pcDNA3.1-HMOX1重组质粒载体的构建与鉴定

目的：构建pcDNA3．1－HMOX1重组质粒载体。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3．1载体的BamHⅠ和 NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。结果 pCDNA3．1－HMOX1重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因HMOX1的序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论成功构建pCDNA3．1－HMOX1融合基因并在DH5α大肠杆菌内表达,为进一步探讨HMOX1的生物学功能奠定了基础。     

孕妇无乳链球菌的感染及药物敏感性分析

目的：探讨孕妇无乳链球菌的感染及药物敏感性,指导临床合理用药。方法通过取进行产检或分娩的1042例阴道分泌物和直肠肛门部拭子双份标本,培养,取可疑菌落作CAMP（环磷酸腺）初筛试验,对阳性细菌进行药敏分析。结果阴道分泌物阳性检出56例,检出率为5.37%,直肠肛门部拭子阳性检出62例,检出率为5.95%,两者检出均为阳性50例,检出率为4.79%,其中直肠检出阳性,阴道检出阴性12例,直肠检出阴性,阴道检出阳性6例;无乳链球菌对青霉素、头孢唑林、万古霉素、利奈唑烷、呋喃妥因高度敏感,未出现中介和耐药情况。四环素的耐药率最高,为90.7%,其次为红霉素,耐药率为62.7%。结论针对围产期孕妇通过阴道分泌物和直肠肛门部拭子对无乳链球菌进行检验,通过无乳链球菌药敏试验,指导临床合理用药,降低无乳链球菌感染发生率。     

血清AFU对原发性肝癌诊断价值的meta分析

目的用meta分析的方法评价血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PHC)诊断中的价值。方法检索Cochrane Library、Pub Med、web of knowledge(Medline、BIOSIS Previews)、Springer link、Science Direct数据库,检索时间为1997年1月至2013年12月。中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方、重庆维普等数据库,检索时间为19841月年至2013年12月。检索语言限定为中文和英文。收集研究血清AFU对PHC诊断价值的相关文献,对符合纳入标准的文献进行质量评价,采用meta-Disc 1.4软件进行分析,综合评价血清AFU在原发性肝癌诊断中的价值。结果共纳入20篇文献(中文15篇,英文5篇)。分析病例组2 114例,对照组5 718例。对入选20篇文献进行异质性检验,提示所纳入文献具有非阈值效应引起的异质性,因此选用随机效应模型进行meta分析。汇总灵敏度为0.77;汇总特异度为0.87;汇总阳性似然比为5.37;汇总阴性似然比为0.28;诊断比值比为20.47;受试者工作曲线(SROC)曲线下面积为0.87。结论血清AFU在PHC的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,对其临床诊断具有较高的价值。     

抗苗勒管激素水平检测在高龄妇女卵巢低反应预测中的价值

目的分析在高龄妇女卵巢低反应预测中应用抗苗勒管激素水平检测的价值。方法选择2018年6月-2019年6月之间高龄妇女49例为观察组,选择同期身体健康且卵巢功能正常的高龄妇女49例作为对照组,对比两组研究对象血清、卵泡液中抗苗勒管激素水平,比较两组血清黄体生成激素、血清卵泡刺激素、雌二醇水平。结果观察组血清、卵泡液中AMH水平低于对照组,差异具有统计学意义,P<0.05。观察组血清LH、FSH、水平均高于对照组,差异具有统计学意义,P<0.05;观察组E2水平明显低于对照组,差异具有统计学意义,P<0.05。结论卵巢低反应高龄妇女血清、卵泡液中,抗苗勒管激素水平均明显降低,与卵巢低反应存在一定关联,抗苗勒管激素水平可较早反映出高龄妇女卵巢功能改变,对其自然受孕能力进行评估,所以抗苗勒管激素水平检测在评估高龄妇女生育能力中具有较高临床价值。     

