腺苷A2A受体与神经系统疾病

作为一种重要的神经递质,腺苷能通过与细胞膜上的腺苷受体（adenosine receptors,AR）结合而发挥细胞调节作用。 AR属于G蛋白偶联受体家族,哺乳动物的AR至少包含A1、A2A、A2B和A3等4个亚型,其中A2A受体与多种临床疾病的发生、发展都有着密切的关系。本文主要综述了A2A受体与多种神经精神疾病之间关系的研究进展,以期为这些疾病的防治研究提供新的线索。     

Lg-1诱导人胃癌细胞系BGC-823凋亡作用及机制的探讨

目的:研究新鬼臼毒素衍生物4β-4-脱氧-氮取代的异亮氨酸(5-FU基)-戊醇酯-4’-去甲表鬼臼(Lg-1)对人胃癌细胞系BGC-823的诱导凋亡作用及机制.方法:噻唑蓝(MTT)、流式细胞术和Hoechs33258染色分别检测Lg-1对BGC-823细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响.荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测药物处理后对BGC-823细胞凋亡相关基因p53、Bax、Bcl-2、p21和Caspase-3表达的影响.结果:Lg-1对BGC-823细胞增殖具有明显剂量和时间依赖的抑制作用,随药物浓度增加,抑制效应增强,药物浓度为0.01、0.1、1和10 μmol/L时,Lg-1对BGC-823的抑制率分别为23.5％、30.8％、32.4％和52.1％,与依托泊苷(Vp-16)处理组(3.5％、8.7％、10.9％和21.3％)比较差异有统计学意义,P均＜0.01.随时间延长,抑制作用逐渐增强,12～60 h Lg-1处理组对BGC-823的抑制率与Vp-16处理组比较差异有统计学意义,12 h抑制率分别为9.8％和8.0％,P=0.001;24h分别为11.6％和9.0％,P=0.02;36h分别为19.4％和16.2％,P=0.014;48 h分别为44.1％和41.2％,P=0.048;60 h分别为65.4％和50.1％,P=0.001.细胞周期检测显示,Lg-1作用12和24 h后,G2/M期的细胞含量分别为39.37％和74.36％,与对照组及Vp-16组比较均明显增加,而G0/G1期细胞含量分别为20.06％和12.25％,较对照组及Vp-16组显著减少.Hoechst33258染色显示,Lg-1处理组细胞核固缩、碎裂、凋亡样改变,药物处理后Bcl-2 mRNA的表达呈降低趋势,Vp-16处理组Bcl-2 mRNA表达量为0.748,Lg-1处理组为0.425,而p53、Bax、p21和Caspase-3 mRNA的表达呈增高趋势,Vp-16处理组mRNA表达量分别为1.074、1.232、1.818和2.9,Lg-1处理组分别为1.903、1.393、1.911和3.097,且Lg-1处理组作用优于Vp-16处理组.结论:Lg-1可抑制胃癌细胞增殖,使细胞阻滞在G2/M期,该过程可能与其上调p53、Bax、p21、Caspase-3表达和下调Bcl-2基因的表达有关.     

IL-21在ITP中的表达及大剂量地塞米松对其调控的研究

目的:探究免疫性血小板减少症(immunologic thrombocytopenia,ITP)与IL-21表达异常的相关性,同时探究大剂量地塞米松(high-dose dexamethasone,HD-DXM)冲击治疗ITP的疗效是否与IL-21有关。方法:抽取26例初诊ITP患者及24例健康人的外周血10 ml,密度梯度离心法获得血清及单个核细胞,分别采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测单个核细胞IL-21的表达,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测ITP治疗前后及正常对照者血浆中IL-21,IFN-γ和IL-4的水平。结果:流式细胞术测定发现,ITP患者单个核细胞表面分子IL-21表达明显高于健康对照(13.07%vs 8.2%);ITP患者IL-21 mRNA(9.524±0.97)与健康对照组(3.701±0.60)存在显著统计学差异,经HD-DEX治疗后IL-21 mRNA的比率值(5.87±1.21)较治疗前显著降低(P0.01);ITP患者血清中IL-21和IFN-γ水平与健康对照组和HD-DEX治疗组相比均具有显著的统计学差异(P0.01);而IL-4在治疗后含量却上调,与治疗前相比有统计学意义。结论:IL-21的表达异常参与了ITP发病过程,地塞米松对ITP的疗效与下调IL-21表达有关。     

扁桃体术后出血25例临床护理

扁桃体术后出血是扁桃体手术的常见并发症,国内报道约3％,我院自1984、1至1993年12月共收治扁桃体切除术1192例,术后出血25例,占2％。我们观察到大多数(68％)术后出血发生于手术后3小时内,因此,术后严密观察至少3小时是减少术后并发症和死亡率的重要措施。 一、临床资料: 本组病例男14例,女11例,年龄最小11     

