牛乳极性脂质的提取工艺优化及成分鉴定

为更好开发利用牛乳中的乳极性脂质,本文采用氯仿-甲醇浸提法对酪乳粉中的极性脂质进行提取研究。以磷脂含量为指标,通过单因素试验对氯仿-甲醇体积比、液料比、提取温度及提取时间四个影响牛乳极性脂质提取的因素参数进行优化,后利用响应面法筛选最优提取条件,并采用薄层层析对所得样品进行了分析鉴定。结果表明,氯仿-甲醇比为2:1（v/v, %）最优的料液比为1:4（v/v, %）,提取温度20 ℃,提取时间10 min为极性脂质的最优提取条件,在此条件下测得实际提取磷脂含量为（1.647±0.010）mg/g,且存在磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、神经鞘磷脂等极性脂质。本工艺旨在为乳极性脂质的提取及开发提供研究基础。     

石榴叶多酚对急性酒精性肝损伤小鼠肾脏、心脏及免疫器官的抗氧化作用

目的:研究石榴叶多酚(purified polyphenols from Punica granatum L.leaves,PPPL)对酒精所致急性肝损伤小鼠肾脏、心脏、脾脏、胸腺的保护作用。方法:将66只雄性小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(联苯双酯150 mg/(kg·d)),PPPL低、中、高剂量组(100、200、400 mg/(kg·d)),连续灌胃30 d,第31天除空白对照组外其余各组给予50%乙醇(12 m L/kg),建立小鼠急性肝损伤模型。将小鼠脱臼处死后取肾脏、心脏、脾脏及胸腺,测定其超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。结果:与模型对照组相比,PPPL各剂量组均能提高小鼠各脏器的SOD、CAT、GSH-Px活性和GSH含量,降低MDA含量。结论:PPPL对酒精性肝损伤小鼠肾脏、心脏及免疫器官具有明显的抗氧化作用。     

大球盖菇提取物对CC14所致肝损伤小鼠的抗氧化作用研究

目的:研究大球盖菇提取物(SRE)对小鼠肝和主要脏器组织的抗氧化作用.方法:小鼠连续30d给予低(100mg/kg·d)、中(200mg/kg·d)、高(400mg/kg·d)三个剂量的SRE后,灌胃给予CC14(80mg/kg·d)建立动物急性肝损伤模型,动物处死后取血液和脏器测定各项抗氧化指标.结果:高剂量SRE能降低血清ALP活性,提高肝总SOD、Mn-SOD、Cu,Zn-SOD及GSH-Px活性,降低肝组织MDA含量,与模型组相比有显著性差异(p<0.01),且三个剂量呈现了一定的量效关系.主要脏器的抗氧化指标测定表明,SRE能显著提高心和肾SOD和GSH-Px活性(p<0.01),显著降低心组织MDA含量(p<0.01);与对照组相比,模型组脾总SOD和Mn-SOD表现出代偿性增高(p<0.01),给予SRE后可使升高的SOD活性恢复到对照组水平.分析表明SRE的主要抗氧化成分为多糖和黄酮.结论:SRE对CC14所致急性肝损伤小鼠的肝和主要脏器的氧化损伤具有较好的保护作用.     

沙门氏菌裂解性噬菌体的分离鉴定及其生物学特性

从家禽屠宰场污水中,以肠炎沙门氏菌ATCC13076和禽沙门氏菌CVCC2184为宿主菌,分离到两株裂解性沙门氏菌噬菌体,分别命名为vB_SenM-PA13076（简称PA13076）和vB_SenM-PC2184（简称PC2184）。同时对这两株噬菌体进行了噬菌斑、噬菌谱系（含耐药菌）、形态学（透射电镜）、遗传物质、酸碱及热稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线等生物学特性研究。结果表明：两株噬菌体的裂解空斑均透亮清晰;除对本身宿主菌产生强裂解作用,还裂解其他沙门氏菌,为宽噬菌谱,其中PA13076能强裂解一株耐氨苄青霉素ATCC13076转化菌株（A+13076）,PC2184则能裂解另一株耐氨苄青霉素CVCC2184转化菌株（A+2184）;电镜观察这两株噬菌体均为肌尾病毒科;遗传物质为dsDNA;pH值和温度耐受能力较好;PA13076、PC2184最佳感染复数分别为0.01、10,潜伏期分别为20、30 min,爆发期分别为70、60 min,平均爆发量分别为21、23。     

