结缔组织生长因子对胰腺癌细胞增殖和转移的影响

目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞增殖和转移的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和免疫组化方法,分别检测胰腺癌细胞株PANC-1和50例胰腺癌组织中CTGF的表达.采用重组腺病毒介导的CTGF转染PANC-1细胞使CTGF高表达,以RNA干扰方法使CTGF表达缺失,分别通过四甲基偶氮唑蓝(MMT)法、划痕实验、体外侵袭实验观察PANC-1细胞增殖和转移能力的变化.结果 实时定量PCR和免疫组化检测均显示,CTGF在PANC-1细胞及胰腺癌组织中高表达.CTGF转染后,CTGF转染组PANC-1细胞比空载体对照组增殖能力和修补划痕能力明显增强,200倍显微镜视野下的穿膜细胞数为34个,比空载体对照组(11个)明显增多.干扰CTGF后,siCTGF转染组细胞比空载体对照组增殖能力和修补划痕能力明显降低,200倍显微镜视野下的穿膜细胞数为6个,比空载体对照组(15个)明显减少.结论 CTGF在胰腺癌中高表达,其表达的高低对胰腺癌细胞的增殖和转移有显著影响.     

中西医结合治疗紧张性头痛49例临床观察

紧张性头痛是临床上最常见的头痛类型,约占所有头痛患者的40％,而这些患者又多半与颅周肌肉障碍有关.我们在临床上采用中西医结合方法治疗此类紧张性头痛,取得较佳疗效,现报告如下. 1 临床资料 1.1 纳入标准:①符合国际头痛协会(1988年)有关发作性及慢性紧张性头痛的诊断标准[1];②经头颅CT或MRI检查及神经系统检查排除器质性疾病;③经手或压痛计测试颅周肌肉触痛增强.     

中药配合言语训练治疗脑卒中后失语疗效观察

目的观察中药配合言语训练治疗脑卒中后失语的临床疗效。方法将100例患者随机分为两组，治疗组予以自拟豁痰解毒通络汤配合言语训练；对照组单用言语训练；疗程均为30d。结果治疗组总有效率高于对照组。结论中药配合言语训练治疗脑卒中后失语疗效满意。     

shRNA沉默EIF4E基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞VEGF-C表达的影响

目的:探讨shRNA沉默EIF4E基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞EIF4E及VEGF-C基因表达的影响.方法:制备针对EIF4E的三种小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),分别是siRNA1、siRNA2、siRNA3,筛选沉默最有效的siRNA,据此设计短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)寡核苷酸链,与真核表达载体pGPU6/GFP/Neo克隆连接,构建pGPU6/GFP/Neo-EIF4E重组质粒,经酶切鉴定后利用脂质体LipofectamineTM2000将鉴定正确的重组质粒转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学法检测EIF4E及VEGF-C mRNA和蛋白表达情况.结果:RT-PCR结果显示siRA1、siRNA2、siRNA3对乳腺癌MDA-MB-231细胞EIF4E基因表达均有抑制作用,与空白对照组、阴性对照组、脂质体组比较差异显著(P<0.05),尤以siRNA3抑制率最高达71.2%.利用针对siRNA3合成的shRNA与质粒载体pGPU6/GFP/Neo克隆连接构建的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-EIF4E,酶切鉴定表明构建成功,并稳定转染MDA-MB-231细胞,平均转染效率为80%.RT-PCR、Western blot结果显示,稳定转染重组质粒后MDA-MB-231细胞EIF4E及VEGF-C mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05),抑制率分别为79.00%、67.90%(EIF4E)和77.01%、62.94%(VEGF-C).免疫细胞化学染色法显示重组质粒组EIF4E及VEGF-C蛋白表达均受到明显抑制(P<0.05).结论:靶向EIF4E的shRNA不仅能有效沉默乳腺癌细胞MDA-MB-231中EIF4E的表达,且能抑制VEGF-C的表达,提示EIF4E可能参与诱导乳腺癌细胞VEGF-C的表达,而EIF4E-shRNA可能成为抑制乳腺癌淋巴管生成的一种新的有效手段.     

