宫颈鳞癌组织中MMP-9和VEGF的表达与微血管密度相关性研究

目的探讨金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法选择手术切除的宫颈鳞癌组织标本47份作为肿瘤组,宫颈上皮内瘤样病变(CIN)标本35份作为CIN组,正常宫颈组织(NCE)21份作为NCE组,采用免疫组化SP法检测各组MMP-9和VECF的表达和微血管密度(MVD)(CD34标记)。结果肿瘤组、CIN组中MMP-9和VEGF阳性率和MVD值均明显高于NCE组(P<0.05),肿瘤组明显高于CIN组(P<0.05);MMP-9和VEGF阳性表达均与肿瘤组的临床分期、组织分化程度、有无淋巴结转移相关,并且在宫颈鳞癌组织中两者表达呈正相关;肿瘤组中MMP-9和VEG;F阳性者的MVD值明显高于其阴性者(P<0.05),MMP-9和VEGF的表达与MVD值存在显著性差异(P<0.05)。结论 MMP-9和VEGF在宫颈鳞癌发生、发展中可能起重要作用,MMP-9和VEGF及MVD值与宫颈鳞癌的浸润转移密切相关,可作为预后的判断指标。     

阿帕替尼单药治疗晚期恶性肿瘤的疗效及不良反应分析

目的:分析阿帕替尼（apatinib,YN968D1）单药治疗晚期恶性肿瘤的疗效及不良反应。方法:检索Embase、PubMed、中国知网数据库,使用RStudio-3.5.1对纳入资料进行累积率的统计分析。结果:共检出文献1 260篇。根据纳入及排除标准,最终纳入194篇,包括118篇中文文献和76篇英文文献,总病例数为6 740例。结果显示,阿帕替尼单药治疗晚期胃癌、肺癌、乳腺癌、大肠癌、肉瘤的6个月PFS累积生存率分别为15%、26%、31%、24%、50%;单药治疗晚期肺癌、乳腺癌、大肠癌、肉瘤的12个月OS累积生存率分别为27%、38%、30%、45%。阿帕替尼常见不良反应有高血压、手足综合征和蛋白尿,累积发生率分别为39%、32%、28%。结论:阿帕替尼用于晚期恶性肿瘤的二线及以上治疗,具有客观有效性及安全性。     

miR-132在食管癌细胞系KYSE150 中对靶基因FOXA1的调控作用

 目的构建miR-132真核表达载体和融合靶基因FOXA1表达载体,在食管癌细胞KYSE150中验证miR-132对靶基因 FOXA1的调控作用。方法根据miR-132序列在基因组中的位置及其上下游序列,以EC9706细胞基因组DNA为模板,扩 增包含miR-132前体序列,克隆到pMD18-T Simple中,经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后亚克隆到质粒pcDNA3.1(+)上;通过 Real-time PCR检测转染重组表达载体pcDNA3.1-miR-132的KYSE150成熟miR-132的表达水平。用生物信息学软件对 miR-132的靶基因进行预测,将候选靶基因FOXA1的3′UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基 因检测分析miR-132对靶基因FOXA1的调控作用。将pCDNA3.1-miR-132表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过 Western blot检测miR-132对FOXA1蛋白表达的影响。结果成功构建了miR-132真核表达载体,Real-time PCR验证表 明pCDNA3.1-miR-132在KYSE150细胞中能够显著地过表达成熟miR-132。生物信息学预测FOXA1可能是miR-132的靶基 因。双荧光素酶报告基因分析表明miR-132能够作用于FOXA1的3′UTR。Western blot进一步证实miR-132能够抑制 内源性FOXA1蛋白的表达。结论FOXA1是miR-132直接调控的靶基因。     

钩针松解复合硬膜外阻滞联合脊柱手法综合治疗腰椎间盘突出症

腰椎间盘突出症(lumbar interverte brldisc sprotrusion,LIDP)是一种常见疼痛性疾病。虽然LIDP的非手术治疗方法多种多样,然而如何选择适宜的疗法并达到最佳治疗效果仍是当前LIDP治疗研究的热点。有报道显示80%～85%的LIDP病例经非手术治疗可治愈或暂时缓解[1],本研究探讨钩针松解复合硬膜外阻滞(小关节内侧缘入路)联合脊柱手法治疗LIDP的效果,旨在进一步提高基层医院LIDP的诊疗质量。     

has-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

目的:构建hsa-miR-223真核表达载体,并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin(ARTN)的调控作用.方法:以基因组DNA为模板,RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列,并将其克隆到载体pCD?NA3.1(+)上,通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达.根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和PicTar对hsa-miR-223靶基因进行预测,将靶基因ARTN的3'UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223 对靶基因ARTN 的3'UTR 区的调控作用.将pCDNA3.1-miR-223 表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过Western blot检测对ARTN蛋白表达的影响.结果:成功构建hsa-miR-223表达载体pCDNA3.1-miR-223.实时定量PCR 验证表明pCDNA3.1-miR-223 在人胚肾HEK293 中能够明显地过表达成熟miR-223.生物信息学预测ARTN 是hsa-miR-223的靶基因,并构建融合ARTN的3'UTR区表达质粒pMIR-ARTN,在此基础上对ARTN的3'UTR"种子区"进行定点突变.双荧光素酶报告基因分析表明hsa-miR-223能够作用于ARTN的3'UTR.Western blot法进一步证实ARTN是miR-223的靶基因.结论:hsa-miR-223作用于ARTN的3'UTR可在转录后水平上调控ARTN蛋白的表达.     

宫颈鳞癌组织MMP-9和Ezrin的表达与微血管密度的相关性

目的探讨金属蛋白酶-9（MMP-9）、埃兹蛋白（Ezrin）在宫颈上皮内瘤样病变（CIN）和宫颈鳞癌（SCC）中的表达及其相关性。方法选择手术切除的SCC组织标本47份、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）标本35份,正常宫颈组织（NCE）21份,采用免疫组化SP法检测各组MMP-9、Ezrin的表达和微血管密度（MVD）（CD44标记）。结果SCC、CIN组中MMP-9、Ezrin阳性率和MVD值均明显高于NCE组（P〈0.05）,SCC组明显高于CIN组（P〈0.05）;MMP-9、Ezrin阳性表达均与SCC组的临床分期、组织分化程度、有无淋巴结转移相关,并且在SCC组中两者表达呈正相关;SCC组中MMP-9、Ezrin阳性者的MVD值明显高于其阴性者（P〈0.01）,在有无淋巴结转移者中MMP-9、Ezrin阳性者的MVD值差异有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9阳性者的MVD值与分化程度有关（P〈0.05）。结论 MMP-9、Ezrin在SCC发生、发展中可能起重要作用,MMP-9、Ezrin及MVD值与SCC的浸润转移密切相关,可作为预后的判断指标。