rr－烯醇化酶单克隆抗体双位点夹心ELISA的建立和临床应用

在自制的８株烯醇化酶（ＮＳＥ）ＭｃＡｂ中，经方阵排列滴定筛选出无交叉反应且效价较高的２株ＭｃＡｂ，用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）为标记物，建立了ＮＳＥ－ＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ。经直线回归方程、取代试验、阻断试验检验，该标准曲线近似直线关系，可测定标本中ＮＳＥ的范围为５～５０μｇ／Ｌ。对２３例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）（Ⅰ和Ⅱ期４例、Ⅲ期７例、Ⅳ期１２例）．３２例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２２例肺良性疾病（ＢＰＤ）和３６例健康体检者血清ＮＳＥ进行了测定，ＳＣＬＣ的阳性率为８２．６％（１９／２３），其中Ⅰ和Ⅱ期为５０％（２／４）；Ⅲ期为８５．７％（６／７），Ⅳ期为９１．７％（１１／１２）；ＮＳＣＬＣ的阳性率为３．１％（１／３２），ＢＰＤ阳性率为４．５％（１／２２）。ＳＣＬＣ的显著高于ＮＳＣＬＣ和ＢＰＤ（Ｐ＜０．０１）；ＳＣＬＣ的Ⅳ和Ⅲ期显著高于Ⅰ和Ⅱ期（Ｐ＜０．０１）。２３例ＳＣＬＣ经综合治疗后，完全缓解组和部份缓解组血清ＮＳＥ水平非常显著低于进展组和无改变组（Ｐ＜０．０１）。本文研究结果证明，ＮＳＥＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ具有灵敏、特异和简便快速的特点，对ＳＣＬＣ的血清学诊断有较高的灵敏度和特异性，对ＳＣ     

人单克隆抗体的研究现状

自1975年kohler和Milstein成功地研制了具有定向特异性的单克隆抗体(简称单抗)技术以来,人们就意识到,制备人的单克隆抗体(人单抗)已为期不远了。人单抗可克服鼠类单抗用于人体之后所产生的各种弊端,为人类疾病的诊断、肿瘤的体内诊断与治疗、自身免疫性疾病与变态反应性疾病的治疗、体内稀有抗原的研究、药物的追踪等提供了理想的手段。各国学者为制备人单抗,探索了众多的     

雌三醇对电离辐射诱发淋巴细胞微核率的影响

本实验以雌三醇作为辐射预防药,予家兔肌注1mp/kg 48小时后,进行~(60)Co-γ射线照射300rad。结果显示雌三醇预防组淋巴细胞微核率明显低于对照组(p<0.01)。雌激素可减少电离辐射诱发淋巴细胞微核发生率是与其减轻电离辐射所引起的染色体损伤有关,雌激素可预防电离辐射对DNA分子损伤或可促进已损伤的DNA分子的修复,致使细胞增强对电离辐射抵抗力。由此可见,雌激素对辐射损伤具有良好的防护效果。     

抗人AFP－R－LCA McAb在裸鼠人肝癌模型中放免显像及治疗

放射性核素~（１３１）Ｉ标记的抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体（ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡ）ＭｃＡｂ，注入荷瘤裸鼠腹腔后，能在裸鼠人肝癌模型肿瘤区积聚，其放射性核素浓度是裸鼠肝脏的５．２倍；而~（１３１）Ｉ标记的正常小鼠ＩｇＧ（ｍＩｇＧ）及游离~（１３１）Ｉ却无肿瘤区积聚，且在荷瘤裸鼠体内呈均匀分布。~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ组γ照像均显示出裸鼠人肝癌的阳性定位。用~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ治疗裸鼠人肝癌，肿瘤生长受到明显抑制（８５．０％），优于~（１３１）Ｉ－ｍＩｇＧ及游离~（１３１）Ｉ（４６．０％、２０；１％，Ｐ＜０．０５）．结果表明：ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ对人肝癌细胞有较强的亲和力和特异性，有希望成为肝癌导向研究的理想载体。     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以医用尿激酶免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Fo和Ns-1骨髓瘤细胞进行3次融合,筛选到6株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂立瘤细胞系,分别为IUB_5、IUD_2、3UA_2、3UD_12、3UG_2和3UH_7细胞株,对其中IUB和IUD_2两个细胞株进行克隆化培养、冷冻、储存、复苏传代和染色体分析等处理,结果显示IUB_5和IUD_2确系BALB/C鼠脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合后获得的单个细胞的克隆。根据免疫双扩散法和ELISA方法鉴定,它属IgG_1和IgG_(2(?));其培养上清液的ELISA效价为10~(-2)～10~(-3),注入BALB/C×C_(57)第一代杂交鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。经高纯度的低分子量尿激酶检测后,确定是抗高分子量尿激酶的单克隆抗体。     

抗尿激酶单克隆抗体的研究——Ⅰ.分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用市售的尿激酶(UK),免癌BALB/c小鼠。取脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得六株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1UB_5、1UD_2、3UA_2、3UD_(12)、3UG_2、3UH_7。其中,1UB_5及1UD_2连续传代培养4个月以上,其培养液抗体的ELISA效价仍为10~(-2)～10~(-3)。两株细胞经扩大培养后,注入C_(57)×BALB/c杂交后的F_1代小鼠,诱生的腹水抗体效价为5×10~(-6)～10~(-7)1UB_5、1UD_2所分泌的抗体经ELISA鉴定,分属IgG_1和IgG2a。用高纯度的低分子量UK包被,ELISA检测后表明,两株细胞所分泌的为抗高分子量UK的McAb。 抗UK的McAb用于粗制品UK的纯化及监察某些肿瘤发生与发展的进一步工作正在进行之中。     

抗胰岛素的单克隆抗体

用猪胰岛素免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞 NS-1融合,获得两株分泌抗猪胰岛素单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为4B9和3B2。其中,以4B9细胞的抗体分泌能力最强。其培液抗体的 ELISA 效价为10~(-2)～10~(-3);注入同系小鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。其分泌抗体属 IgG_1亚类;对猪胰岛素的亲和常数(Ka)为5.86×10~9L/mole;与用 DNA 重组技术制备的人胰岛素,呈交叉反应。