青刺尖叶中改善大鼠良性前列腺增生的活性组分筛选

筛选青刺尖叶提取物改善大鼠良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)的活性组分并探讨其作用机制。采用丙酸睾酮诱导的去势大鼠模型,以非那雄胺和普乐安为阳性对照,评价青刺尖叶提取物(QCJ)及其大孔树脂各洗脱物低、高剂量组(1.8g生药/kg/d,5.4g生药/kg/d)的抗BPH活性。结果显示,QCJ及各组分均能改善大鼠BPH病理状况,其中,大孔树脂5%乙醇洗脱物(Fr.A)可使BPH大鼠血清前列腺酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PACP)含量降低22.78%(p0.01),双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)含量降低28.01%(p0.01);40%乙醇洗脱物(Fr.B)可减轻BPH病理组织形态改变,使BPH大鼠前列腺指数降低7.69%(p0.01),血清PACP含量降低32.91%(p0.01),DHT含量降低56.59%(p0.01)。各组分中Fr.B效果最好,能够改善BPH大鼠的前列腺指数增加、上皮细胞增厚等病理症状,其机制可能与抑制PACP和DHT的生成有关。     

山楂核各萃取组分对H2O2诱导氧化损伤细胞保护作用的比较及活性组分筛选

评价山楂核乙醇提取物及其各萃取组分对两种氧化损伤细胞的保护作用并筛选活性组分,为其开发利用提供数据支持。以H_2O_2诱导永生化的人角质形成(Ha Ca T)细胞和人胃黏膜上皮(GES-1)细胞为氧化损伤细胞模型,比较山楂核乙醇提取物(EE)及其各萃取组分对氧化损伤细胞存活率的影响,测定活性组分对氧化损伤细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响,并对活性组分大类成份进行分析。结果显示,EE及其乙酸乙酯萃取组分(EAF)和水萃取组分(WF)对H_2O_2诱导氧化损伤细胞均具有一定保护作用。其中,25μg/m L EAF可提高氧化损伤Ha Ca T细胞存活率21.23%,使细胞内SOD水平增加9.09%;25μg/m LWF可提高氧化损伤Ha Ca T和GES-1细胞存活率16.20%和23.61%,使细胞内SOD水平分别增加16.62%和17.38%,GSH-Px水平分别增加1.22倍和2.50%。大类成份分析表明,EAF主要含有糖(32.73%)、黄酮(15.70%)和木脂素(8.09%)等;WF主要含有糖(59.59%)和黄酮(1.14%)等。各组分中,WF对H_2O_2诱导氧化损伤Ha Ca T和GES-1细胞均具有保护作用,效果较好,其主要成份为糖,作用机制可能与调节细胞内抗氧化物酶水平有关,具有较好开发应用价值。     

山楂核抗氧化、抑菌活性物质的筛选和UPLC-Q-TOF/MS分析活性物质的化学成分

为了研究山楂核醇提物抗氧化和抑菌活性的有效物质及活性化学成分,通过评价DPPH、ABTS和羟自由基清除率、Fe3+还原能力和抑菌圈直径研究山楂核醇提物不同极性溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)萃取物质的抗氧化和抑菌活性,通过超高效液相色谱与飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)分析活性物质。结果表明,乙酸乙酯萃取物质在清除DPPH和ABTS自由基、Fe3+还原能力方面优于其他部位;水萃取物质在清除羟自由基能力方面表现最好,乙酸乙酯萃取物质次之;在抑菌活性方面,相同生药浓度下仅有乙酸乙酯萃取物质对金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。通过UPLC-Q-TOF/MS从最佳活性物质乙酸乙酯萃取物质鉴定出10个成分,主要为木脂素和醛类成分。由此可知乙酸乙酯萃取物质有较好的体外抗氧化活性和抑菌活性,推测其可能活性成分为木脂素类和醛类成分。     

5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮高分辨电喷雾串联质谱裂解规律对比研究

以5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮为例,运用高分辨电喷雾串联质谱在正离子模式下(HR-ESI-MS/MS)获得的碎片离子,根据一、二级质谱离子的精确质荷比,分别推导出两种黄酮可能的裂解途径,并比较多甲氧基、多羟基黄酮质谱裂解规律的异同。结果表明:在正离子模式下,5,6,7,4′-四羟基黄酮和5,6,7,4′-四甲氧基黄酮的一级质谱均可获得稳定的准分子离子。5,6,7,4′-四羟基黄酮的二级质谱碎片离子由准分子离子[M+H]+经RDA裂解及进一步脱水和(或)脱一氧化碳中性分子产生,直接由准分子离子脱水及一氧化碳中性分子获得的碎片离子丰度比较低;5,6,7,4′-四甲氧基黄酮二级质谱碎片即可由准分子离子[M+H]+直接经RDA裂解,还可先脱去乙烷或甲烷中性分子再经RDA裂解(1,3断裂)获得。此外,该化合物还有大量的碎片离子是由准分子离子[M+H]+分别经脱水、甲烷、乙烷或进一步脱甲基、一氧化碳而获得。两个化合物质谱碎片的比较结果表明,多甲氧基黄酮的二级质谱碎片裂解机制更复杂,碎片信息更丰富。该方法可为黄酮类化合物成分的快速定性分析提供支持,也可为黄酮类化合物体内代谢产物的LC-MS/MS鉴定提供依据。