中蜂囊状幼虫病毒VP1基因的优化表达及其免疫原性分析

目的原核表达优化的中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)的VP1基因,并分析其免疫原性。方法根据大肠埃希菌密码子偏爱性对野生型CSBV VP1(wt VP1)基因进行优化(opti VP1),将基因wt VP1和opti VP1分别克隆至p GEX-6P-1原核表达系统,构建原核表达质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1,分别转化E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并对诱导温度、IPTG终浓度及诱导时间进行优化,诱导蛋白经Western blot鉴定;重组蛋白经GSH-琼脂糖凝胶层析纯化;分别用PBS、纯化的GST标签蛋白、纯化的重组蛋白及CSBV纯化病毒免疫小鼠,经间接ELISA法检验各组小鼠的血清抗体效价。结果优化后的VP1基因序列降低了密码子影响指数,提高了密码子适应指数;质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1经鉴定证明构建正确;最佳诱导表达条件为:IPTG终浓度0.8 mmol/L,30℃,220 r/min诱导8 h;诱导表达蛋白占菌体总蛋白百分比由wt VP1菌株(5.49±0.30)%提高至opti VP1菌株(59.7±0.51)%,纯化后纯度可达0.5 mg/ml;兔抗GST标签抗体及兔抗CSBV血清均与优化后的重组蛋白发生特异性反应;重组蛋白组小鼠二免后可产生较高水平抗体,明显高于PBS组和GST标签蛋白组(P0.05)。结论通过密码子优化实现了CSBV结构基因VP1的高效表达,表达蛋白可诱导小鼠机体产生特异性抗体,具有良好的免疫原性,为探讨CSBV感染的分子发病机制和制备抗CSBV病毒的多克隆抗体奠定了基础。     

旋膜式脱氧器的研究

一、概述锅炉用水除需要软化,脱除钙、镁离子以免结垢外,还必须脱除水中的溶氧,而且要求水中含氧量不得超过表1中所示数值。严格地说,凡能力在2(吨/时) 以上的锅炉,均应达到这一要求,否则水中的溶氧将造成锅炉锈蚀,从而导致一系列严重后果。通常采用的除氧方法有:(1)化学除     

±800kV特高压直流换流站设备红外热像带电检测技术应用探讨

结合±500kV常规直流换流站设备红外热像检测现场工作案例。对±800kV特高压直流换流站设备红外热像带电检测技术应用进行探讨。并提出相应的建议。     

试论中央空调系统清洗必要性及常规方法

中央空调风系统和水系统的清理，影响到室内空气质量同时也对系统的效能产生极大的影响。本文通过对中央空调系统冷冻水系统和风系统使用一定年限后的污染情况，从而分析中央空调系统的清理必要性及其方法。     

化学发光法测定轻质油中的痕量硫

采用化学发光法测定轻质油中的痕量硫 ,其定量检测下限为 0 .0 43mg·l-1。评价了方法的准确度 ,同时考察了样品的测量精密度。     

TEREX自卸车变速箱故障的判断

多数先进的施工运输车辆上的变速箱多采用电脑控制、全液压传递动力的型式。车辆在使用中会出现各种各样的故障,如判断不及时、不准确会造成机械损坏,既形响生产又造成经济损失。所以在工作中要尽量作到判断准确,下面就TEREX自卸车上采用的美国底特律Auison变速箱的故障判断方法作一简介。1．变速箱温度高造成变速箱温度高的原因有：①油位过高或过低。②缓行器使用次数过多。③离合器磨擦片损坏。④油压过低。⑤冷却系统有故障等。处理方法：当出现挂挡不走车、且变速箱温度高时,可作如下处理：①若是缓行器使用次数过多,则停车,…     

大冶铁矿尾矿中铁矿物在线回收工艺与生产实践

摘要:简介了大冶铁矿选厂入选原矿性质与大冶铁矿选厂工艺流程,大冶铁矿尾矿中主要矿物含量、铁物相分析及粒度组成,进行了在线尾矿中铁矿物的回收试验研究。在大冶铁矿选矿尾矿中,虽然全铁品位较低且磁性铁占有率也较低,但采用中磁粗选富集-中磁粗精再磨-弱磁精选工艺流程可获得铁品位合格的铁精矿。根据试验研究结果建设了尾矿再磨再选回收系统,生产实践表明,年可回收铁品位62.50%以上的铁精矿0.96万t,年创产值816万元,年利润344万元,且1.72年收回全部投资。既提高了矿产资源的利用率,又创造了可观的经济效益,还带来了明显的社会效益。      

阿加拉克露天矿下水平的合理开采工艺

露天采矿降低消耗的办法之一是减少必须排弃的废石量,或者在不作补充开拓工作的情况下增加可采出的矿石量。后一种办法可以用人工加固来加大露天矿非工作帮总的边坡角,但需要额外的材料消耗及劳动费用。推荐的新露天采矿法是在露天矿场下部留矿柱。留下的矿柱待其间的岩石剥离以后再行开采。这种开采方法的实质如下:沿露天矿深度分成上下两部分(图1中1与2)。     

用分段崩落法开采倾斜中厚矿体时提高出矿效率的途径

本文介绍了在同样条件下横巷扒矿与平巷扒矿相比矿块出矿效率的变化规律。就提高扒矿效率的因素而言,确定了横巷扒矿方案的合理使用范围,这在一定条件下,可显著提高分段崩落法的开采效率,在克里沃罗格矿区这种采矿方法方案比重已达64％。回采工作面电耙出矿效率Π_c 取决于电耙设备的技术生产能力Π_M 和二次破碎及溜