HPSE和Syndecan-1与人类早期复发性自然流产关系

目的 探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)和蛋白聚糖1(syndecan-1)在人类早期复发性自然流产绒毛组织中的表达及两者与复发性自然流产的关系.方法 采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测山西大同地区非意愿性正常妊娠者(35例)和早期复发性自然流产者(28例)绒毛组织中HPSE和syndecan-1的mRNA表达水平,分析探讨两者与自然流产关系.结果 HPSE mRNA在正常妊娠组表达的阳性率为85.71％(30/35),明显高于复发性自然流产组的57.14％(16/28),差异有统计学意义(P＜0.05);而在正常妊娠组syndecan-1 mRNA的阳性表达率为54.28％(19/35),明显低于复发性自然流产组的82.14％ (23/28),差异亦有统计学意义(P＜0.05);HPSE和syndecan-1蛋白表达呈负相关(r=-0.386,P＜0.01).结论 在复发性自然流产中HPSE的表达降低,导致降解细胞外基质能力下降,syndecan-1表达增高,影响胚泡植入,导致自然流产的发生.     

结核分枝杆菌药物作用机理及耐药机制研究进展

结核病（Tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）引起的慢性、严重致死性传染病，也是当下仅次于新冠病毒肺炎的第二大单一传染源致死原因。伴随着抗生素滥用和抗结核药物的不规范使用，多耐药（multidrug-resistant,MDR）、泛耐药（extensively drug-resistant,XDR）和全耐药（totally drug-resistant,TDR）结核病的出现已成为全世界范围内结核病疫情消灭的障碍。据世界卫生组织统计，我国仍是全球结核病高负担国家之一，也是MDR结核病流行严重的国家之一。传统药物已无法满足现阶段结核病的控制，抗结核药物新靶点的发现和新型抗结核药物的研发已迫在眉睫。本文对传统和目前新研发的抗结核药物的作用机制进行了阐述，着重介绍了已知耐药机制的新进展，以期为开发新的抗结核药物提供新思路，降低结核病对社会的危害。     

卵巢癌耐药细胞系A2780／TS紫杉醇体外化疗后耐药相关基因的表达

目的比较卵巢癌耐药与非耐药细胞系，紫杉醇体外化疗后部分耐药相关基因的表达差异。方法采用RT-PCR技术检测卵巢癌细胞系A2780与紫杉醇耐药细胞系A2780／TS部分耐药相关基因的表达差异。结果耐紫杉醇细胞株A2780／TS经紫杉醇处理后，细胞抑制率明显低于敏感细胞株A2780（P〈0．05）；A2780／TS的耐药指数（RI）约为3．650；G1、G2、S期细胞比例无明显改变（P〉0．05）；在检测的耐药相关基因中，A2780／TS中较其非耐药细胞中表达下降的有多药耐药蛋白（MDR-1）基因、P53，表达升高的有细胞色素P450181（CYP1B1）、凋亡抑制蛋白Survivin，无明显改变的有谷胱甘肽-S-转移酶（GST-Pi）、多药耐药相关蛋白（MRP-1）基因。结论在紫杉醇耐药及敏感细胞中，已知的耐药相关基因的表达差异很大，说明紫杉醇耐药机制是多因素、多通路相互复杂作用的过程，仍需要我们深入、全面、系统的研究、验证，才能最终转化为指导临床化疗方案的制定、有针对性的逆转耐药的方法。     

49例早发型重度子痫前期的临床分析

目的探讨早发型重度子痫前期的临床特点及治疗。方法对山西医科大学第一临床医学院妇产科2006-1~2008-12收治的213例重度子痫前期患者(其中早发型49例,即24~34孕周发病者;晚发型164例,即≥34孕周发病者)及其新生儿228例进行回顾性分析,观察指标包括一般情况、并发症、合并症及母婴结局。结果早发型重度子痫前期患者分娩孕周较晚发型早(P0.01)、治疗时间较晚发型长(P0.05),其临床症状及并发症/合并症较晚发型严重,母婴结局明显较晚发型严重,母婴结局明显较晚发型差。结论早发型重度子痫前期病情严重,围生儿预后不佳,应根据母胎情况,严格选择病例进行保守治疗,同时密切监测母胎病情变化。     

