响应面法优化榛蘑水溶性多糖的超声波辅助提取工艺

以野生榛蘑为原材料,优化超声波辅助提取榛蘑水溶性多糖提取工艺。采用单因素试验和二次回归旋转组合试验确定超声波辅助提取条件。考察了超声提取时间、功率、温度和液料比对榛蘑多糖提取率的影响,优化了提取工艺参数。结果表明,超声波辅助提取榛蘑多糖的最优工艺参数为提取温度51℃、时间75min、液料比17 mL/g、功率400 W,在此实验条件下,榛蘑多糖最高提取率达14.51%。     

限氧发酵生产缬氨酸工程菌株及发酵过程优化

VHY18是之前构建的可在限氧条件下高产缬氨酸的菌株，但在发酵过程中会大量积累琥珀酸和乙酸，生长活力也会显著衰退，限制其发酵性能。为此，该研究首先敲除了VHY18中丙酮酸氧化酶和乙酸激酶编码基因poxB和ackA,构建了VHY19,使乙酸浓度降低了43.7%。接着敲除了VHY19的苹果酸脱氢酶编码基因mdh,构建了VHY20,使琥珀酸浓度降低了50.8%。最后优化了VHY20的双阶段发酵工艺，主要摸索了限氧发酵阶段的供氧条件、2个阶段的转换时机及葡萄糖流加速率。优化后的VHY20双阶段发酵工艺为，发酵开始时先进行好氧发酵，14 h后将好氧发酵转换至限氧发酵，并将供氧条件设置为搅拌转速400 r/min、风量2 L/min,补糖速率控制在25 g/h。菌株和发酵过程优化后，缬氨酸产量为90.4 g/L,转化率为0.53 g/g葡萄糖，分别较优化前提高了7.8%和30.5%;乙酸和琥珀酸的积累量分别为2.7和1.2 g/L,较优化前降低了76.9%和95.4%。