CC16等四种标志物对ARDS患儿监测作用的研究

目的探讨Clara细胞分泌蛋白16(CC16)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)、细胞间粘附分子1(ICAM-1)及肺表面活性蛋白A(SP-A)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清中的变化及其临床应用的意义。方法选取行机械通气的ARDS患儿78例,分为重度组(20例)、中度组(29例)、轻度组(29例),对照组为门诊体检儿童(20例);采用ELISA法检测四组患儿血清CC16及MIP-2、ICAM-1、SP-A等炎症指标的表达水平;记录肺动态顺应性(Cdyn)、氧合指数(OI)、呼吸道阻力(Raw)、呼吸功(WOB)等呼吸力学指标;采用受试者工作特征曲线分别评价CC16、MIP-2、ICAM-1、SP-A对ARDS的诊断价值;分析CC16与另外三个炎症指标及呼吸力学指标间的相关性。结果⑴CC16、MIP-2、ICAM-1、SP-A水平:重度组高于中度组,中度组高于轻度组,轻度组高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。⑵在ARDS中度组,CC16水平:和上机前比较,上机24h无明显变化,上机72h明显降低,撤机前更低;Cdyn、OI:和上机24h比较,上机72h明显升高,撤机前更高,P0.05。⑶血清CC16与MIP-2、ICAM-1、SP-A水平呈正相关(r=0.721、0.730、0.677,均P0.05);CC16与Cdyn、OI呈负相关(r=-0.441、-0.515,均P0.05)。⑷受试者工作特征曲线中CC16、ICAM-1、SP-A、MIP-2的曲线下面积分别为0.925、0.844、0.831、0.684(均P0.01)。结论血清CC16水平与ARDS疾病严重程度相关,与其它三种标志物比较,CC16可对病情变化具有较好的预测及评价作用。     

哮喘小鼠树突状细胞表达及减毒卡介苗干预的影响

目的探讨哮喘小鼠树突状细胞(DC)表达及减毒卡介苗(BCG)干预的影响。方法以卵蛋白腹腔注射、雾化吸入和BCG皮下注射复制哮喘和BCG干预小鼠模型。流式细胞仪检测小鼠脾单个核细胞DC和共刺激分子CD80、CD86表达;免疫组化法检测小鼠肺DC表达;ELISA法检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6、IL-12的含量。结果哮喘、BCG干预、对照组小鼠的脾单个核细胞DC表达分别为(16.18±9.49)%、(8.62±3.53)%、(1.84±0.69)%,各组间差异均有统计学意义(P<0.01);哮喘、BCG干预、对照组小鼠的肺DC表达分别为(1 581±177)个/mm、(668±101)个/mm、(268±29)个/mm,各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。哮喘、BCG干预、对照组小鼠的CD80表达分别为(6.4±3.3)%、(10.8±3.1)%、(7.1±4.0%),BCG干预组与哮喘和对照组间的差异有统计学意义(P<0.05),哮喘组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘、BCG干预、对照组小鼠的CD86表达分别为(9.6±2.9)%、(7.3±4.5)%、(4.9±4.4)%,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);哮喘、BCG干预、对照组小鼠BALF中的IL-6含量分别为(28.65±2.39)pg/ml、(18.63±1.88)pg/ml、(12.80±2.98)pg/ml,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);哮喘、BCG干预、对照组小鼠BALF中的IL-12含量分别为(4.78±0.22)pg/ml、(6.33±0.31)pg/ml、(7.38±0.28)pg/mlG,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠外周循环与呼吸道局部DC表达均增加,在哮喘的发生、发展过程中起着重要作用。BCG可通过调节DC,CD80、CD86、IL-6、IL-12等表达,以拮抗哮喘气道炎症反应。     

