维生素C对糖尿病肾病大鼠Ⅳ型胶原α1mRNA表达的影响

目的：观察维生素C对糖尿病肾病大鼠Ⅳ型胶原α1mRNA表达及肾脏功能的影响.方法：实验于2004-01/04在南华大学动物部完成.大鼠预养1周后,空腹12 h,腹腔注射60mg/kg链尿佐菌素-柠檬酸钠缓冲液,对照组注射等量柠檬酸钠缓冲液,依据72 h后尿糖 ～ ,静脉采血测血糖≥16.7 mmol/L,确定建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型.将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和维生素C组,保持大鼠血糖波动在25 mmol/L左右,持续16周.观察治疗期间及治疗后大鼠的一般状况、血糖、尿素氮、血肌酐,内生肌酐清除率、24 h尿蛋白排泄率,原位杂交检测肾组织Ⅳ型胶原α1基因表达.结果：30只SD大鼠实验过程中无死亡,全部纳入结果分析.①大鼠体质量较正常对照组明显下降,尿量增加,血糖升高,差异有显著性意义（t=4.945,3.779,P＜0.05）,治疗后维生素C组与糖尿病组相比,体质量、肾质量/体质量有显著提高（t=2.927,3.032,P＜0.05）.②大鼠血清尿白蛋白排泄率、血肌酐、尿素氮较正常对照组明显升高,内生肌酐清除率下降,有显著性差异（t=4.113,3.1251,2.798,P＜0.05）,糖尿病组与维生素C组相比,尿白蛋白排泄率、血肌酐、尿素氮明显升高,内生肌酐清除率下降（t=2.875,2.994,3.102,P＜0.05）.③与正常对照组相比,肾小球血管细胞外基质Ⅳ型胶原α1基因表达显著上调,经灰度值测定两组间差异有显著性意义（P＜0.05,t=4.766）,治疗后维生素C组肾组织着色浅淡稀疏,与糖尿病组相比Ⅳ型胶原α1基因相对表达明显下调（t=2.879,P＜0.05）.结论：维生素C无降糖作用,但具有确切的肾脏保护作用.     

microRNAs与ABC转运蛋白介导的肿瘤多药耐药研究进展

目的回顾ABC转运蛋白与肿瘤耐药的研究现状,探讨miRNA在逆转肿瘤耐药过程中的作用机制。方法应用PubMed和CNKI期刊全文数据库检索系统,检索2010-01-01-2014-05-20的相关文献,以"ABC转运蛋白、miRNA和多药耐药"为关键词。纳入标准:1)ABC转运蛋白的表达水平与肿瘤耐药;2)miRNA对ABC转运蛋白表达水平的调控;3)miRNA对肿瘤细胞药物敏感性的影响,根据纳入标准符合分析的文献34篇。结果大多数癌症患者使用一种化疗药物治疗后,肿瘤细胞可能因为种种原因,不仅对该药产生耐药,而且对多种结构不同和作用机制完全不同的其他药物也产生交叉耐药。研究表明,在多药耐药导致肿瘤化疗失败的众多原因中,ABC转运蛋白过表达是导致肿瘤多药耐药的主要原因之一。在耐药肿瘤细胞当中高表达的ABC转运蛋白主要有乳腺癌耐药蛋白ABCG2,多药耐药相关蛋白ABCC1,P-糖蛋白ABCB1,这些蛋白采用ATP水解的能量将细胞内药物泵出细胞外,从而降低细胞内药物的浓度,使细胞产生耐药性。miRNA能与ABC转运蛋白mRNA的3′UTR结合,使mRNA降解或抑制其翻译,导致目标蛋白的表达受到抑制,从而增加肿瘤细胞的药物敏感性,逆转由ABC转运蛋白过表达引起的肿瘤多药耐药。结论 miRNA可以逆转由ABC转运蛋白家族高表达所引起的肿瘤耐药,这为肿瘤多药耐药的研究提供了新的思路。     

成人冠状动脉左前降支粥样硬化斑块中检测出肺炎衣原体

为了探索肺炎衣原体感染和冠状动脉粥样硬化之间的关系、利用肺炎衣原体主要外膜蛋白基因上的保守序列设计的3条引物，通过多聚酶链反应检测32例冠状动脉左前降支粥样硬化斑块以及7例正常冠状动脉左前降支中肺炎衣原体。结果发现，32例有粥样硬化斑块的冠状动脉左前降支中有14例多聚酶链反应阳性．阳性率为43．75％，7例正常冠状动脉中无一例阳性，阳性率为0％。结果提示肺炎衣原体在有粥样硬化冠状动脉和正常冠状动豚中存在显著差异。     