妊娠高血压综合征患者凝血四项和D-二聚体检测分析

目的探讨妊娠高血压综合征（简称妊高征）患者的血凝与纤溶指标变化,为临床防治妊高征提供理论依据。方法采用法国STAGO全自动血凝分析仪测定,对妊高征患者（妊高征组）45例、正常妊娠组50例及同期健康体检女性50例（对照组）的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（AgTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fbg）及D-二聚体（DD）进行检测分析。结果正常妊娠组与对照组相比,正常妊娠组的门和APTT下降,而Fbg和DD升高（P〈0．05）;妊高征组与正常妊娠组相比,妊高征组的PT和AP订进一步下降,Fbg和DD进一步升高（P〈0．05）。TT差异无统计学意义（P〉0．05）。结论妊高征患者存在高凝状态及纤溶亢进,产前测定凝血功能及DD指标,对妊高征的预防及指导临床治疗具有重要意义。     

pCDNA3.1-MT2A真核表达载体的构建及亚细胞定位

目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。     

PSMA7对A549细胞表面黏附分子表达的影响

目的探讨PSMA7表达量的变化对A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44表达的影响。方法采用流式细胞仪分别检测高表达PSMA7的A549细胞[pcDNA3.1(-)/PSMA7组]和低表达PSMA7的A549细胞(shPSMA7组)表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1和CD44的表达情况。结果与高表达阴性对照组[pcDNA3.1(-)组]相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组的ICAM-1(t=86.325,P=0.000)和VCAM-1(t=16.337,P=0.000)的表达量均显著降低,CD44表达量则无明显变化(t=-0.545,P=0.615),而与低表达阴性对照组(shNC组)相比,shPSMA7组ICAM-1(t=-119.827,P=0.000)和VCAM-1(t=-26.68,P=0.000)表达量均显著增高,CD44表达量则无明显变化(t=-848,P=0.444)。与pcDNA3.1(-)组相比,pcDNA3.1(-)/PSMA7组穿膜侵袭细胞的数量明显减少(t=3.553,P=0.024),而shPSMA7组明显高于shNC组(t=-3.207,P=0.033)。结论高表达或干扰PSMA7可影响A549细胞表面黏附分子ICAM-1,VCAM-1的表达,提示PSMA7可能因此参与肺腺癌细胞的侵袭和转移。     

2例遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症患者糖化血红蛋白测定的分析

地中海贫血基因检测发现两姐妹均患有遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症(HPFH),对其进行糖化血红蛋白检测,姐姐糖化血红蛋白A1c(HbA1c)未检出,妹妹HbA1c为5.9%,现报道如下。1临床资料1.1姐姐,29岁,孕16周。相关检验结果如下。(1)血常规:Hb 134 g/L、MCV 62.8 fl、MCH 21.0 pg、MCHC 334 g/L、RBC 6.39×1012/L、RDW 22.5%;(2)血红蛋白电泳     

广东中山地区55240例儿童7项呼吸道病毒抗原检测的结果分析

目的探讨广东中山地区儿童呼吸道病毒感染与性别、年龄、季节、疾病等的关系,为儿童呼吸道病毒感染的诊断提供临床依据。方法采用直接免疫荧光法对该院从2011年11月25日至2016年9月30日共55 240例患儿进行流感病毒A、B(IFA、IFB)、副流感病毒1、2、3(PIV1、PIV2、PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)及腺病毒(ADV)7种常见病毒抗原的检测,并对结果进行分析。结果在55 240例患儿中病毒感染阳性率为23.25%,其中RSV 53.75%、IFA13.83%、ADV10.81%、PIV3 10.77%、IFB 6.49%、PIV1 2.37%、PIV2 1.14%、混合感染0.84%。男、女感染的阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。0~≤1岁和1~≤3岁患儿感染病毒的阳性率均高于其他组,差异有统计学意义(P0.05),两个年龄段中均以RSV的阳性率较高(71.92%,46.23%)。此7种病毒在冬、春季感染的阳性率高于夏、秋季,差异有统计学意义(P0.05),且均以RSV的阳性率最高。55 240例患儿中,此7种病毒阳性率以患支气管炎的患儿组高于其他组,差异有统计学意义(P0.05),且以感染RSV阳性率最高。108例混合感染患儿中,也以混合感染RSV的患儿最多(90例)。结论 RSV是中山地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体,3岁以下儿童阳性率最高,冬、春季为感染高发季节。