烟曲霉素发酵培养基的优化

目的:以烟曲霉CEA-1701为生产菌株,对烟曲霉素发酵培养基进行优化。方法:运用HPLC测定发酵液中烟曲霉素含量,通过单因素实验选择发酵碳源和氮源种类,进一步用Plackett-Burman(PB)和Box-Behnken Design(BBD)设计优化各成分在培养基中的浓度。结果:单因素实验筛选到适宜烟曲霉素合成的碳源和氮源分别为甘油和酵母提取粉。PB实验表明,甘油、玉米粉和酵母提取粉是影响烟曲霉素产量的主要因素;BBD实验优化得到产烟曲霉素的适宜培养基成分为:甘油33.5 g/L、酵母提取粉3.1 g/L、玉米粉1.7 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L、K₂HPO₄ 1.5 g/L、KCl 0.5 g/L、FeSO₄·7H₂O 0.013 g/L。以此培养基发酵144 h测得发酵液中烟曲霉素含量达到68.51 mg/L,较优化前提高了122.4%。结论:实验优化了发酵烟曲霉素的培养基成分,显著提高了烟曲霉CEA-1701菌株合成烟曲霉素产量,为烟曲霉素的发酵生产提供了参考依据。     

QuEChERS前处理方法结合高效液相色谱-串联质谱测定蜂蜜和蜂王浆中14 种喹诺酮类药物残留

建立一种快速、简便的测定蜂蜜和蜂王浆中14 种喹诺酮类药物残留的分析方法。样品经1%乙酸-乙腈提取,C₁₈-EC和N-丙基乙二胺吸附剂分散净化后以高效液相色谱-串联质谱测定。结果表明,14 种喹诺酮类药物在3 个添加水平的回收率范围为80.4%～110.2%,相对标准偏差不大于16.3%,在0.1～100 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.99,蜂蜜的检出限和定量限分别为0.45～2.58 ng/g和 1.51～8.59 ng/g;蜂王浆的检出限和定量限分别为0.51～3.22 ng/g和1.69 ～10.75 ng/g。该方法操作简单、灵敏度高,适用于蜂蜜和蜂王浆14 种喹诺酮类药物残留的测定。     

烟曲霉素发酵条件的初步优化及其扩大培养

为了获得适宜的烟曲霉素发酵条件,提高烟曲霉素产量。以烟曲霉CEA-1701为生产菌株,运用HPLC测定烟曲霉素含量。通过单因素试验确定各因素范围,进一步运用Plackett-Burman(PB)和Central-Composite Design(CCD)设计优化适合烟曲霉CEA-1701产烟曲霉素的发酵条件,最后对优化的结果进行5L罐的扩大培养。PB试验表明,温度和p H是影响烟曲霉素产量的主要因素;CCD优化得到的产烟曲霉素的发酵条件为:温度32℃、培养基初始p H 6.24、装液量50/250m L、接种量1%(v/v)、玻璃珠添加量5颗。以优化后的条件进行摇瓶和5L发酵罐发酵,烟曲霉素的产量分别提高了18.7%和34.6%,达到73.58mg/L和83.42mg/L。试验优化了烟曲霉CEA-1701产烟曲霉素的发酵条件,初步得到了5L发酵罐的发酵参数,扩大培养显著提高了烟曲霉素的产量。为烟曲霉素的进一步发酵生产提供了依据。