汉滩病毒核蛋白HLA—A^＊02限制性CTL表位的预测及实验鉴定

目的：采用人工神经网络模型及在线软件BIMAS和SYFPEITHI共同预测汉滩病毒核蛋白HLA—A^＊02限制的CTL表位，并对CTL表位进行实验鉴定。方法：①选取2004-11解放军第四军医大学唐都医院住院的肾综合征出血热患者1例，汉滩病毒特异性IgM抗体为阳性。无菌抽取肾综合征出血热患者外周血，分离外周血单个核细胞，液氮冻存备用。②采用JavaNNS软件模拟神经系统对信息的处理过程，建立人工神经网络模型。训练人工神经网络的9肽包括584种HLA—A^＊02结合肽和130种HLA—A^＊02非结合肽，随机数字表法分为3部分：80％为训练肽（用来训练模型，使其学习其中隐含的规律），10％为确认肽（防止训练过度，使训练在适当的时候终止），10％为试验肽（对训练好的模型进行初步的评价）。无、低、中、高亲和力9肽训练人工神经网络的输出值分别为0．1，0．4，0．6，0．8。因此，人工神经网络模型的默认阈值为0．4。此外，还应用在线软件BIMAS和SYFPEITHI，共同预测汉滩病毒核蛋白的CTL表位。③采用ELISPOT鉴定汉滩病毒核蛋白特异的HLA—A^＊02限制的CTL表位。结果：①人工神经网络、BIMAS和SYFPEITHI预测的准确度：3种方法预测的灵敏度分别达到0．89，0．78，0．97，特异性分别为0．90，0．87，0．20。三者共同预测到23个汉滩病毒核蛋白特异的CTL表位。②HLA—A^＊02限制的CTL表位的实验鉴定：在可刺激肾综合征出血热患者外周血单个核细胞产生阳性反应的3条15肽中，预测到了4个HLA—A ^＊02限制的CTL表位。经ELISPOT实验证实，其中的2种9肽可刺激HLA—A^＊02阳性的肾综合征出血热患者外周血单个核细胞分泌γ干扰素。结论：肾综合征出血热患者中存在着汉滩病毒特异的CTL应答。汉滩病毒核蛋白CTL表位的有效预测，大幅度减少了合成候选9肽的数量，降低了成本。为肾综合征出血热细胞免疫应答的研究以及多肽疫苗的设计，奠定了重要基础。     

EB病毒转化B淋巴母细胞在汉滩病毒CTL表位研究中的应用

目的:建立EB病毒转化B淋巴母细胞系(B-LCL),作为抗原提呈细胞(APC)提呈抗原肽,刺激短期培养的特异性T细胞活化并分泌IFN-γ,从而应用于T细胞表位鉴定中.方法:用B95-8细胞培养上清中的EB病毒转化肾综合征出血热(HFRS)患者PBMC,建立HFRS患者的B-LCL,以自身BLCL为APC,加载抗原肽后,刺激短期培养的G9L特异的HFRS患者CD8+ T细胞系,应用ELISPOT测定CD8+ T细胞受到抗原肽刺激后产生IFN-γ的能力.结果:加载过抗原肽G9L或V15R的B-LCL可刺激G9L特异的CD8+ T细胞活化并产生IFN-γ,而与G9L无同源序列的115P则不能刺激G9L特异的CD8+ T细胞活化.结论:B-LCL可作为非专职APC有效地将抗原肽提呈给特异性T细胞.     

汉滩病毒核蛋白T细胞表位的鉴定及其特异性T细胞应答规律的初步探讨

目的:鉴定引起肾综合征出血热(HFRS)的汉滩病毒核蛋白(HTNV-NP)的T细胞表位,并探讨其特异性T细胞应答的规律。方法:合成覆盖HTNV-NP全长序列的全套部份重叠15肽,用ELISPOT方法筛选能刺激HFRS患者外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的15肽,并测定其特异性T细胞的频率。结果:47例HFRS患者中,有18例可对HTNV-NP产生特异性T细胞应答,并发现在病程的早期就已开始产生T细胞应答。从11例患者PBMC中,鉴定出了17种HTNV-NP特异的T细胞表位,其中14种T细胞表位为首次报道,T细胞表位主要位于NP一级结构的中部。结论:HFRS病程早期即可产生特异性T细胞应答,T细胞表位主要位于NP序列的中部,T细胞应答可能在汉滩病毒感染过程中起重要的免疫保护作用。     

婴儿颅内肿瘤误诊3例

1病例报告 例1 患儿男,4个月25天。因呕吐10天就诊。患儿10天前开始非喷射性呕吐,每天4～6次,无发热、咳嗽、腹泻及哭闹不止,以＂上呼吸道感染、急性胃肠炎＂治疗1周无好转。查体：精神可,前囟平软,颈软,咽红,心肺腹无异常,病理征阴性。实验室检查无异常,肝胆脾及脐部B超未见异常。