广西地区宫颈癌患者HPV感染情况分析

目的观察基因芯片技术对宫颈癌人类乳头状瘤病毒（HPV）分型检测的可行性,探讨广西地区宫颈癌患者HPV感染情况及其亚型分布规律。方法采用基因芯片技术对163例宫颈癌组织标本进行HPV分型检测。结果HPV总感染率为95．1％,其中鳞癌131例,HPV阳性率为98．5％;腺癌分别为32例和81．3％（P〈0．05）。鳞癌最常见的感染亚型是HPV16（78．6％）,其次是HPV18（11．5％）、HPV59（5．3％）、HPV58（3．1％）、HPV33（3．1％）、HPV31（3．1％）;腺癌最常见的亚型是HPV18（59．4％）,其次是HPV16（21．9％）、HPV52（6．3％）、HPV35（3．1％）。鳞癌患者单一感染106例（82．2％）,双重感染27例（17．8％）;腺癌患者分别为22例（84．6％）、4例（15．4％）;均未见三重及以上多重感染。结论基因芯片技术检测宫颈癌组织中HPV分型简便、高通量。广西地区宫颈癌中HPV感染率极高,其中鳞癌中以HPV16最常见,腺癌中以HPV18最常见。     

前列安栓联合克拉霉素治疗慢性前列腺炎276例临床分析

慢性前列腺炎是男科常见疾病之一,在各年龄段的男性中慢性前列腺炎的发病率可达10%～15%[1].该病的传统治疗方法很多,但疗效欠佳,病程反复迁延,严重影响患者的生活质量,且其病因目前尚未完全清楚.     

新生昆明小鼠胰腺巢蛋白阳性细胞的自然分化

背景：胰腺干细胞在常规培养条件下易于分化,难以获得足够数量的种子细胞。 目的：探讨体外培养条件下小鼠胰腺内、外分泌部的巢蛋白阳性细胞的分化情况。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2006-08/2007-08在广西医科大学基础医学院中心实验室完成。 材料：SPF级新生昆明系小鼠25只,由广西医科大学实验动物中心提供。 方法：以Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织,采用Percoll不连续密度梯度法分离单个细胞混悬液,分别从第1界面(磷酸盐缓冲液/1.068 g/L Percoll液)、第2界面(1.068 g/L Percoll液/1.096 g/L Percoll液)、第3界面(1.096 g/L Percoll液/ 1.118 g/L PercolI液)收集细胞,添加角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的低糖DMEM培养基进行体外连续培养。 主要观察指标：双硫腙染色判断各界面细胞的来源,免疫组织化学检测各界面细胞巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因蛋白1、角蛋白19的表达。 结果：从第1,2界面收集到的细胞80%~90%双硫腙染色后胞质呈铁红色,表明主要来源于胰腺的内分泌部;从第3界面收集到的细胞双硫腙染色后胞质不染色,表明来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内、外分泌部均可分离出大、圆、单个核的细胞,巢蛋白染色呈阳性表达。随着体外培养时间的延长,来源于胰腺内分泌部的巢蛋白阳性细胞形态保持不变,呈集落样生长,表达胰十二指肠同源盒基因蛋白1,有向胰腺内分泌部β-细胞分化的趋势;来源于胰腺外分泌部的巢蛋白阳性细胞呈铺路石样形态,表达细胞角蛋白19,出现向导管上皮细胞分化的趋势。 结论：新生昆明小鼠胰腺的内分泌部和外分泌部均存在巢蛋白阳性的细胞,前者具有分化为β-细胞的能力,后者具有分化为导管上皮细胞的能力。     

男性不育患者精子XY染色体的荧光原位杂交分析

目的探讨用荧光原位杂交分析的方法来检测少、弱、畸形精子症患者中精子XY染色体畸变率。方法将30例少、弱、畸形精子症患者和20例正常生育男性精液精子标本用荧光原位杂交分析的方法检测精子X和Y染色体的数目畸变的发生率,并将结果进行分析、比较。结果研究组单倍体精子数32 189个,其中单倍体X精子数占（45.34±6.56）%,单倍体Y精子数占（47.32±7.18）%;二倍体精子率为（0.168±0.059）%,精子X和Y染色体数目畸变率为7.34%。对照组单倍体精子数为19 246个,其中单倍体X精子数为（46.87±5.54）%,单倍体Y精子数为（49.32±6.17）%;二倍体精子率为（0.074±0.038）%,精子X和Y染色体数目畸变率为3.81%。两组二倍体精子率、精子数目畸变率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论少、弱、畸形精子症患者中精子X和Y染色体数目畸变率比正常生育人群高。     

胰激肽原酶联合葡萄糖酸锌片治疗弱精子症的临床研究

目的探讨胰激肽原酶联合葡萄糖酸锌片治疗弱精子症的临床疗效。方法将70例弱精子症患者随机分为治疗组（40例）对照组（30例）。治疗组服用胰激肽原酶和葡萄糖酸锌片,对照组服用三磷酸腺苷片（ATP）和维生素E胶丸,两组治疗时间均为3个月。比较两组治疗前后精液量、精子浓度、总活力、前向运动精子百分率的变化情况。结果治疗组总有效率为70.0%,对照组为43.3%,两组治疗后比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗后精液量、精子浓度治疗前后差异无统计学意义（P〉0.05）,而总活力、前向运动精子百分率各组治疗前后及两组治疗后比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论应用胰激肽原酶联合葡萄糖酸锌片治疗弱精子症有一定的疗效。     

