实验性大鼠脑损伤后脑组织中肿瘤坏死因子α基因表达的变化

目的:观察闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子αmRNA表达变化,探讨对脑组织的影响。方法:实验于2004-09/2005-03在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室神经分子生物学实验室进行,选择SD大鼠72只,随机分为实验组66只和对照组6只,实验组采用Marmarou法制备闭合性颅脑损伤模型,对照组不做任何处理。实验组又分为脑损伤后30min,1,3,9,12和1,2,3,4,5,6d11个时间点,每个时间点6只。应用反转录多聚酶链反应检测脑损伤后不同时间点脑组织中肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果:72只大鼠全部进入结果分析。对照组未见肿瘤坏死因子α表达实验组损伤后30min及1h组与对照组无明显差别,9h～5d明显增加,12h～3d达到高峰,6d后开始下降。结论:大鼠闭合性脑损伤后脑组织肿瘤坏死因子αmRNA表达水平增加,是加重继发性脑损伤的重要因素。     

木犀草素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的神经保护作用

目的：探究木犀草素（Lut）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠是否具有神经保护作用及其作用机制。方法：将7日龄新生大鼠分为假手术组、模型组（HIBD组）和Lut治疗组（HIBD+Lut组）。用Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型。HIBD+Lut组在造模后即刻通过腹腔注射给予50 mg/kg Lut,连续3 d,模型组和假手术组同时腹腔注射等体积生理盐水。3 d后,用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色评估脑梗死范围;用干/湿重脑含水量法评估缺血脑半球的脑水肿情况;用苏木精-伊红（HE）染色以及原位末端转移酶标记（TUNEL）和神经元核抗原（NeuN）荧光双标共定位法观察缺血脑半球海马和皮质中神经元损伤情况;用商用试剂盒检测缺血脑半球中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）水平;用Western blot法检测缺血脑半球的海马和皮质中核因子E2相关因子2(NRF-2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达水平。取35日龄大鼠,用水迷宫实验评估大鼠的认知功能情况。结果：与假手术组比较,HIBD组大鼠脑梗死、脑...     

亚硝酸盐暴露致雄性小鼠生殖毒性的探讨

目的 探讨亚硝酸盐暴露对雄性小鼠生殖毒性的分子机制。 方法 36只2月龄健康雄性小鼠,随机分为对照组(生理盐水）、低剂量组（60 mg/kg）和高剂量组（120 mg/kg）,每组12只进行亚硝酸盐灌胃3个月,观察小鼠的生长状况,HE染色法观察睾丸组织病理变化,免疫荧光和Western blotting方法分析检测睾丸组织细胞增殖与凋亡情况及DNA甲基化、组蛋白去乙酰化相关酶的表达情况。 结果 亚硝酸盐暴露组小鼠较对照组小鼠体重增加缓慢,睾丸指数降低（P<0.01）,形态发生病理性改变;亚硝酸盐暴露组小鼠睾丸组织细胞增殖较对照组明显减少,细胞凋亡较对照组明显增加（P<0.01）;同时DNA甲基化和组蛋白去乙酰化水平高于对照组（P<0.01）,且均具有剂量依赖性。 结论 亚硝酸盐暴露通过抑制雄性小鼠生长发育及睾丸生精细胞增殖,诱导睾丸生精细胞凋亡,造成雄性生殖毒性;DNA甲基化及组蛋白去乙酰化水平升高,提示表观遗传学可能参与了亚硝酸盐暴露对雄性生殖系统的损伤过程及调控机制。     