姬菇多糖对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究热水浸提法从姬菇中提取姬菇多糖(PCNP)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：小鼠被随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(联苯双酯组,150mg/(kg ·d))、处理组(400mg/(kg ·d)),连续灌胃30d后,给予CCl4(80mg/kg)建立动物急性肝损伤模型。动物处死后取血液和肝脏测定各项抗氧化指标,以及观察肝组织病理学变化。结果：与模型组相比,处理组能降低血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性和肝脏丙二醛(MDA)含量,提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量。结论：PCNP能明显改善肝组织病理损伤程度,对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤具有明显保护作用。     

大球盖菇提取物对CCl4所致急性肝损伤小鼠的抗氧化酶活性及同工酶的影响

目的：研究大球盖菇提取物(SRE)对小鼠肝和主要脏器的抗氧化酶活性及同工酶的影响。方法：小鼠连续30d 给予低(100mg/(kg bw·d))、中(200mg/(kg bw·d))、高(400mg/(kg bw·d))剂量SRE 后,灌胃给予CCl4(80mg/(kg bw·d))建立动物急性肝损伤模型,动物处死后取肝及主要脏器测定抗氧化酶活性,采用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析CAT 和SOD 同工酶。结果：与模型组比,高剂量SRE 能显著提高肝总SOD、Mn-SOD、CuZn-SOD 及CAT、GPx 活性。主要脏器抗氧化酶活性测定表明,给予SRE 后,心和肾SOD、CAT、GPx 活性比模型组显著提高;造模后肾Mn-SOD 表现出代偿性增高,给予SRE 后能使其恢复到对照组水平。各脏器CAT 同工酶都为1 条,在造模后酶带染色密度明显降低,在给予SRE 后能恢复到正常水平。肝有1 条Mn-SOD带和3 条CuZn-SOD 带,在给予SRE 后能使这些酶蛋白含量达到或高于正常水平;心、肾有1 条Mn-SOD 带和4 条CuZn-SOD 带,SRE 能增加心、肾CuZn-SOD 酶蛋白染色密度。结论：SRE 能通过提高抗氧化酶的活性和同工酶酶蛋白含量,有效预防急性肝损伤小鼠肝脏和主要脏器的氧化损伤作用。     

4 种食用菌提取物自由基清除作用及降血糖作用的研究

目的：研究金顶侧耳提取物(PCTE)、大球盖菇提取物(SRE)、姬菇提取物(PCNE)和柳松菇提取物(AAE)对自由基清除作用及对糖尿病小鼠降血糖作用。方法：采用分光光度法分析4 种食用菌提取物(EFE)中抗氧化成分和自由基清除能力。小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立动物糖尿病模型,以EFE(400mg/kg bw)分别灌胃糖尿病小鼠28d,同时以降糖灵(100mg/kg bw)为药物治疗组,以正常小鼠为对照组,测定0、6、14、21、28d 时空腹血糖值和28d 时糖耐量。动物处死后,取血液测定小鼠糖化血红蛋白(GHB)含量及血脂水平。结果：4 种EFE 总黄酮和总酚分别在2.37～6.89mg/g 和2.57～4.96mg/g 间;多糖含量在20.30～44.02g/100g 间。清除超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH 自由基EC50 浓度分别为PCTE：0.32、2.36、14.51mg/ml;SRE：0.24、3.71、15.32mg/ml;PCNE：0.36、2.60、15.36mg/ml;AAE：0.13、3.95、11.20mg/ml。与模型比,灌胃EFE 28d 后能明显改善糖尿病“三多一少”病症,能显著降低空腹血糖值(P ＜ 0.01)和血糖曲线下面积(AUC)(P ＜ 0.01),其中给予PCTE、PCNE、AAE 后血糖下降百分率都大于15%,并使GHB 含量恢复到正常水平(P ＞ 0.05)。4 种EFE 还能使糖尿病小鼠总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白(HDL-C)含量恢复到正常水平。结论：PCTE、SRE、PCNE 和AAE 能有效地清除自由基,对糖尿病小鼠有较好的降血糖、改善糖耐量作用,并有一定的降血脂作用。     