卡介苗干预对哮喘小鼠T淋巴细胞活化/凋亡状态的影响

目的 探讨卡介苗(BCG)干预对哮喘小鼠共刺激分子B7-CD28/CD152的表达及T淋巴细胞凋亡的影响.方法 昆明小鼠27只随机分为哮喘组、BCG干预组和对照组,每组9只.用卵清蛋白(OVA)、100g/L氢氧化铝腹腔注射致敏哮喘组小鼠,OVA雾化吸入激发,复制哮喘模型.干预组在致敏前5、3、1 d采用BCG皮内注射,0.025 mg/只,共干预3次,余同哮喘组.对照组以9g/L盐水代替OVA及氢氧化铝致敏和激发.流式细胞术检测各组小鼠脾淋巴细胞悬液CD28、CD152、CD80、CD86的表达;采用Ficoll法分离各组小鼠外周血单个核细胞并培养出T淋巴细胞,采用Comet法检测各组小鼠T淋巴细胞凋亡率.采用SPSS10.0软件进行统计学分析.结果 哮喘和对照组小鼠比较CD28表达明显上调(t=3.94 P<0.01),CD152表达无变化(t=0.38 P>0.05),CD80表达无变化(t=0.40 P>0.05),CD86>达上升(t=2.68 P<0.05);BCG干预和哮喘组比较,CD28表达显著下调(t=4.21 P<0.01),CD152表达显著上调(t=3.21 P<0.01),CD80表达明显上调(t=2.50 P<0.05),CD86二组表达无差异(t=0.45 P>0.05).T淋巴细胞凋亡率BCG干预组明显高于哮喘组(t=3.15 P<0.01).哮喘与对照组T淋巴细胞凋亡率比较显著减少(t=5.83 P<0.01).结论 BCG通过抑制小鼠T淋巴细胞活化,促进T淋巴细胞凋亡,上调TH1反应,发挥其防治哮喘作用.     

卡介苗对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋CD127^lo Treg表达的影响

目的探讨卡介苗干预对哮喘小鼠调节性T细胞（Treg）及T淋巴细胞凋亡的影响。方法 27只小鼠随机分为3组：哮喘组,干预组,对照组。哮喘组小鼠用卵清蛋白（OVA）、氢氧化铝腹腔注射致敏,OVA雾化吸入激发,干预组在致敏前BCG干预3次,对照组生理盐水代替OVA及氢氧化铝。流式细胞术检测外周血（记为培养前）及植物血凝素（PHA）刺激培养后的外周血单个核细胞中Treg的表达,Comet法检测T淋巴细胞凋亡率。结果培养前：哮喘组与对照组比较Treg显著降低,干预组与哮喘组比较显著升高。培养后：哮喘组与对照组比较Treg显著降低,干预组与哮喘组比较显著升高。同组小鼠Treg培养前后的比较：哮喘组、干预组表达无改变,对照组表达明显升高。T淋巴细胞凋亡率,哮喘组明显低于对照组,干预组明显高于哮喘组。结论哮喘小鼠存在Treg数量不足和分化障碍,BCG干预能促进其数量上升,并促进T淋巴细胞凋亡。     

卡介苗对哮喘小鼠CD+4CD+25CDlo127Treg表达的影响

目的 探讨卡介苗干预对哮喘小鼠调节性T细胞(Treg)及T淋巴细胞凋亡的影响.方法 27只小鼠随机分为3组:哮喘组,干预组,对照组.哮喘组小鼠用卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝腹腔注射致敏,OVA雾化吸入激发,干预组在致敏前BCG干预3次,对照组生理盐水代替OVA及氢氧化铝.流式细胞术检测外周血(记为培养前)及植物血凝素(PHA)刺激培养后的外周血单个核细胞中Treg的表达,Comet法检测T淋巴细胞凋亡率.结果 培养前:哮喘组与对照组比较Treg显著降低,干预组与哮喘组比较显著升高.培养后:哮喘组与对照组比较Treg显著降低,干预组与哮喘组比较显著升高.同组小鼠Treg培养前后的比较:哮喘组、干预组表达无改变,对照组表达明显升高.T淋巴细胞凋亡率,哮喘组明显低于对照组,干预组明显高于哮喘组.结论 哮喘小鼠存在Treg数量小足和分化障碍,BCG干预能促进其数量上升,并促进T淋巴细胞凋亡.     

