miR-212通过靶向NRP1调节结肠癌SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答北大核心CSCD

目的:探讨miR-212在SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答中的调控作用,并初步分析其调控机制。方法:结肠癌SW480细胞分别转染mimic、miR-NC或miR-212-5p,RT-PCR检测神经纤毛蛋白1(NRP1)和miR-212-5p表达水平并进行相关性分析;TargetScan预测miR-212-5p潜在靶向基因NRP1,荧光素酶实验验证靶向关系;SW480细胞单独或联合转染miR-212-5p和pcDNA-NRP1,RT-PCR检测miR-212-5p和NRP1 mRNA表达水平,Western blot检测NRP1蛋白表达水平;流式细胞术分选干细胞阳性标记(CD44+)比例,Western blot检测性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和富含亮氨酸重复单位的G蛋白偶联受体5(LGR5)蛋白表达;ELISA测定SW480细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-4蛋白含量,RT-PCR检测IL-6和IL-4 mRNA表达水平。结果:与Control组相比,miR-212-5p显著上调SW480肿瘤干细胞miR-212-5p表达(P<0.05),下调NRP1表达(P<0.05),抑制CD44+、SOX2、LFR5表达(P<0.05),促进炎症反应和免疫应答(P<0.05);与NRP1组相比,miR-212-5p明显抑制因NRP1上调的CD44+、SOX2和LGR5表达(P<0.05),促进因NRP1下调的炎症因子表达(P<0.05)。结论:miR-212-5p靶向抑制NRP1表达,调节结肠癌SW480肿瘤干细胞样特性和免疫应答。     

碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎模型肠道菌群变化及其潜在影响

目的:研究碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎(KOA)模型肠道菌群变化情况,探究肠道菌群与KOA的潜在联系。方法:将SPF级大鼠分为空白对照组和KOA组,通过膝关节局部注射碘乙酸钠制造大鼠KOA模型。通过16SrDNA检测大鼠粪便中的肠道菌群变化情况,蛋白印记法检测结肠组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达,RT-qPCR检测结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达情况,苏木精-伊红染色观察结肠黏膜通透性变化,苏木精-伊红染色观察关节滑膜和软骨组织的病理变化情况。ELISA检测血液上清中LBP,IL-1β,TNF-α及IL-10炎症因子水平。结果:与空白对照组相比,从KOA组中筛选出明显变化的肠道菌群,以Akkermansia和疣微菌门变化最为显著,结肠黏膜通透性增加,结肠组织中NF-κB p65及TNF-α蛋白表达升高,结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达升高,血液中促炎因子LBP,IL-1β及TNF-α蛋白含量升高,抗炎因子IL-10蛋白含量降低。结论:KOA病理状态下肠道菌群发生变化,结肠炎症反应增强,结肠炎症反应或许在提高全身炎症反应水平、促进与肠道菌群相关的KOA的病理进程中起到重要的桥梁作用。     

膝痹宁对膝骨关节炎模型大鼠滑膜纤维化的影响

目的观察膝痹宁对膝骨关节炎(KOA)模型大鼠滑膜纤维化的影响。方法大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组;KOA组、膝痹宁组造模。分别在膝痹宁灌胃治疗的第1、14、28、42、56天测量各组大鼠的膝关节横径;第56天处死大鼠提取滑膜组织,解剖学观察滑膜组织形态;天狼星红染色评估滑膜组织胶原沉积情况;WB和PCR检测纤维化标记物生长转化因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原α1链(COL1α1)、金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)的蛋白和基因表达。结果膝痹宁用药14天,28天时,膝关节横径变化并不显著,但膝痹宁用药42天,56天时,膝关节横径则较KOA模型明显减小,差异具有统计学意义(P<0.05);用药56天后对大鼠进行膝关节解剖学观察,KOA大鼠滑膜组织较正常大鼠有一定程度的增厚、充血、欠规则;而上述表现在膝痹宁大鼠有所减轻;天狼星红染色显示膝痹宁用药大鼠滑膜组织胶原沉积较少;纤维化标记指标物TGF-β、COL1α1、TIMP1的基因和蛋白表达在膝痹宁组均较KOA组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论膝痹宁对能有效减轻KOA滑膜纤维化,以“温经活血”立法的中药复方对组织纤维化具有良性干预效应。     