大球盖菇多糖清除自由基活性和对D-半乳糖氧化损伤小鼠的抗氧化作用

目的：探讨大球盖菇多糖(SRP)体外自由基清除活性和对D- 半乳糖所致氧化损伤小鼠的抗氧化作用。方法：SRP 体外抗氧化活性用自由基清除能力、红细胞溶血作用、肝匀浆MDA 生成作用和抑制线粒体肿胀的方法来测定;在动物实验中,通过连续60d 颈背部皮下注射D- 半乳糖建立氧化损伤动物模型,在造模的同时给予低、中、高剂量(100、200、400mg/kg·d) SRP,并定期测定血液SOD 活性和MDA 含量,动物被处死后测定血液和肝脏的抗氧化指标。结果：SRP 在体外清除超氧自由基IC50 为132.5μg/ml,在583.1μg/ml 浓度时对羟自由基清除率为47.44%,在832μg/ml 时对红细胞氧化溶血抑制率为23.8%,在500μg/ml 时抑制线粒体肿胀程度与对照组相同,在537μg/ml 时在自氧化和诱导氧化条件下,抑制肝匀浆MDA 的生成分别为38.0% 和40.9%;在动物实验中,SRP 对小鼠体重变化无显著影响,能使降低的血红蛋白(Hb)含量和肝指数恢复到正常水平给予SRP(200mg/kg)在20、45、60d 时能提高血液SOD 活性,在45、60d 时能降低血液MDA 含量,与模型组比差异有显著性;在小鼠血清抗氧化指标中,模型组MDA 含量升高,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和总抗氧化能力(TAOC)水平降低,与对照组比差异有显著性,给予SRP 后MDA 含量显著降低,GPx 活性和TAOC 显著提高。与模型组比,SRP 组的肝抗氧化酶(总SOD、MnSOD、CuZnSOD 及GPx)活性及TAOC 显著提高,MDA 含量显著下降,差异有显著性。结论：SRP 能有效地清除自由基,对D- 半乳糖所致氧化损伤小鼠血液和肝脏有显著的改善作用,说明SRP 体内和体外具有很好的抗氧化作用。     

白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠的免疫调节作用

目的:研究白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的免疫调节作用。方法:经超声波辅助热水浸提及Sevage法去蛋白得到白玉菇精多糖(RPHM)。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、RPHM低剂量组(30 mg/kg bw/d)、RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、RPHM高剂量组(120 mg/kg bw/d),每天同时间段进行灌胃,灌胃15 d,建立环磷酰胺(CPA)免疫抑制型小鼠模型。取小鼠脾脏、胸腺,测定其体重、脏器指数;血清细胞因子、单核-巨噬细胞吞噬能力;外周白细胞、红细胞和血小板计数并观察脾脏、胸腺的形态学。结果:与模型组相比,RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、高剂量组(120 mg/kg bw/d)可明显提升免疫抑制型小鼠的毛色、活动情况、身体状况、食欲、体重、脾脏指数和胸腺指数、单核-巨噬细胞吞噬功能、骨髓造血功能等指标;也可在一定程度上提高免疫抑制型小鼠IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平,并改善IL-6的分泌异常情况;还可明显改善免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的病变,改善结构完整度。结论:RPHM对免疫抑制型小鼠的脾脏和胸腺有明显的免疫调节作用。     

鸡枞菌多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的：研究鸡枞菌多糖（refined polysaccharide from Termitomyces albuminosus,RPTA）对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：小鼠被随机分为空白对照组、模型对照组、药物对照组（联苯双酯灌胃,150 mg/（kg·d）,以体质量计,下同）、RPTA各剂量组（100、200、400 mg/（kg·d））,连续灌胃30 d,空白对照组和模型对照组按等量生理盐水灌胃。第31天,给予50%乙醇（12 mL/kg ,以体质量计）建立动物急性肝损伤模型。去除死亡小鼠,在灌胃12 h后各组均取10 只小鼠摘眼球取血并分离血清,测定谷草转氨酶（aspartatetransaminase,AST）和谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）活性、甘油三酯（triglyceride,TG）水平;处死后取小鼠肝脏测定各项抗氧化指标,并采用石蜡切片分析小鼠肝损伤程度。结果：与模型对照组相比,RPTA各剂量组均能降低血清AST和ALT活性、TG水平及肝脏丙二醛含量,提高肝脏超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量,肝脏变性和坏死等病理改变明显减轻,尤以RPTA高剂量组为佳。结论：RPTA对小鼠酒精性肝损伤具有明显保护作用,其机制可能为RPTA预处理可以提前增强机体的自由基清除防御体系,可以有效地拮抗急性酒精所导致的抗氧化酶活性降低及GSH耗竭,抑制自由基介导的脂质过氧化反应,增强脂肪酸在细胞内代谢,保护细胞膜,促进细胞的再生和修复。