鸦胆亭上调miR-29a-3p抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移与侵袭

本研究主要探讨鸦胆亭(bruceantin,BCT)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的增殖、侵袭与迁移的抑制作用及其机制。采用MTT法检测BCT对NSCLC细胞株的细胞毒作用;采用集落形成、划痕和Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移与侵袭能力;Western blot及RT-qPCR实验分别检测与细胞增殖、迁移与侵袭等的相关蛋白及miRNA、mRNA的表达情况;利用基因预测网站预测miRNA的下游靶基因。结果显示,BCT对NSCLC细胞株有强大的细胞毒作用,对H1299、PC-9和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.12±0.02、0.31±0.20和2.07±0.70μmol·L^-1。当0、0.03、0.15和0.75μmol·L^-1BCT分别作用H1299细胞24 h后,其增殖、迁移与侵袭能力呈现浓度依赖性地抑制。值得关注的是,多种与细胞迁移与侵袭相关的miRNA,如miR-29a-3p、miR-21-3p、miR-183-5p与miR-34b-5p的表达水平随着BCT给药浓度的增加而增加,尤其对miR-29a-3p的作用最为明显;通过基因预测网站预测整合素β1(integrinβ1,ITGB1)可能为miR-29a-3p的靶基因;Western blot结果进一步显示,多种与细胞增殖、迁移与侵袭相关的蛋白,如整合素家族多种蛋白以及下游β-catenin、p-Src和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达均呈浓度依赖性减低,其中ITGB1蛋白降低最明显;而RT-qPCR结果显示ITGB1的mRNA表达与给药浓度无关。由此推测,BCT有可能是通过上调miR-29a-3p抑制ITGB1蛋白的表达,且与其mRNA水平无关,深入的机制仍需进一步探讨。本研究初步提示BCT在NSCLC的治疗中具有继续开发的研究潜力。     

女性生殖道恶性黑色素瘤的早期诊断及合理治疗

女性生殖道恶性黑色素瘤(MM)恶性度高,易发生远处转移,预后较差.确诊依细胞病理学检查,也可借助免疫组织化学方法协助诊断,最具特异性的是S-100蛋白.手术切除是治疗MM最有效和首选的方法.外阴MM手术范围有缩小趋势,更强调肿瘤厚度与切缘的关系.甲嗪咪唑胺是最有效化疗药物,干扰素是MM首选的免疫治疗制剂,MM冷冻联合免疫治疗及树突状细胞为基础的MM免疫和基因治疗也已进入临床实验阶段.     

紫杉醇作用卵巢癌细胞系HO-8910后CYP1B1 mRNA及蛋白表达差异的研究

背景与目的:用紫杉醇(paclitaxel,PTX)对卵巢癌细胞系HO-8910进行体外化疗后,观察CYP1B1表达的变化,以期探讨CYP1B1基因表达与肿瘤细胞耐药的关系. 材料与方法:以不同浓度PTX(分别为30、15、7.5、3.75、1.88、0.94、0.47 μg/mi)处理H0-8910细胞.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PTX对HO-8910细胞体外生长的抑制作用,实验同时设只加培养液的对照组.以5 μg/ml PTX分别处理HO-8910细胞24 h、48 h、72 h和50#g/ml PTX处理细胞24 h后,用RT-PCR技术检测存活的卵巢癌细胞中CYP1B1 mRNA的表达水平,用Western blot检测细胞CYP1B1蛋白表达.结果:PTX能抑制HO-8910细胞生长,7种不同浓度的PTX作用72 h后,细胞的抑制率分别为89.10%、76.82%、67.39%、57.27%、46.21%、37.02%、17.56%,随着药物浓度的下降,其抑制率明显降低,各浓度组细胞抑制率间的差异具有统计学意义(P<0.05).经PTX处理后存活的HO-8910细胞中CYP1B1 mRNA及蛋白的表达量增加,高于对照组;5 μg/ml PTX处理HO-8910细胞48 h、72 h和50 μg/ml的PTX处理24 h组,CYP1B1蛋白的表达量高于5 μg/ml PTX处理24 h组(P<0.05).结论:CYP1B1在卵巢癌细胞系中呈高表达,CYP1B1基因在卵巢癌细胞系H0-8910体外PTX化疗中起抑制作用.     