超声微泡介导pGPU6/Neo质粒转染神经干细胞的实验研究

目的 探讨超声微泡介导pGPU6/Neo 质粒转染神经干细胞(NSCs)的效率及可行性.方法 以一定能量的超声介导质粒转染大鼠NSCs,分为:空白组、质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组,并按不同转染条件分为亚组.转染48 h后荧光显微镜观察转染效率,台盼蓝染色法检测细胞活性.结果 最优参数为声强1....     

miR-197靶向调节CD82对结肠癌细胞侵袭转移的影响

【摘要】 目的 探讨下调microRNA-197 (miR-197)对结肠癌HCT116细胞侵袭转移能力的影响及其作用机制。方法 将对数生长期HCT 116细胞随机分为miR-197反义寡核苷酸（inhibitor）组、无义序列阴性对照（NC）组、空白对照（Mock）组,采用脂质体介导转染法,将miR-197反义寡核苷酸（miR 197 inhibitor）转染HCT116细胞。运用荧光定量PCR (qRT-PCR)检测miR-197的表达水平;通过生物信息学预测miR-197靶基因,应用Western blot法检测CD82蛋白的表达;采用transwell小室实验检测HCT116细胞的侵袭、迁移能力的改变。结果 miR-197反义寡核苷酸转染HCT116细胞后,inhibitor组miR-197的表达较NC组和Mock组明显降低(P＜0.05);下调miR-197的表达后,inhibitor组的CD82蛋白表达较其余两组显著增加(P＜0.05);转染miR-197反义寡核苷酸的HCT116细胞的侵袭与迁移能力inhibitor组较NC组、Mock组均降低 (P＜0.05)。结论 下调结肠癌HCT116细胞中miR-197的表达能抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,其机制可能与其靶点CD82表达增加有关,这将为结肠癌的治疗提供新的靶点。     

昏迷且气管切开术后病人留置胃管方法的改进

[目的]探讨昏迷且气管切开术后病人留置胃管方法的改进。[方法]将100例昏迷且气管切开术后留置胃管病人随机分为观察组60例和对照组40例,对照组采用传统的留置胃管方法,观察组采用留置胃管改良法。[结果]观察组病人一次置管成功率高于对照组,置管后24h内误吸率低于对照组(P<0.05)。[结论]改良留置胃管方法可提高一次置管成功率、降低置管后24h内误吸率,效果优于传统的留置胃管方法。     

虚拟现实技术对卒中后失语患者语言功能的疗效观察

[摘 要] 目的 观察虚拟现实技术对卒中后失语患者语言功能的影响。方法 将60例患者随机分为两组，对照组采用语言训练；观察组在对照组基础上给予虚拟现实技术干预。通过对两组患者干预前后美国国立卫生院神经功能缺损评分(NIHSS评分)及应用西方失语成套测验法(western aphasia battery,WAB)评定出失语商(aphasia quotient,AQ值)及WAB量表中四个方面(自发言语、听觉理解、复述、命名)的评分情况,来比较两组疗效。结果 治疗后两组NIHSS评分较治疗前均降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),观察组NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗后两组WAB量表中四个方面及AQ值的评分较治疗前均显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05),其中观察组的AQ值及听觉理解、复述、命名三方面评分较同期对照组有提高(P＜0.05)。结论 虚拟现实技术能有效改善脑卒中后失语患者的临床症状，并促进语言功能的恢复。     

miR-206抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞Cdc42蛋白表达及其对细胞骨架的影响

目的探讨miR-206对MDA-MB-231乳腺癌细胞Cdc42表达的调控及对细胞骨架的影响。方法采用Li-pofectamineTM2000转染miR-206进入MDA-MB-231细胞,48h后Western blot检测转染后乳腺癌细胞Cdc42、MMP-2和MMP-9蛋白质表达。用免疫荧光显微镜观察细胞丝状伪足的改变,进一步用侵袭迁移实验检测转染前后细胞侵袭力和迁移力的变化。结果Western blot检测Cdc42、MMP-2和MMP-9在转染前后的表达结果,其条带灰度值与阴性对照组相比明显下降(P<0.05);细胞免疫荧光计数每个细胞平均丝状伪足数,空白对照组为(14.99±5.53),表皮生长因子(EGF)组为(23.59±3.92),miR-206转染组为(9.45±3.59),miR-206+EGF组为(11.77±2.85)。与空白对照组和EGF组比较,miR-206转染组或miR-206+EGF组细胞丝状伪足明显减少(P<0.05)。侵袭实验结果显示,小室膜下的细胞数量空白对照组为(311.7±23.5),miR-206转染组为(65.0±13.9),二者差异有统计学意义(P<0.01)...     

尿酸利仙含药血清对H2O2所致内皮细胞损伤的影响

目的:观察尿酸利仙含药血清对浓度为100μmol/L(简写为μM)H2O2诱导的人血管内皮细胞(Endothelial cell of vessels,ECV)损伤的影响.方法:用MTT法测定终末浓度为100μMH2O2对不同浓度的尿酸利仙含药血清及正常人血清预处理的ECV存活力的影响.结果:与同浓度正常人血清预处理的H2O2组相比,1%、5%浓度的含药血清加H2O2组能减轻100μMHO诱导的损伤,而10%浓度的含药血清加H2O2组能基本消除H2O2的损伤.不同浓度的合药血清组对未与H2O2接触的ECV存活力无影响.结论:尿酸利仙含药血清能拮抗H2O2对ECV的损伤,起保护ECV的作用.