乳腺癌组织中EGF和ALDH1A1的表达及其临床意义

目的 研究表皮生长因子(EGF)与乙醛脱氢酶(ALDH1A1)在正常乳腺组织及乳腺癌组织中的表达及意义,探讨EGF在乳腺癌干细胞演进过程中的作用.方法 采用RT-PCR和免疫组化方法分别检测24例正常乳腺组织和45例乳腺浸润性导管癌组织中EGF和ALDH1A1的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,乳腺癌中EGF与ALDH1A1的mRNA水平高表达,在正常乳腺组织中低表达或不表达,两组比较P＜0.01.免疫组化结果显示,EGF在正常乳腺与乳腺癌中的表达分别为20.8％和75.6％,ALDH1A1在正常乳腺与乳腺癌中的表达分别为16.7％与66.4％,乳腺癌中EGF与ALDH1A1蛋白水平表达明显高于正常组织(P＜0.01).EGF与ALDH1A1两者在乳腺癌中表达存在正相关(P＜0.05).EGF的表达与发病年龄、肿瘤大小、组织学分型、有无淋巴结转移、PR表达无相关性,与ER表达呈正相关(P＜0.01);ALDH1A1的表达与发病年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、ER、PR表达无相关性,与组织学分型呈正相关(P＜0.05).结论 EGF与ALDH1A1在乳腺癌组织中的表达高于正常乳腺组织,EGF与乳腺癌干细胞的发生发展关系密切.     

RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达。结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48h后细胞凋亡比例增加(P<0.01)。NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高。结论利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值。     

卵巢原始生殖细胞分化及其衍生肿瘤中Oct4、CD34、p63的表达

目的研究Oct4、CD34、p63在原始生殖细胞衍生肿瘤的表达及其与肿瘤分化的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测34例卵巢生殖细胞肿瘤及10例正常卵巢组织中Oct4、CD34、p63的表达。结果Oct4表达于无性细胞瘤和胚胎性癌,而在卵巢生殖细胞肿瘤的其他类型及正常卵巢组织中不表达(P<0·01)。CD34主要表达于卵黄囊瘤/内胚窦瘤,阳性率为81·3%,并且在卵黄囊瘤/内胚窦瘤的不同组织学形态间表达的差异有显著性(P<0·01)。p63主要表达于未成熟畸胎瘤,在卵巢生殖细胞肿瘤的其他类型及正常卵巢组织中不表达(P<0·01)。结论卵巢生殖细胞肿瘤中无性细胞瘤和胚胎性癌分化水平最接近于生殖母细胞至胚泡阶段。卵黄囊瘤CD34的分化表型与其组织学形态结构相关。Oct4、p63可分别作为进一步鉴别无性细胞瘤和未成熟畸胎瘤的标记物。     

乳腺浸润性导管癌免疫表型分化规律及临床意义

目的:探讨乳腺癌免疫表型分化规律及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测CK5、CK8及P63在136例乳腺浸润性导管癌中的表达,分析乳腺癌免疫表型分化规律及其与临床病理特征的关系。结果:CK5在乳腺浸润性导管癌中表达较弱,CK8在乳腺浸润性导管癌表达较强;109例(80.15%)乳腺浸润性导管癌呈现CK5-/CK8+腺腔表型,9例(6.62%)呈现CK5+/CK8-干细胞表型,15例(11.03%)呈现CK5+/CK8+混合表型,3例(2.21%)呈现CK5-/CK8-表型,且这种表达与患者的年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移以及临床分期相关;P63在乳腺浸润性导管癌中有11例(8.81%)呈现少量的肿瘤细胞阳性,并且主要表达于低分化的乳腺癌中。结论:CK5+/CK8+、CK5+/CK8-或P63+表型乳腺癌恶性程度高、预后差,免疫表型可作为评价预后的生物学指标。     

留学生病理学实验教学的实践与体会

针对留学生教学的特殊性，我们结合病理学实验课教学特点，对教学语言、教学准备和教学方法进行了有益的改进和探索，从中得到一些启发与经验。     

睾丸生殖细胞肿瘤干细胞

Till和Mulloch(1961)最先从血液中发现各种血液细胞谱系共同的干细胞.此后,陆续从各种成体组织及早期胚胎组织中识别及分离出干细胞.干细胞的特征是产生能分化为各种不同形态功能类型的子代细胞,并能通过自我更新而保持其多能性.Lapidot等(1994)的实验证实人类急性髓性白血病的单个白血细胞移植于SCID小鼠后可以繁殖成急性髓性白血病.     

睾丸生殖细胞肿瘤发病学

睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumors,TGCT)曾是一种很少见的疾病,至上世纪下半叶,发病率明显增加,才日益引起人们的关注.此类肿瘤,除精母细胞性精原细胞瘤以外,临床上主要见于青年男性,但病起始于胎儿发育阶段.TGCT发病率在种族间的差异十分明显,有色人种远低于白种人,但新西兰非白种人的Maoris人发病率与白种人相似;而同属高加索人中的北欧居民发病率却呈明显区域性差异,丹麦与挪威高而芬兰明显低[1-3].     

Oct-4与生殖细胞及其肿瘤的关系

Oct-4是由Pou5fl基因编码产生的,含POU（Pit-Oct-Unc）结构域的转录因子家族中的一员。它通过结合含ATGCAAAT的八聚体结构域而活化相应靶基因,激活或抑制干细胞分化过程中基因表型的转变。最新证据表明Oct-4为具有较强特异性的干细胞标志物,它参与胚胎发育过程中多向性分化的调节,不仅在多能性胚胎干细胞和原始生殖细胞中表达,而且在某些恶性生殖细胞肿瘤如精原细胞瘤／无性细胞瘤、胚胎性癌中也表达。Oct-4可以作为生殖细胞肿瘤中某些恶性类型的特异性标志物,以及对这些肿瘤进行靶向治疗的一个新靶点。     

纤维支气管镜检查中刷检及灌洗液对肺癌诊断的价值

[目的]探讨细胞学检查包括支气管刷片、灌洗液检查肺癌诊断中的诊断效价及应用价值。[方法]收集肺癌病例397例,纤支镜检查中分别采用活检、刷片及灌洗液取得组织和细胞学标本,制片作出病理诊断。[结果]诊断阳性率：组织学活检81.6%,纤支镜刷检66.8%,灌洗液29.2%。对比单独活检,活检结合刷检可以提高9.3%（P〈0.001）,活检结合灌洗液可提高6.5%（P〈0.001）,三者结合可将阳性率提高11.3%（P〈0.001）。分型准确度：刷检和灌洗液显著低于组织活检（P〈0.05）,三者对小细胞癌的诊断准确度最高。[结论]纤支镜刷片、灌洗液与组织活检结合,可提高肺癌诊断阳性率,提高分型准确度,在肺癌诊断中具有极其重要的作用。     

睾丸生殖细胞肿瘤类型及起源

Skakkebaek(1972)首先发现睾丸原位癌(CIS)/小管生殖细胞肿瘤未定类型(IGCNU).CIS/IGCNU是睾丸生殖细胞肿瘤(TGCT)除精母细胞精原细胞瘤以外各型共同的前驱病变,其来源很可能为原始生殖细胞(PGC)/早期生殖母细胞(gonocyte)的恶性转化.流行病学和表型免疫组化检测证据表明IGCNU是一种发生于胎儿期的先天性病变.PGCs及gonocytes在前减数分裂阶段具有胚胎干细胞样多能性分化潜能.