Openlung策略在新生儿呼吸窘迫综合征机械通气治疗中的应用

目的探讨Openlung策略在中重度新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）机械通气治疗中的作用。方法将56例患儿随机分为策略通气组（I组）和常规通气组（Ⅱ组）,每组28例,除一般治疗外,均行Pc＋SIMV通气模式,I组实施开放肺通气操作,Ⅱ组进行常规机械通气。比较两组通气前及通气后6、12、24、48h血气变化情况,并对并发症、疗效进行比较。结果两组通气后较通气前动脉氧分压（PaO2）、动脉血氧饱和度（SaO2）、氧合指数[PaO2／吸入氧浓度（FiO2）]都有显著改善,但在同一时段,I组PaO2、SaO2、氧合指数（PaO2／FiO2）的改善比Ⅱ组更明显;呼吸机相关性肺损伤（VIPI）的发病率I组比Ⅱ组显著降低（P〈0．05）,脑室内出血／脑室周围白质软化（VIH／PVL）的发病率两组差异无统计学意义（P〉0．05）,有效率I组比Ⅱ组显著增高（P〈0．05）。结论应用Openlung策略通气能显著改善新生儿呼吸窘迫综合征患儿的氧舍,减少呼吸机相关性肺损伤,提高治疗的有效率。     

卡介苗对哮喘小鼠肺组织凋亡蛋白Fas/Bcl-2表达的影响

目的探讨卡介苗干预对哮喘小鼠肺组织Fas/Bcl-2凋亡蛋白分子表达及T淋巴细胞凋亡的影响。方法 30只昆明小鼠按随机原则,分为3组:干预组、哮喘组和对照组。哮喘组小鼠致敏:用卵清蛋白(OVA)溶液及氢氧化铝佐剂腹腔内注射,然后OVA雾化吸入激发,干预组小鼠致敏前BCG皮内注射3次起干预作用,对照组用生理盐水代替OVA及氢氧化铝注射或吸入。免疫组织化学染色法:检测三组小鼠其肺组织凋亡蛋白Fas、Bcl-2的表达;Comet法检测外周血T淋巴细胞凋亡率。结果三组小鼠间Fas、Bcl-2蛋白的表达均具有显著性差异。哮喘组与对照组比较,凋亡蛋白Fas表达降低,Bcl-2表达增加。干预组和哮喘组比较,Fas表达增加,Bcl-2表达无显著差异。T淋巴细胞凋亡率检测发现,哮喘组低于对照组,干预组高于哮喘组。结论 BCG干预能调节哮喘小鼠肺组织Fas/Bcl-2的表达,并促进T淋巴细胞凋亡。     

PICU内呼吸机相关性肺炎的多重耐药菌感染病原学及危险因素分析

目的探讨儿童VAP发病的相关危险因素及感染多重耐药菌的病原学分析,为预防VAP的发生提供相应的干预措施,为难治性VAP的抗感染治疗提供实验依据。方法回顾分析我院PICU内机械通气治疗的病例,对VAP发病的危险因素进行单因素卡方检验及多因素Logistic回归分析;VAP患儿经痰培养证实多重耐药菌感染者进行病原学分析。结果 VAP的发病率42.0%;多因素分析显示:机械通气时间、肺部原发病、再插管、IVIG应用为VAP相关影响因素;多重耐药菌在检出菌中的比率达72.1%,其前5位分别为:产ESBLs大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、产ESBLs铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌;产ESBLs革兰阴性杆菌对亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星敏感,MRSA对万古霉素、利奈唑胺敏感。结论多重耐药菌感染的VAP高发,机械通气时间、肺部原发病、再插管、IVIG应用为VAP相关影响因素,应根据病原学分析进行抗感染治疗。     

哮喘发病中Toll样受体的作用

Toll样受体可识别多种病原微生物及其产物,并且是联系天然免疫与获得性免疫的重要分子,结合脂多糖等配体后,通过激活天然免疫,产生γ干扰素等辅助T细胞(Th)1型细胞因子;诱导幼稚树突细胞发育成熟,并呈递抗原,促进Th1型免疫反应,抑制Th2型免疫反应;树突细胞上的Toll样受体与病原菌的病原相关分子模式结合,可能通过抑制性共刺激分子或分泌白介素-10、转化生长因子-β等调节性因子,促进Th0向具有调节功能的调节性T细胞转化.从而调节哮喘的Th1/Th2失衡.