胃癌腹膜转移病人腹腔化疗港并发症发生及危险因素分析

目的:分析腹腔化疗港并发症发生及相关危险因素。方法:回顾性分析我院323例放置腹腔化疗港病人的临床资料,纳入261例胃癌腹膜转移病人。分析腹腔化疗港在胃癌腹膜转移病人腹腔化疗时发生的并发症及其危险因素。结果:261例中59例(22.6%)发生化疗港相关并发症。其中,皮下积液(25例,42.4%)和化疗港感染(16例,27.1%)是发生较多的并发症。其他是港体倾斜翻转(9例,15.3%),化疗港局部切口裂开(7例,11.9%),导管堵塞(1例,1.7%),和皮下转移(1例,1.7%)。化疗港并发症发生的中位时间为化疗港放置后3.0个月。结合Clavien-Dindo分级方法,将化疗港发生的并发症分为1~4个等级。ECOG评分、血清白蛋白水平、置港流程优化及专业团队放置为化疗港并发症发生的独立危险因素(P<0.05)。ECOG评分为唯一影响并发症分级的关联因素(P<0.05)。结论:腹腔化疗港在胃癌腹膜转移病人腹腔化疗中的应用安全可行,发生并发症可控。ECOG评分、血清白蛋白水平、置港方式是否优化及是否专业团队放置为化疗港并发症发生的独立危险因素。     

电针曲池、上巨虚对UC模型大鼠ChAT与a7nAChR等表达的影响

目的:观察电针溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠大肠经经合穴"曲池"、下合穴"上巨虚"后对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)、烟碱型乙酰胆碱受体α7(α7nAChR)表达的影响并对其相关作用机制进行分析,初步探讨"合治内府"中"合"穴的相对特异性。方法:以TNBS(2-4-6三硝基苯磺酸)/乙醇溶液灌肠诱导建立SD大鼠UC模型,曲池组与上巨虚组造模成功后分别电针曲池穴和上巨虚穴,连续治疗10 d,末次治疗24 h后处死所有组大鼠,肉眼观察大鼠结肠溃疡评分,提取血清、结肠组织并制备标本,检测其ChAT,α7nAChR,TNF-α的表达。结果:1与空白组相比:模型组溃疡评分、TNF-α表达明显升高(P<0.01),ChAT,α7nAChR表达明显降低(P<0.01)。2与模型组相比:曲池组TNF-α表达明显降低(P<0.01)、α7nAChR表达明显升高(P<0.01),结肠溃疡评分降低和ChAT表达升高均有趋势但无统计学意义(P>0.05);上巨虚组溃疡评分、TNF-α的表达明显降低(P<0.01),ChAT、α7nAChR的表达明显升高(P<0.01)。3与曲池组相比:上巨虚组溃疡评分、TNF-α表达明显降低(P<0.01),ChAT、α7nAChR表达水平明显升高(P<0.05或0.01)。结论:1电针曲池、上巨虚均能降低UC模型大鼠结肠溃疡评分和TNF-α的表达,升高ChAT、α7nAChR的表达,说明电针对溃疡性结肠炎的治疗作用可能是通过调节TNF-α、ChAT、α7nAChR等来实现的;2比较而言:电针上巨虚的治疗作用优于曲池,说明"上巨虚"存在相对特异性;3本研究结果部分证实:"合治内府"中的"合"主要应指下合穴,其具体内涵仍需进一步研究。     

逆行髓内钉辅助在儿童股骨延长中的应用

目的采用髓内钉辅助延长技术进行儿童股骨大段延长,评估其可行性,并对比同期矫正和分期手术的技术要点,明确此技术在儿童患儿中的应用价值。方法自2014年7月7日至2018年1月16日共规划完成逆行髓内钉辅助延长手术10例,其中男9例,女1例;年龄(13.10±2.18)岁。所有患儿延长截骨点均位于股骨远端干骺端,初诊至末次随访记录内容包括:性别、出生日期、不等长病因及治疗史、术时年龄、延长长度、带架时间、延长段愈合时间、屈膝角度、并发症等。比较同期延长和分期矫正的愈合时间,采用SPSS 22.0软件进行统计分析,提出合理的治疗策略。结果10例患儿患肢平均延长(7.07±1.01)cm,中位带架时间为8.5(4,16)个月,中位随访时间为39(34,54)个月。所有病例均获得了良好的临床和影像学愈合,并全部恢复正常行走功能,无延长后骨折发生。同期矫正与分期手术间在愈合速度为[(1.70±1.10)月/cm vs.(1.16±0.54)月/cm],膝关节功能(136.67°±20.82°vs.125.71°±26.37°)和并发症率方面的差异均无统计学意义。结论外固定架辅助逆行髓内钉技术进行股骨延长治疗儿童股骨短缩畸形是可行的,是股骨延长的有效手术方式之一;较轻的角度畸形和延长手术可同期进行;干骺端截骨延长成骨质量更佳,可有效减少带架时间;内生软骨瘤患儿的病变区延长是安全的。     

中药活性成分对肿瘤细胞周期基因的调控作用

细胞周期基因异常表达是肿瘤细胞携带缺陷基因无限增殖的关键，是具有巨大潜力的临床治疗靶点。中药活性成分因其抗癌效果显著，不良反应少等优点而被广泛关注。研究显示有中药活性成分可调控Cyclin、CDK和CKI等基因表达，而抑制肿瘤细胞生长，诱导细胞凋亡。本研究旨在为中药活性成分抗癌治疗的进一步临床应用提供药效基因分子生物学基础。