髂骨螺钉骨盆置钉方法的临床解剖研究

目的 明确经髂后上棘植入髂骨螺钉的角度参数,对髂骨螺钉置入的可行性以及安全性进行全方位的探讨,为研制适合国人的髂骨钉提供参考数据.方法 采用18具防腐骨盆标本,对骨盆周围软组织仔细剔除.测量的数据有：①Sl椎弓根观测与测量.②采用该研究确立的进钉方法用骶骨钉治疗18例骨盆后环损伤患者,随访追踪其治疗效果.结果 （1）S1椎弓根测量结果：①椎弓根高（20.2±2.3）mm;②椎弓根宽（27.7±2.0）mm;③椎弓根中心至进针点距离（49.1±3.6）mm;④S1椎体对侧前皮质至进针点距离（86.5±3.8）mm;⑤坐骨大切迹上方（41.8±3.4）mm,髂后下迹前方（24.6±2.9）mm为其进针点;⑥垂直于髂骨翼后外侧面,向后侧倾斜（7.7±3.8）°,然后向尾端倾斜（7.1±2.3）°为其进针方向.（2）临床应用评价：18例标本中共放置19枚骶骨钉,术后X线拍片复查对比见骶骨钉位于骶1椎体和弓根内,位置良好,骨盆对位对线良好.结论 ①选长为75 mm骶髂关节螺钉固定经S1椎弓根水平为适宜;②骶髂关节螺钉固定经S1椎弓根水平的植入点位于髂后下棘前方25 mm,坐骨切迹上方40 mm;③垂直于髂骨翼后外侧面的植入方向,然后向尾端倾斜5°～10°,向后侧倾斜5 °～10°.     

小鼠脊髓灰质发育过程中细胞迁移与血管之间的关系

目的:探讨小鼠神经系统发育过程中脊髓成熟神经元迁移与血管发育之间的关系。方法:不同年龄小鼠共计75只,应用免疫荧光及墨汁灌注的技术,标记小鼠胚胎E17到P30脊髓神经元和血管。结果:大约在胚胎E17左右,小鼠脊髓灰质内开始出现NeuN阳性的神经元,白质中神经元较少,且此时灰质和白质内血管分布均匀,管径一致,分支较少。随着年龄的增长,脊髓周围的神经元不断向内迁移,灰质内NeuN阳性的神经元数先增多后减少且血管体密度先增加后减小,而白质内的神经元持续减少,血管逐渐稀疏。P14以后,脊髓灰质内的血管密度明显高于白质内的血管密度。同时,研究中还发现部分NeuN阳性细胞紧贴着血管分布。结论:在小鼠脊髓的发育过程中,NeuN阳性细胞由脊髓周围逐渐向中心迁移,和脊髓灰质H形态的形成密切相关。同时,血管扮演着重要的角色,它可能通过与神经元的相互作用,引导神经元的迁移,并且为神经元的迁移提供路径和支架。     

选择性脊神经后根切断刺激对大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区c-Fos表达的影响

目的：将选择性脊神经后根切断作为刺激源，观察刺激后不同时间点大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区兴奋神经元细胞核中c—Fos蛋白表达的差异，探讨其对神经元活性和功能的影响。方法：实验于2004—02/06在郑州大学人体解剖学教研室完成。将成年Wistar大鼠64只随机分为脊神经后根切断组（n=24），假手术组（n=24）和正常对照组（n=16）。①模型制作：取背部正中切口，在&;#215;10手术显微镜下咬除腰1和腰2椎板，分离左侧腰3-6脊神经后根，并切断2mm。假手术组只暴露脊髓，不进行脊神经后根切断。②组织切片的制备：分别于术后1，2，6和12h相应的时间点，对各组动物进行心脏灌注后，取动物脊髓的腰膨大和脑干部，连续冠状切片，按Paxinos和Watson图谱进行组织核团定位。③免疫组织化学法染色后，在光镜下进行细胞计数和摄影。④细胞计数：光镜下对各切片的免疫阳性细胞进行计数,c-Fos蛋白阳性表达判定标准为细胞核染成深棕色，胞浆未染色，神经细胞无形态轮廓显示。每只大鼠观察腰膨大6张切片，分别计数左侧脊髓灰质板层Ⅰ～Ⅵ内c-Fos蛋白阳性表达细胞核的数量；观察网状结构抑制区和易化区切片6张，计数阳性标记细胞核数量。结果：脊神经后根切断组动物在手术后有2只死亡，随即进行了补充，纳入最后分析的动物为24只；假手术组动物24只，正常对照组动物16只，全部进入统计分析。①各组大鼠左侧腰髓3-6灰质板层Ⅰ～Ⅵ c—Fos的表达：脊神经后根切断组脊髓损伤后1，2，6，12h时间点均有明显表达，主要集中在Ⅰ～Ⅲ板层；假手术组在1，2，6h有少量表达；对照组在各个时间点基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。②各组大鼠右侧脑干网状结构c—Fos的表达：在抑制区，各组各个时间点均无明显表达。在易化区，脊神经后根切断组可见大量c-Fos蛋白阳性细胞表达，假手术组有散在细胞表达，对照组基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。结论：本实验观察到选择性脊神经后根切断可引起大鼠同侧腰髓灰质后角和对侧脑干网状结构易化区c—Fos的大量表达，说明脊神经后根切断和网状结构易化区神经元功能的改变存在着密切的联系。结合易化区的功能，推测脊神经后根的切断改变了网状结构抑制区和易化区神经元的活性状态，从而通过网状结构的传出纤维影响各个运动核团，降低了相应核团的兴奋性，从而缓解了痉挛的过程。     