男性生殖器疱疹病毒感染对精液质量的影响

目的探讨男性生殖器疱疹病毒感染对精液质量的影响。方法对45例男性生殖器疱疹病毒感染患者(研究组)及40例非生殖器疱疹病毒感染患者(对照组)的精液常规和精子形态学进行分析、比较。结果研究组和对照组的精液量、pH值、液化时间、密度等参数比较无明显差异;生殖器疱疹病毒感染组精子的存活率、活动力及精子形态学均低于对照组,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论生殖器疱疹病毒感染可对精液部分参数有所影响。     

精液生精细胞检查在无精子症鉴别诊断中的价值

目的 探讨精液生精细胞检查对无精子症鉴别诊断的应用价值。方法 回顾性分析56例无精子症患者的精液生精细胞学检查结果．并和附睾或睾丸穿刺活检结果对照、分析。结果 精液生精细胞学检查对梗阻性和非梗阻性无精子症分型诊断的符合率分别为92．86％、100％。28例非梗阻性无精子症中，生精阻滞在精子细胞水平、精母细胞水平、精原细胞水平或仅有支持细胞分别为11例、13例和4例，与附睾或睾丸穿刺活检结果比较，其符合率分别为90．91％、92．86％、100％。同一患者精液细胞学检查与附睾或睾丸穿刺活检所反映的生精细胞发育水平一致（P〈0．01）。结论 精液生精细胞检查能对无精子症进行比较准确、可靠的分型鉴别诊断．     

宫颈上皮内瘤变组织中人类乳头状瘤病毒分型检测的意义

目的 探讨广西地区宫颈上皮内瘤变(CIN)石蜡包埋组织中人类乳头状瘤病毒(HPV)分型检测的临床意义及基因芯片技术的应用.方法 应用基因芯片技术分别对CINⅠ级28例、CIN Ⅱ级25例、CIN Ⅲ级25例病理石蜡包埋组织标本进行HPV分型检测.结果 CINⅠ级HPV阳性率为46.4%(13/28),其中单一感染12例,三重感染(HPV16,33,59)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(14.3%)、58(10.7%)和52(7.1%).CIN Ⅱ级阳性率为64.0%(16/25),其中单一感染15例,双重感染(HPV11,18)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16 (20.0%)、58 (12.0%)和18 (12.0%).CINⅢ级HPV阳性率为96.0%(24/25),其中单一感染17例,双重感染7例(HPV16和58双重感染为主,共3例);HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(52.0%)、58(28.0%)和33( 16.0%).结论 HPV 16和58是广西地区各级CIN中最常见的感染亚型,HPV分型检测能够早期发现病原并且指导后续的治疗;基因芯片技术敏感性高,特异性强,可应用于病理石蜡包埋组织HPV分型检测.     

昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特异性标志物巢蛋白的鉴定

探讨胰腺干细胞的分离、培养及其特异性标志物巢蛋白鉴定的基本技术方法。选取新生昆明种小鼠25只,分离胰腺组织,V型胶原酶消化,结合自然沉降技术形成不连续密度梯度离心。分别从磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液(第一界面)、1.068g/L Percoll液/1.096g/L Percoll液(第二界面)、1.096g/L Percoll液/1.118g/L Percoll液(第三界面)收集细胞。各界面细胞均加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM低糖培养基,置于经多聚赖氨酸处理的培养瓶中常规培养。24h后将培养基更换为不含胎牛血清的DMEM低糖培养基,并加入10mg/L的角质细胞生长因子和20μg/L的碱性成纤维细胞生长因子,观察体外培养的各界面细胞的形态学特征。胰腺的内分泌部存在β细胞,双硫腙能与β细胞分泌颗粒中的锌螯合而呈现铁红色。将收集的各界面细胞进行双硫腙染色,检测细胞来源。免疫组织化学法检测各界面巢蛋白的表达。结果第一、二界面细胞65%～90%双硫腙染色呈阳性,来源于胰腺的内分泌部;第三界面细胞双硫腙染色呈阴性,来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内分泌部获得的细胞聚集呈胰岛样细胞团贴壁生长,48～72h后可见许多大、圆、单个核的细胞从胰岛样细胞团中向周围长出,以附壁生长的方式在局部形成细胞集落。从胰腺的外分泌部获得的细胞主要呈上皮样生长,并逐渐汇合成片,在上皮样细胞集落的周围可见大、圆、单个核的细胞生长并形成集落。各界面大、圆、单个核的细胞,巢蛋白均呈阳性表达。提示从胰腺内、外分泌部的组织中能成功获取胰腺干细胞特异性标志Nestin表达阳性的干样细胞。