用于3种食源性致病菌核酸提取的微流控芯片制备

基于固相萃取原理中磁珠核酸提取法,设计了一种可适用于多种食源性致病菌DNA提取的微流控芯片.芯片主要包含裂解腔、清洗腔、洗脱腔、抽气孔、通气孔、气动阀、毛细管阀等结构,可以完成食源性致病菌核酸提取、纯化及顺序加载等操作.为了提高核酸提取质量浓度,对芯片通道的亲水处理时间及核酸提取过程中的孵育时间、磁珠混合次数及洗脱时间...     

用于1型糖尿病细胞治疗的胰岛低温保存进展

近年来,1型糖尿病细胞治疗技术发展迅速,但供体胰岛的缺乏及供体与受体在时间和空间上的不匹配限制了其在临床上的应用。低温保存技术可以解决该限制,但经传统低温保存方法保存的胰岛存活率和功能性均较差,难以达到临床应用的标准。本文对胰岛低温保存原理及低温保存过程中造成胰岛损伤的因素进行了分类归纳,从冰晶损伤抑制、保护剂损伤抑制和缺氧损伤抑制三个方面综述了近些年来胰岛低温保存技术的发展。由于材料科学、分子生物学、低温生物学等交叉学科研究的发展,诸多新材料新方法应用于胰岛保存领域,使低温保存后胰岛的质量得到进一步提升。但目前仍缺乏可以大量高质量低温保存胰岛的方法,有关新技术新材料对于胰岛低温保存的保护作用机理及潜在的不利影响的研究尚不够深入。在后续研究中,新材料、新技术特别是高通量保存技术的开发以及对低温损伤机理的研究仍然是胰岛低温保存领域的主要任务。     

微液滴自然蒸发加载低温保护剂的细胞渗透特性与损伤评估

本文提出了一种微液滴自然蒸发加载低温保护剂的方法，借助图像处理技术，结合细胞渗透模型与损伤模型进行理论分析，系统研究了初始体积和初始浓度对微液滴自然蒸发加载低温保护剂过程的细胞渗透特性与损伤的影响，并与传统低温保护剂加载方法(一步加载、两步加载)进行对比。研究结果表明：微液滴的初始体积越小，蒸发速率越快，低温保护剂更易达到目标浓度，能够有效缩短加载时间(1μL相比5μL缩短4 907 s);随着低温保护剂初始浓度的降低，加载时间逐渐增长(0.5 M和2.5 M分别为2 460、1 346 s),但造成的细胞体积变化极值显著减小(0.5 M和2.5 M分别为初始体积的14%和43%),累积毒性损伤也会显著降低(0.5 M和2.5 M分别为23.05、47.53);微液滴自然蒸发加载相比传统加载方法可显著提高细胞存活率与细胞增殖能力(P<0.05),其细胞存活率为96.73%±0.54%,比一步加载提升16%,且培养48 h的细胞贴壁情况显著优于两步加载。表明该新方法能够简化低温保护剂加载流程，并能有效降低细胞损伤。