LncRNA GM15886在高氧诱导支气管肺发育不良新生小鼠肺组织的表达规律及生物信息学分析

[摘 要] 目的：探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）GM15886在高氧诱导新生小鼠支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）肺组织中表达水平的变化,并运用生物信息学分析,预测其在BPD模型中的作用机制。方法：在已建立BPD模型小鼠肺组织lncRNA基因芯片中选取并验证GM15886,应用lncRNATargets、Multi Experiment Matrix和Ensemble数据库预测其靶基因;将64只新出生C57BL／6J小鼠随机分为高氧组和空气组,每组各32只;高氧组新生小鼠置于95％高氧环境下,空气组暴露于空气环境下,分别选取生后第0天、3、5、7天处死小鼠取肺组织,HE染色评价肺组织病理变化;采用qPCR检测GM15886、HIPK1 mRNA表达水平;免疫组化检测HIPK1表达情况。结果：lncRNATargets预测GM15886碱基序列能够和HIPK1第二个外显子碱基序列完全结合。qPCR示高氧组第3、5、7天GM15886表达量升高,分别为1.91±0.28、2.12±0.38、2.35±0.43,与第0天相比,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）;HIPK1在第3、5、7天相对表达量分别为1.16±0.33、0.92±0.31、3.12±0.46,第7天表达量高于第0、3、5天（P均＜0.05）;HIPK1免疫组化表现与RNA表达的结果相对应。结论：随着高氧暴露时间的延长,肺组织GM15886表达量增加;生信分析和上述实验表明GM15886可能靶向HIPK1参与BPD的发病机制。     

高氧肺损伤新生小鼠肺组织中GM15886和HIPK1的表达研究

目的：探讨长链非编码RNA（long non?coding RNA,lncRNA）GM15886在高氧诱导新生小鼠支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）肺组织中表达水平的变化,及其可能的作用机制。方法：选取BPD模型小鼠肺组织lncRNA基因芯片中高表达的GM15886进行验证,应用IntaRNA、Multi Experiment Matrix和Ensemble数据库预测其靶基因;将64只新出生C57BL/6J小鼠随机分为高氧组和空气组,每组各32只;高氧组新生小鼠置于95％高氧环境下,空气组暴露于空气环境下,分别于生后第0、3、5、7天处死小鼠取肺组织,HE染色评价肺组织病理变化;采用qPCR检测GM15886和同源结构域相互作用蛋白激酶1（homeodomain?interacting protein kinase 1,HIPK1）表达水平;免疫组化检测HIPK1表达情况。结果：IntaRNA预测GM15886碱基序列能够和HIPK1第2个外显子碱基序列完全结合。qPCR示高氧组第3、5、7天GM15886表达量升高,分别为1.91±0.28、2.12±0.38、2.35±0.43,与第0天相比,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）;HIPK1在第3、5、7天相对表达量分别为1.16±0.33、0.92±0.31、3.12±0.46,第7天表达量高于第0、3、5天（P均＜0.05）;HIPK1免疫组化表现与RNA表达的结果相对应。结论：随着高氧暴露时间的延长,肺组织GM15886表达量增加;GM15886可能靶向HIPK1参与BPD的发病机制。     

小剂量糖皮质激素预防早产儿支气管肺发育不良效果观察

目的：观察小剂量糖皮质激素预防早产儿支气管肺发育不良（ BPD）的临床效果。方法将90例出生后10 d仍需机械通气的早产儿随机分为观察组和对照组各45例,观察组静推地塞米松,对照组静推等量生理盐水,总疗程7～10 d。记录两组BPD发病率、呼吸机参数、吸氧时间及不良反应的发生情况。结果观察组BPD发病率为9％,对照组为67％,P＜0．01。观察组机械通气时间、吸氧时间和出生后30 d的体质量均低于对照组,P均＜0．01。两组吸入氧浓度（FiO2）、吸气峰压（PIP）、呼气末正压（PEEP）和平均动脉压（MAP）比较,P均＞0．05。观察组未发生严重激素使用并发症。结论小剂量糖皮质激素可有效预防早产儿BPD的发生,且安全性较高。     

高氧诱导支气管肺发育不良新生小鼠肺组织中lncRNA表达谱的变化

目的:分析长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)在高氧诱导支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasi,BPD)小鼠模型肺中表达谱的变化?方法:构建高氧诱导支气管肺发育不良新生小鼠模型,利用lncRNA芯片技术检测正常小鼠肺及BPD小鼠肺组织中lncRNA表达谱的变化,经过对原始数据进行预处理,筛选出差异表达的lncRNA?结果:与对照组相比,模型组差异表达的lncRNA(差异倍数≥2倍且P < 0.05)共1 769条,其中882条上调,887条下调;5倍以上上调的共140条,下调的共71条;10倍以上上调的共28条,下调的有2条?结论:高氧诱导BPD发生时,肺组织中lncRNA的表达谱发生了显著变化;这些差异表达的lncRNA,可能参与了BPD发生?发展过程?     

