人IL-10真核表达载体的构建及其在体内外的高效表达

<正>白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)是一种多效细胞因子,在免疫调控中发挥了重要作用,其在病毒持续性感染中的作用也日益受到关注。有研究显示HBeAg阳性患者血清高水平的IL-10和IL-12与早期自发的HBeAg血清转换相关[1],也有研究结果显示IL-10与病毒感染的持续与清除相关[2]。IL-10在     

小鼠TIM-3原核表达载体的建立及多克隆抗体的制备与鉴定

目的:克隆小鼠TIM-3基因,构建原核表达载体,制备相应的多克隆抗体并初步鉴定。方法:以小鼠脾细胞总RNA为模板,用RT-PCR方法,扩增得到TIM-3基因编码区,构建pRSET-B-TIM-3原核表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;然后常规免疫家兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,用Western blot、免疫组化、流式细胞术检测抗体的特异性。结果:成功构建的原核表达载体pRSET-B-TIM-3在大肠杆菌中诱导后可以高效表达TIM-3蛋白;免疫获得的多克隆抗体经过ELISA检测,抗体效价为1∶320 000,经Western blot、免疫组化和流式细胞术等鉴定,抗体的特异性较好。结论:成功克隆出小鼠的TIM-3基因,构建了原核表达载体,制备的兔抗小鼠TIM-3多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。     

三种常见肝细胞系免疫相关分子的表达

目的探讨三种常见肝细胞系Huh7、HepG2、HepG2.2.15免疫相关分子的表达。方法提取三种细胞的RNA并逆转录合成cDNA,用PCR方法检测细胞因子及其受体、MHC分子的表达情况。结果三种细胞均能表达Ⅰ型干扰素及干扰素受体、IL-7、IL-15等细胞因子,也能表达HLA-A、HLA-B、HLA-DP、HLA-DR及非经典的CD1d、MICB等MHC分子及其相关基因,HepG2、HepG2.2.15表达MICA。三种细胞均不表达IL-4、IL-5、IL-6、IFN-γ等细胞因子。与内参相比,IL-7及IL-15、HLA-A等的表达在HepG2和HepG2.2.15之间存在一定的差异。结论三种肝细胞系能表达Ⅰ型干扰素及干扰素受体、IL-7、IL-15、HLA等一系列的免疫相关分子。     

影响慢性乙型肝炎病毒感染者临床结局的病毒学因素研究进展

慢性乙型肝炎患者临床结局受多种因素的影响,主要包括宿主因素和病毒学因素两大方面,其中病毒学因素包括HBVDNA载量,HBV基因型、HBV基因变异及HBV蛋白表达等。本文就影响慢性乙型肝炎病毒感染者临床结局的病毒学因素研究进展进行了介绍。     

甲状腺激素在老年人轻度认知障碍中的临床意义

目的研究甲状腺激素（TH）在老年人轻度认知障碍（MCI）中的意义,探讨激素分泌异常在MCI发病中的作用。方法用放免方法测定老年52例MCI患者和52例正常对照者的血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、血清游离甲状腺激素（FT4）、促甲状腺素（TSH）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、甲状腺微粒体抗体（TMAb）水平,并用简易智能精神状态量表（MMSE）进行临床智能精神检查评分。结果与对照组相比,老年MCI组患者血清FT3或FT4下降,而TSH、TGAb、TMAb升高（P〈0.05）,且给予甲状腺激素6个月治疗后,MMSE测试中MCI组治疗后与治疗前比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,日常生活能力量表（ADL）和汉密尔顿抑郁量表17项版（HAMD）测试中MCI组治疗后与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,提示老年MCI组患者的认知功能有所改善。结论甲状腺激素分泌异常是老年认知障碍的重要发病因素,甲状腺激素替代治疗可在一定程度上改善老年亚临床甲状腺功能减退导致的认知功能障碍。     

冬日失眠要"四调"

季节交替,很多人晚上睡不好.中医认为,失眠属"不寐病",与人体的心、脾、肝、肾功能失调相关.晚上11时至3时是肝与胆的时相,木旺则相火扰心,容易出现失眠.过度饮食,过食辛辣,损伤脾胃,导致"胃不和则卧不安";经常熬夜,耗伤精血,肝肾不足,虚火扰心亦致不寐.     

四种肝细胞系天然免疫相关分子的表达及HBV对其表达的影响

目的探讨四种肝细胞系Huh7、HepG2、HepG2.2.15和L02天然免疫相关分子的表达情况及HBV对其表达的影响。方法提取Huh7、HepG2、HepG2.2.15和L02四种肝细胞及转染后Huh7、HepG2和HepG2.2.15细胞mRNA,逆转录合成cDNA,采用PCR法检测天然免疫相关分子的表达情况。结果四种细胞均能表达TLRs家族的TLR1、TLR3、TLR4、TLR9,NLRs家族的NOD1和RLRs家族的RIG1等天然免疫相关分子;HepG2和Huh7转染HBV可复制性克隆后出现MDA5和A20的表达下调。结论四种肝细胞系均能表达一系列天然免疫相关分子,不同肝细胞系间表达存在一定的差异。HBV瞬时转染和稳定表达能不同程度地影响这些天然免疫相关分子的表达水平。