细胞色素P450 1B1在妇科肿瘤研究进展

细胞色素P4501B1(CYP1B1)是一种重要的P450系氧化代谢酶,广泛存在于肝外组织,参与代谢一些外源性化合物及前致癌物,同时还是17β-雌二醇代谢的关键酶.CYP1B1基因多态性与多种肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌)易感性相关.研究还发现CY1B1在多种肿瘤组织中高表达,而在相应正常组织无表达,这为抗肿瘤药物及免疫治疗提供了新的靶点.综述CYP1B1基因及其多态性、调节机制、代谢特异性、组织特异性表达及其在妇科肿瘤中的研究现状.     

卵巢癌细胞系COC1紫杉醇体外化疗后survivin mRNA及蛋白表达差异的研究

目的:探讨卵巢癌细胞系COC1紫杉醇体外化疗后survivin mRNA及蛋白表达的变化,进而探讨survivin表达与肿瘤细胞耐药的关系。方法:应用细胞培养技术及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度紫杉醇(0.39、0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25μg/ml)对COC1细胞体外生长的抑制作用。应用RT-PCR技术检测5μg/ml紫杉醇分别处理COC1细胞24、48、72h和20μg/ml处理细胞24h后存活的卵巢癌细胞中survivin mRNA的表达水平。Western blot检测5μg/ml紫杉醇处理不同时间后COC1细胞survivin蛋白的表达。结果:紫杉醇抑制卵巢癌细胞生长,不同浓度紫杉醇作用COC1细胞72h后的抑制率分别为13.21%、24.76%、35.78%、44.23%、57.23%、73.36%、89.56%,随着药物浓度的增加,细胞受抑制程度明显升高(P<0.05)。5μg/ml紫杉醇处理COC1细胞48h和72h后存活的卵巢癌细胞中survivin mRNA表达量增加,明显高于对照组。Western blot检测survinvin蛋白表达,结果表明与mRNA水平的表达一致。结论:抗凋亡蛋白survivin在卵巢癌细胞系COC1中高表达,survivin基因在卵巢癌细胞系COC1体外化疗中起抑制作用。     

卵巢癌细胞系A2780紫杉醇体外化疗后CYP1B1基因表达差异研究

目的探讨卵巢癌细胞系A2780紫杉醇(PTX)体外化疗后细胞色素P4501B1(CYP1B1)表达的变化,研究CYP1B1基因表达与肿瘤细胞耐药的关系。方法2004年天津医科大学总医院采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察不同质量浓度PTX(50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78mg/L)对A2780细胞体外生长的抑制作用。应用RT-PCR技术检测5mg/L PTX分别处理A2780细胞24h、48h、72h和50mg/L PTX处理A2780细胞24h后存活的卵巢癌细胞中CYP1B1 mRNA的表达。Western blot检测5mg/L PTX处理不同时间后和50mg/L PTX处理A2780细胞后CYP1B1蛋白表达。结果PTX抑制卵巢癌细胞生长,不同浓度PTX作用A2780细胞72h后的抑制率分别为90.45%、78.63%、66.77%、58.38%、45.90%、36.41%、15.38%,随药物质量浓度的下降,细胞受抑制程度明显降低(P<0.05)。PTX处理后存活的卵巢癌细胞中CYP1B1 mRNA及蛋白的表达量增加,高于未加药的对照组;5mg/L处理48h、72h和50mg/L组CYP1B1的表达量高于5mg/L处理24h组(P<0.05)。结论CYP1B1基因在卵巢癌细胞系中呈高表达,在卵巢癌细胞系A2780体外化疗中起抑制作用。