紫山药组织RNA的提取方法

针对紫山药富含次生代谢物质的特点,探索出一种可有效去除其酚类、多糖和DNA等杂质的紫山药总RNA提取方法。在SDS法的基础上,于粉碎材料时,用水不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)防止酚类物质氧化,同时以高盐溶液去除多糖污染。利用这一方法提取的紫山药多个组织的总RNA,经琼脂糖电泳鉴定,可见清晰的18和28SRNA的2条带型,表明RNA完整,无弥散或降解;经过紫外吸收分析,A260/A380、A260/A2300分别在1.86~2.01,2.17~2.65,纯度良好,所提取的总RNA质量可以满足进一步分子生物学研究的要求。     

基于表面解吸常压化学电离质谱法快速评价咖啡种子活力

为快速、无损地区分不同活力的咖啡种子,采用自行研制的表面解吸常压化学电离质谱(DAPCI-MS),在无需样品预处理的前提下,获得咖啡种子表面的化学指纹图谱,并分别进行了主成分分析(PCA)、聚类分析(CA)和判别分析(DA),获得不同活力的咖啡种子样品的质谱信息特征.结果表明,在正离子模式下,DAPCI-MS结合多变量分析方法能有效区分不同活力的咖啡种子.PCA提取了3个主成分,累计贡献率达到92.2％;CA可以将相同活力的咖啡种子聚在一起,准确率为100％;DA对训练样本的回判正确率为100％,交叉验证分析成功率为100％,对外部验证样本进行DA,正确率95.7％.本方法具有无需样品预处理,分析速度快,灵敏度高,对种子无损伤等优点,能为其它种子活力测定提供参考.     

不同营养液对铁皮石斛生长及多糖含量的影响

探讨不同营养液在铁皮石斛生长和多糖积累中的影响,以期筛选出铁皮石斛专用营养液,为铁皮石斛合理施肥提供科学依据。以铁皮石斛组培苗为试验材料,炼苗移栽15d后对开始其喷施不同配比营养液,每10d喷施1次,共喷22次。以花多多1号（N:P₂O₅:K₂O=20:20:20）为对照,用N、P、K和Ca肥按正交设计组成4因子3水平的9个处理组,研究不同配比营养液对铁皮石斛株高、茎粗及多糖含量的影响。与对照组相比,N1P3K3Ca3处理下株高最佳,为15.42cm,高于对照组（7.32cm）;N₃P₃K₂Ca₁处理下茎粗最好,为11.20 mm,粗于对照组（2.16mm）;N1P3K3Ca3处理下多糖含量最高,为14.54%,高于对照（6.43%）。K是影响株高的主要因素,其次为P、N、Ca;P是影响茎粗的主要因素,其次为K、Ca、N;K影响多糖含量的主要因素,其次是P、N、Ca。综合分析得出既有利于生长又有利于提高营养成分的铁皮石斛专用营养液配比为N1P3K3Ca1。     

龙牙百合贮藏期间内源激素的变化

以龙牙百合的试管鳞茎及商品鳞茎为材料,研究了5℃低温与25℃常温贮藏对鳞茎内外层鳞叶的内源激素（ABA、GA3和IAA）含量的动态变化影响,实验结果如下:在5℃低温贮藏过程中,GA3含量最高,IAA次之,ABA较低,且GA3与IAA含量呈明显上升趋势,而ABA含量总体呈下降趋势;在25℃常温贮藏过程中,ABA、GA3和IAA的含量与5℃低温贮藏的变化基本一致,只是变化的幅度较小。同一鳞茎内层鳞叶和外层鳞叶的同种激素含量基本处在同一水平,变化幅度基本一致。试管鳞茎ABA的含量要比商品鳞茎的要高,而GA3和IAA的含量则比商品鳞茎的要低。贮藏过程中内源激素GA3/ABA、IAA/ABA的比值总体呈上升趋势,贮藏后期GA3/ABA比值急剧上升。同时,探讨了内源激素的变化和平衡与休眠解除的关系,认为休眠的解除可能为GA3类促进物质和ABA类抑制物质相互作用的促进抑制平衡所致。     

木薯MeSAD基因的电子克隆与生物信息学分析

Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶(stearoyl-acyl carrier protein delta 9-desaturase, SAD)是植物响应逆境胁迫的关键酶,在响应低温胁迫中发挥着重要的作用,克隆木薯(Manihot esculenta)SAD基因对抗寒机理及品种改良研究具有很大的理论意义和现实意义。本文以拟南芥(Arabidopsis thaliana)的SAD同源蛋白为探针,利用电子克隆技术,得到木薯SAD的cDNA,并对表达蛋白的一级至高级结构、结构域、基本理化性质及系统发育等进行生物信息学分析。结果表明,木薯SAD基因cDNA长度为1 685 bp,开放阅读框(ORF)为176～1 366 bp,编码396个氨基酸,主要包含α螺旋以及无规则卷曲序列。该蛋白主要定位在叶绿体基质内,包含酰基-ACP脱氢酶结构域,具有酸性和亲水性。系统进化分析显示,木薯与蓖麻(Ricinus communis)、巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)和麻疯树(Jatropha curcas)等植物亲缘进化关系非常相近。本研究结果可为MeSAD基因功能解析、木薯抗寒机理及耐低温品种改良等奠定基础。     

基于单纯形重心设计铁皮石斛栽培基质的优化

探讨不同栽培基质对铁皮石斛生长和多糖积累的影响,以优化铁皮石斛栽培基质的配比,为人工栽培铁皮石斛提供理论依据。采用混料设计中的单纯形重心设计,以铁皮石斛的株高、茎粗和多糖含量3个指标对锯末、松树皮和刨花3种基质配比进行优化,确定最优基质配比。结果表明锯末和松树皮对3个指标影响最大,优化得到铁皮石斛的最优栽培基质配比为锯末37.2%、松树皮62.8%,该优化配比验证结果为株高13.51cm,茎粗7.86mm,多糖含量13.07%,与试验预测值(13.79cm、8.00mm和13.14%)差异较小。单纯形重心设计能便捷且全面地优化出基质配方中每一因素,进而使铁皮石斛在产量及品质上达到最优。     

不同地区蜂胶和树胶的红外谱图分析

蜂胶有抗菌、抗病毒、保肝、抗癌等功效,被誉为“紫色黄金”,而当前蜂胶市场制假掺假现象愈演愈烈。为快速鉴别蜂胶的真假与优劣,以41种中国蜂胶、一种美国蜂胶和两种树胶为实验材料,利用傅里叶变换红外光谱仪采集其红外谱图,以青海蜂胶为参照样品分析相似度,并利用主成分分析法进行数据解读。结果表明,所有蜂胶在2 848.53～2 849.08和2 916.76～2 917.74 cm-1两个区域都存在特征峰,而树胶在这两个区域内无特征峰。树胶的特征峰区域为1 150～1 300和1 550～1 650 cm-1。通过这些差异可以快速甄别蜂胶和树胶,鉴别真假蜂胶。以具有较高品质的青海蜂胶为参照物,匹配性分析显示,树胶与蜂胶完全不匹配,而42种蜂胶样品均与青海蜂胶有较高的匹配度（>80%）,PCA结果显示,蜂胶和树胶,以及不同气候带、不同颜色的蜂胶可以较好区分开来。本研究首次基于红外光谱技术对不同蜂胶进行分析,有望建立蜂胶真假及优劣鉴定的新方法。