１０－１１～１０－５ｍｏｌ／Ｌ血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）能明显刺激ＡＮＦ的合成和释放，有量效关系。结果提出：（１）ＡＮＦ可在ＡＳＭＣ中原位合成。（２）ＳＨＲ的ＡＳＭＣ合成和分泌ＡＮＦ量下降及ＡｎｇⅡ刺激下其ＡＮＦｍＲＮＡ表达降低可能在高血压发生的血管机制中起作用。     

高盐负荷对高血压大鼠主动脉平滑肌细胞及肾皮质的心钠素受体基因mRNA表达的影响

成年卒中型自发性高血压大鼠（SHRsp）与正常大鼠（WKY）各32只,分为高盐组与对照组。高盐组从8周开始喂1.8％盐水。两组大鼠12周时从主动脉平滑肌（ASM）与肾皮质（KC）中提取总RNA。应用RT-PCR技术对心钠素A、B型受体mRNA水平分别进行比较。结果显示,（1）ASM中,高血压大鼠心钠素A、B型受体mRNA水平分别为正常大鼠的2.2倍和1.6倍;（2）高盐负荷引起两种大鼠ASM中的A型受体mRNA明显下降（SHRsp降低53％;WKY降低23％）,而B型受体mRNA水平明显升高（SHRsp升高69％;WKY升高29％）,（3）肾皮质的心钠素受体mRNA水平,在高盐负荷前后及两种大鼠之间均未发现显著性差异。结果说明,高血压大鼠ASM的心钠素受体基因表达增加,高盐引起该受体基因转录调控的改变,可能是高盐导致血压升高的机制之一。     

培养的大鼠血管平滑肌细胞中bFGF基因表达与血管紧张素Ⅱ释放的相互关系

采用Northern杂交检测培养的自发性高血压人鼠（SHR）和正常血压WKY大鼠的血管平滑肌细胞（VSMC）中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因表达，用紫外法和放免法分别测定培养液中血管紧张素转换酶（ACE）活性和血管紧张素Ⅱ（Aug11）含量。发现AugⅡ能明显促进VSMC中bFGF基因表达，而bFGF则能明显诱导ACE活性和提高AugⅡ释放，臣SHRVSMC的bFGF基因表达、ACE活性和AugⅡ释放均显著高于WKY大鼠。结果提示，VSMC中bFGF基因表达和AugⅡ释放间存在相互促进的正反馈联系。     

局部肾素-血管紧张素系统在高血压与心肌肥厚发生中的作用及机制研究

肾素-血管紧张素系统(RAS)在高血压的发生中起作用。免疫组化和分子生物学研究证实,除经典的循环RAS外,许多组织(包括心血管组织)都存在局部的RAS。而心脏和血管壁的RAS除参与心肌和血管平滑肌收缩功能的调控外,还能促使交感神经递质的释放,调节心肌代谢,促进细胞生长、增殖、或肥大,并与体内若干生物活性物质有相互作用。大量的临床和实验研究发现,心肌肥厚和血管壁增厚、管腔狭窄是高血压、冠心病的共同病理改变,是导致周围血     

心脏血管组织肾素血管紧张素系统在自发性高血压大鼠发病中的作用

幼年（5周）及成年（13周）卒中型自发性高血压大鼠（SHPsp）及同龄正常血压WKY大鼠（各组n＝16），乌拉坦麻醉（1．0g／kg，ip），记录颈动脉血压后，取动脉血；剥离心脏以肝素盐水（20IU／ml）港流后取心室肌；剥取主动脉中膜；分别经组织匀浆、提取。以放免法分别测定血浆肾素活性（PRA）及血管紧张素Ⅱ（ATⅡ），心室肌及血管平滑肌（VSM）的肾素浓度（RC）及ATⅡ含量。结果血浆ATⅡ和PRA与SHRsp的血压上升无平行关系，而心血管组织的RC和ATⅡ在SHRsp的幼年组已有增高趋势，至成年则明显高于WKY（P＝0．05～P＜0．01），与血压的升高一致。提示心脏血管组织的RAS与SHRsp高血压的发生和维持有关。     

自发性高血压大鼠肌肉注射心钠素基因的降压作用

目的：研究骨骼肌注射重组的人心钠素（ＡＮＦ）基因对高血压动物的降压效应及机制。方法：用反转录酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从人胚胎脑组织克隆出全长人ＡＮＦ互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ），并将其重组进质粒ｐｃＤＮＡ３，形成重组质粒ｐｃＤＮＡ３／ＡＮＦ。给５周龄（幼年）和１１周龄（成年）卒中易感型自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）的股四头肌分别注入２００μｇ和６５０μｇｐｃＤＮＡ３／ＡＮＦ，并用放射免疫分析、ＲＴ－ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交和免疫组化技术检测人ＡＮＦｃＤＮＡ在体内的表达。每周测血压１次。最后在麻醉下收集尿和血，测定某些生化参数。结果：一次肌肉注射人ＡＮＦｃＤＮＡ可明显延缓幼年ＳＨＲｓｐ的血压升高；能降低成年ＳＨＲｓｐ的血压达２．７～４．０ｋＰａ（２０～３０ｍｍＨｇ），并伴有血浆ＡＮＦ浓度的明显升高及尿量、尿钠排泄的增加，局部肌肉组织的信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）和ＡＮＦ表达阳性。结论：肌肉注射人ＡＮＦ基因可引起ＳＨＲｓｐ的持续性血压下降，显示了人ＡＮＦ基因对高血压患者降压治疗的可能性。