氧诱导对新生大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与新生大鼠视网膜病变的关系.方法 清洁级新生SD大鼠36只,雌雄不限,与母鼠共同饲养,随机分为实验及对照组各18只.实验组大鼠在50和10 mL/L氧环境中循环饲养14 d后转入空气饲养,建立新生大鼠视网膜病变模型,对照组仅置于空气中.在视网膜病变模型结束后即刻(生后14 d,P14)、72 h(P17)及1周(P21)3个时点每组处死6只大鼠,取眼球制成石蜡标本,组织学观察其视网膜毛细血管密度指数(RCDI)的改变,免疫组织化学技术评估视网膜MCP-1的表达情况.结果 新生大鼠视网膜RCDI相同时点二组间差异有显著性[t(P14)=6.69 P=0.001,t(P17)=3.43 P=0.006,t(P21)=2.37 P=0.039)].而在同一组不同时点的比较显示随着时间的延长,实验组RCDI值逐渐减少,3个时点间差异存在显著性(F=17.74 P=0.0001);对照组3个时间点间差异无显著性(F=0.016 P=0.984).MCP-1的表达情况:相同时点二组间差异有显著性[t(P14)=40.45,t(P17)=43.44,t(P21)=17.45 Pa=0)].同一组内的不同时点比较随着时间的延长,实验组MCP-1值逐渐减少,3个时点间差异存在显著性(F=421.5 P=0);对照组3个时间点间差异无显著性(F=0.006 P=0.994).实验组MCP-1表达与RCDI水平呈正相关(r=0.822 P=0).结论 MCP-1的表达在氧诱导新生大鼠视网膜病中显著增强,随病程的延长而逐渐减少;视网膜MCP-1的表达与新生血管的发生相关.     

肺表面活性物质联合鼻塞式气道正压通气对早产儿防治的临床研究

目的:探讨早产儿极低出生体重儿早期应用肺表面活性物质固尔苏联合鼻塞式气道正压通气(nasal continuous positive airway pressure,NCPAP)的临床防治作用?方法:将100例胎龄< 30周且在出生后0.5 h内入住重症监护室的早产儿,随机分为2组,治疗组和对照组,两组在常规治疗的基础上,入院后即予气管插管滴入固尔苏?治疗组拔管后,继之NCPAP辅助呼吸,而对照组拔管后则根据患儿病情变化采取规范性治疗?分别比较两组患儿固尔苏使用剂量?气管插管率?气管内插管机械通气治疗时间?呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome,RDS)发生率及其程度?慢性肺部病变(chronic pulmonary disease,CPD)发生率以及病死率等为疗效指标?结果:治疗组固尔苏使用剂量明显低于对照组,气管插管率?气管内插管机械通气治疗时间?RDS发生率及其程度以及慢性肺部病变发生率明显优于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)?结论:早期应用肺表面活性物质联合NCPAP对胎龄<30周的早产儿能降低气管插管率,减少固尔苏用量,缩短机械通气时间,减少新生儿RDS发生率及其程度,减少CPD的发生率,有一定的临床意义?     

LRP1-pPyk2-MMP9通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中的作用

目的 探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1（low-density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1）-磷酸化酪氨酸激酶2（proline-rich tyrosine kinase 2 phosphorylation,pPyk2）-基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases 9,MMP9）通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中的作用。 方法 将16只新生大鼠随机分为空气组和高氧组,每组8只。高氧组大鼠于生后即置于吸入氧浓度>95%的环境中7 d,空气组大鼠置于同室空气环境中;第8天处死全部大鼠。苏木精-伊红染色法观察两组大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液中可溶性LRP1（sLRP1）、MMP9水平;Western blot法检测肺组织LRP1、MMP9、pPyk2及Pyk2蛋白表达水平;RT-PCR法检测肺组织LRP1 mRNA及MMP9 mRNA表达水平。 结果 血清和支气管肺泡灌洗液中sLRP1、MMP9在高氧组的水平均高于空气组（P<0.05）;高氧组肺组织匀浆LRP1、MMP9、pPyk2蛋白表达水平较空气组显著升高（P<0.05）;肺组织LRP1 mRNA、MMP9 mRNA在高氧组的相对表达量显著高于空气组（P<0.05）。 结论 LRP1-pPyk2-MMP9通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中活化增强,可能参与支气管肺发育不良的发病机制。     

支气管肺发育不良患儿血清sRAGE检测的临床价值

目的:研究新生儿支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(soluble Receptor for advanced glycation end products,sRAGE)检测的意义?方法:选取新生儿重症监护病房住院BPD患儿45例(轻?中?重组分别为10?16?19例),在病程的不同时期以ELISA法检测血清中sRAGE水平,同时选取匹配非BPD患儿作为对照组?结果:与对照组相比,BPD组血清sRAGE水平明显增高;BPD组中,sRAGE在轻?中?重组间差异也有显著性(F = 149.97,P < 0.01)?结论:血清sRAGE可作为BPD的诊断和病情轻重评估的敏感指标?     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠IL-8表达与白细胞浸润的观察

白细胞介素-8(IL-8)作为炎性趋化因子,在缺血性脑损伤后中性粒细胞的活化、趋化、脱颗粒和吞噬过程的启动等方面起着重要作用。已有研究表明,在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿脑脊液中IL-8的浓度增加,且与HIE临床分度相关[1]。1999年1月～2001年12月,我们选择IL-8作为观察指标,研究新生大鼠缺氧缺血后不同时期脑组织IL-8的表达与白细胞浸润的关系。