乳酸菌细菌素Durancin GL对单增李斯特菌的抗菌活性及机制

单增李斯特菌广泛分布于肉类、禽类、蛋类、乳制品及蔬菜中,且适应能力强,即使在4 ℃的冷藏环境下仍可生长繁殖,是食品中主要的食源性致病菌之一。乳酸菌细菌素Durancin GL是由干酪中肠球菌产生的一种新型细菌素,对单增李斯特菌具有靶向抑制作用。本实验研究了Durancin GL对单增李斯特菌的抗菌活性及作用机制。通过最小抑菌浓度和抑菌动力学实验检测Durancin GL对单增李斯特菌的抑制作用,结合监测胞内物质泄漏、菌体存活情况以及形态学分析,探讨Durancin GL对单增李斯特菌的抑菌机制。Durancin GL对单增李斯特菌最小抑菌浓度为（2.5±0.4）mg/L,可引起李斯特菌细胞质泄漏,增加细胞外液电导率,导致菌体细胞死亡,从而发挥其抑菌活性。     

电子鼻检测玉米象不同虫态的技术研究

针对粮堆中储粮害虫玉米象检测技术落后,检测结果不可靠等问题,利用电子鼻对玉米象不同虫态及虫态组合进行检测,并采用主成分分析法(PCA)和判别因子分析法(DFA)对检测数据进行分析,结果表明:电子鼻可以对不同密度的玉米象成虫进行有效的识别,但当虫口密度高于20头/瓶时,无法进行区分;使用电子鼻检测玉米象不同虫态时,PCA分析法的重复间数据较分散,区分度不高,而DFA分析法可将各虫态有效区分;电子鼻检测玉米象混合虫态时,DFA分析法可将不同组合有效区分,而PCA分析法无法区分,因此将电子鼻检测结合DFA分析法用于玉米象不同虫态及虫态组合的检测是可行的。     

储藏期内转Bt基因稻谷对印度谷螟生长发育的影响（网络首发、推荐阅读）

对转Cry1Ab/Cry1Ac基因稻谷（华恢1号）及其非转基因亲本明恢63在储藏期内对害虫印度谷螟生长发育的影响开展研究。结果表明，转Cry1Ab/Cry1Ac基因稻谷对印度谷螟低龄幼虫（1至3龄幼虫）具有较强的致死作用。温度显著影响印度谷螟各虫态的发育历期和发育速度，以2%转基因稻谷糙米粉饲喂印度谷螟后发育历期显著延长。种群生长发育速率与温度关系的非线性拟合结果显示，印度谷螟发育起点温度为7.40~15.94 ℃，以2%转基因稻谷糙米粉饲喂印度谷螟发育起点温度为4.90~17.36 ℃。以上研究结果在理论上加深对转Bt基因稻谷生态安全的认识，在实践上为科学开发利用转Bt基因水稻提供理论支持。     

转Cry1Ab/Cry1Ac基因大米粉饲喂印度谷螟后的比较转录组分析（网络首发、推荐阅读）

转Cry1Ab/Cry1Ac基因作物可以有效防治害虫。以世界性的储粮害虫印度谷螟Plodia interpunctella (Hübener)为研究对象,借助高通量测序法研究试虫中与Bt毒蛋白密切相关的基因,以期初步揭示转Bt稻谷的杀虫作用机制。结果表明,在对印度谷螟非胁迫种群和转Bt基因大米粉胁迫种群分别进行转录组测序,经De novo组装后共得到37 246个Unigene,其中有23 310个Unigene获得注释。随后,通过比较分析上述两种品系试虫基因表达量,共筛选出34 466条显著差异表达的基因,其中在胁迫品系中有15 741条基因表达量显著上调,另有18 725条基因表达量显著下调。一方面大大扩充了针对该物种的基因信息,另一方面为转基因稻谷抗印度谷螟的相关机理研究提供了新思路。     

乳酸菌细菌素Durancin GL对冷鲜鸡肉中单增李斯特菌抑制效果研究

以乳酸菌细菌素Durancin GL处理冷鲜鸡肉,进行储藏试验。从感官评定、品质分析以及有害微生物抑制情况考察该细菌素对冷鲜鸡肉的防腐保鲜效果。试验结果显示:200AU/mL的细菌素保鲜液处理冷鲜鸡肉,可抑制单增李斯特菌的生长,减缓挥发性盐基氮(TVB-N)含量增加以及pH上升,减缓肉质劣变;在4℃储藏条件下,一级冷鲜肉存储期由4d延长至8d。表明该乳酸菌细菌素对冷鲜鸡肉延长储藏期具有积极效果。     

转基因稻谷Bt蛋白降解及长期取食对印度谷螟体内3种抗氧化酶活性的影响（网络首发、推荐阅读）

转Cry1Ab/Cry1Ac基因稻谷（华恢1号）可以用于储粮害虫印度谷螟的防治，前期研究表明在其短期取食含有Bt毒蛋白的稻谷后，其体内三种主要的抗氧化酶过氧化物酶（peroxidase, POD）、过氧化氢酶（catalase, CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活力会发生明显变化。聚焦储藏期间的特性开展研究，结果发现，转基因稻谷稻壳和糙米中Bt蛋白含量分别为5.534 μg/g和1.003 μg/g，在25 ℃下经过270 d，其降解率分别为67.3%和27.7%。利用酶活力测定方法研究长期取食转Bt稻谷所制大米粉对印度谷螟幼虫体内上述三种酶活性的影响，结果表明，在含有不同比例的转Bt大米粉饲喂印度谷螟12 d及连续饲养5个月后，其体内的SOD活力均受到了显著抑制。但是对于POD而言，在长期取食不同含量的转Bt大米粉后，印度谷螟体内POD活性与对照相比产生了显著提高。同时，在印度谷螟幼虫长期取食转Bt大米粉后，其体内CAT活力随着含Bt大米粉比例的提高而显著增强。另外，使用转基因大米粉连续饲养5个月的印度谷螟种群体内的保护酶活力同喂食12d后的酶活变化趋势一致。结果说明在长期取食含有Bt毒素的大米粉后，印度谷螟幼虫体内三种保护酶的增降趋势存在差异，这表明印度谷螟体内三种保护酶可能存在不同的调节机制来应对Bt毒素的胁迫，这对于转Bt作物的毒理和相关抗性机理研究提供了理论依据。     

乳酸片球菌素PA-1在大肠杆菌中的表达与纯化

为了实现该细菌素的外源表达,本实验首先利用聚合酶链式反应从乳酸片球菌PAF中扩增出乳酸片球菌素PA-1的结构和免疫基因,然后克隆到表达载体pGEX-6p-1,构建了N端含有GST-His-DDDDK标签的重组质粒pGEX/his-pedAB,然后转化进入大肠杆菌Rosetta（DE3）感受态细胞,经异丙基硫代半乳糖苷诱导,重组乳酸片球菌素PA-1在大肠杆菌胞内成功表达。表达的融合蛋白先经过镍亲合层析柱纯化,然后注入谷胱甘肽S-转移酶亲和色谱柱用肠激酶处理,释放出成熟的乳酸片球菌素PA-1。利用高效液相色谱和质谱技术检测乳酸片球菌素PA-1纯度。以单核细胞增生李斯特氏菌CMCC54004为指示菌,利用琼脂扩散法检验乳酸片球菌素PA-1活性。结果表明,携带GST-His-DDDDK标签的融合蛋白无活性,标签切除后其抑菌活性恢复,且其纯度达90%以上。