药学专业学生实践教学模式的探讨

为适应社会发展的需要,培养实用型药学人才,加强药学专业学生的实践教学,开展药学实践教学的改革势在必行。本文结合目前药学专业人才就业现状,分析了实践教学在药学人才培养中的重要性,提出药学实践教学改革的举措:阶段性全面推进实践教学,完善考核监控体系与激励机制,加强实践基地的建设,促进师资队伍建设。     

miR-1290与RASAL2基因靶向关系的探索

目的通过构建RASAL2 3′-非翻译区(3′-UTR)双荧光素酶报告载体,探索RASAL2与非编码核糖核酸(ncRNA)miR-1290的靶向调控情况。方法借助在线数据库Targetscan预测miR-1290与RASAL2结合位点;利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增RASAL2基因3′-UTR序列,并以GV272为载体将其连接,分别构建野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR和突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR荧光素酶报告基因重组质粒;并将miR-1290及相应阴性对照分别与这两种重组质粒共转染到293T细胞中,通过检测各组荧光素酶活性,探索miR-1290与RASAL2基因的结合情况。结果酶切和测序数据表明:野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR及突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;相较于miR-1290与突变型GV272-RASAL2-mut 3′-UTR共转染组,miR-1290与野生型GV272-RASAL2-wt 3′-UTR共转染组的荧光素酶活性无明显变化(P＞0.05)。结论成功构建了RASAL2 3′-UTR的双荧光素酶报告基因载体,但miR-1290不能与RASAL2结合,不能抑制其表达。     

基因芯片分析筛选BEL-7402与BEL-7402/FU细胞中的差异miRNA表达基因

目的:探讨2种肝癌细胞BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞中差异表达的miRNA并对其基因表达谱进行生物学信息分析.方法:采用TRIzol一步法提取BEL-7402细胞及BEL-7402/FU细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子Hy3标记的cDNA探针,与基因芯片杂交;采用Genepix Pro 6.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,然后以差异为2倍的标准来确定差异表达基因.结果:在333个基因表达谱的筛选中,发现有2个基因表达水平显著上调,331个基因表达水平显著下调.结论:miR-122,miR-195等基因组对表达肝癌细胞耐药基因表达谱有显著的影响,可能参与肝癌耐药的发生、发展.     

MicroRNA靶位点单核苷酸多态性与肿瘤及其药物敏感性的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA。MiRNA通过与蛋白编码基因mRNA的3’非编码区互补配对,影响mRNA的稳定和抑制蛋白质的合成,从而发挥转录后调控作用。研究表明miRNA靶位点单核苷酸多态性可能会通过影响miRNA对靶基因的负调控,参与肿瘤的发生、发展及其耐药。     

尼群地平对猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察不同剂量的尼群地平对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：不同剂量的尼群地平对平滑肌细胞增殖的抑制作用汪样，最佳剂量为２．５μｇ／ｍｌ     

Ghrelin抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的机制

目的:研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的抑制作用。方法:采用Ho-echst 33258荧光染色、Western blot法和硝酸还原酶法研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用。结果:Hoechst 33258染色荧光检测发现,与正常对照组相比,ox-LDL组HUVEC中出现大量凋亡细胞,凋亡率明显增加,与ox-LDL组比较,ghrelin预处理组HUVEC细胞凋亡率呈剂量依赖性下降;Western blot检测结果表明,与对照组比较,ox-LDL可上调内细胞中Caspase-3表达,而经过ghrelin预处理后能剂量依赖性降低Caspase-3蛋白表达;硝酸还原酶法结果显示,ox-LDL可显著减少内皮细胞培养液中NO含量,经过ghrelin预处理后,ghrelin能剂量依赖性增加NO含量。结论:ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡有拮抗作用,可能与其抑制ox-LDL引起的细胞内Caspase-3蛋白水平升高及NO合成下降有关。     

地方高校保障专业学位研究生培养质量对策探析

专业学位研究生教育进入快速发展阶段,对培养质量提出了更高的要求.结合地方大学的办学定位和条件,重点探析培养方案、导师队伍和培养基地三个重点环节.把握专业学位和学术学位研究生教育的不同特点,彰显培养方案的区分度;理清校外导师职责,构建校内外导师结合机制;明确培养基地的遴选条件,采取灵活的建设模式,努力维护稳定运行,以切实保障地方大学专业学位研究生培养质量.