胸锁乳突肌应用解剖学研究

了解胸锁乳突肌和副神经的解剖关系及在痉挛性斜颈中的作用,为手术治疗痉挛性斜颈的切口 和方法提供解剖依据。方法：观测活体成人男女各１００名例胸锁乳突肌长度、宽度,标本６５具（男３５具,女３０具） 该肌长、宽和厚度及其周围结构。结果：见乳突尖向胸锁乳突肌前缘４ ｃｍ（上 １／４下 ３／４交点）和向下至后缘５ ｃｍ （上中１／３交点）处连线深面有副神经（８０％±１５％）,该处是切断胸锁乳突肌及其副神经肌支的最佳部位之一。二腹 肌后腹深面为高位结扎切断副神经点,若再向上易伤颈内静脉。在胸锁乳突肌深面的副神经最大横径为（２．３± ０．５）ｍｍ。结论：沿副神经的体表投影线,设计出和投影线相应的手术切口,切断副神经和部分胸锁乳突肌是治疗痉 挛性斜颈的较好部位。     

腰骶部脊神经后根选择性切断术治疗痉挛性脑瘫的应用解剖 …

目的 通过对腰骶部脊神经形态及周围结构的应用解剖详细观测,以寻求一种对脑瘫双下肢痉挛的治疗既能使肢体运动功能改善快,且手术创伤小,发生并发症亦少的手术方式。方法 在手术显微下操作及解剖观测儿童标本４０具,成人标本６０具的腰骶部脊神经根及周围结构。     

大鼠闭合性脑损伤后星形胶质细胞的形态及GAP-43、ET-1 mRNA表达的变化

目的:探讨闭合性脑损伤后脑组织星形胶质细胞(Ast)形态学变化和生长相关蛋白(GAP-43)、内皮素-1(ET-1)mRNA表达的变化.方法:78只大鼠随机分为12个损伤组和1个假损伤对照组,每组6只.损伤组制备Marmaruu脑损伤模型.各组分别于伤后0h、0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、6 h、12 h、36 h、48 h、60 h、66 h、72 h断头取脑,在脑干损伤灶周围取部分脑组织,常规固定切片HE染色,胶质纤维酸性蛋白免疫组化染色结合计算机彩色图像分析技术观察分析Ast形态,RT-PCR法检测GAP-43及ET-1 mRNA.结果:闭合性脑损伤后0.5 h Ast反应性肿胀最明显,以后随着时间的延长Ast反应性肿胀程度降低、肿胀Ast的数目减少.伤后6～72 h脑组织GAP-43 mRNA及ET-1 mRNA均较假损伤对照组增高(P＜0.01).结论:GAP-43及ET-1在脑损伤后血脑屏障损害的病理生理过程烫中起重要作用.     

培哚普利对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨培哚普利（perindopril)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠28只，随机分为缺血组（对照组）、再灌注组与perindopril组，观察心脏活动变化，测定动脉血及心肌组织中肾素活性与血管紧张素－Ⅱ含量，心肌脂质过氧化代谢指标。结果：①与对照组（49％）相比，再灌注组室性心率失常发生率（75％）较高（P＜0．01），动脉血及心肌组织中肾素活性和血管紧张素Ⅱ含量均升高，心肌丙二醛含量升高，心肌组织中谷胱苷肽过氧化物酶活性下降；②与再灌组相比，perindopril组性心率失常发生率（33％）明显降低（P＜0．01）；动脉血及心肌组织中肾素活性和血管紧张素Ⅱ含量均下降，而以动脉血肾素活性降低为主（P＜0．01）；心肌丙二醛含量降低，心肌组织中谷胱苷肽过氧化物酶活性明显升高（P＜0．01）。结论：心肌缺血再灌注损伤可能与肾素活性增高、血管紧张素Ⅱ含量增高的脂质过氧化有关,perindopril对缺血再灌注心肌有保护作用。