基质辅助激光解吸飞行时间质谱及毛细管电泳对基因工程产品─重组人表皮生长因子的质量控制研究

本文应用基质辅助激光解吸飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）测定基因工程产品一重组人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）的分子量，用毛细管电泳仪测定了其纯度，并得到用Ｇｌｕ－蛋白酶切后ｒｈＥＧＦ的质量肽图，其中８１％的肽段与理论值相符，无规则裂解只占８％。由此建立了一种对基因工程产品进行质量控制及研究蛋白质一级结构的新方法，此方法快速、简便，灵敏度极高，相对误差小于０．５％。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测定重组人白细胞介素—3(IL—3)等六种基因工程产品

本文应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI／TOF－MS）测定了重组人白细胞介素－3（IL－3）、人表皮生长因子（hEGF）等六种基因工程产品，建立了一种对基因工程产品进行质量控制的新方法，此方法稳定、快速、灵敏，准确度达0．3％，仅需fmol样品即可测定。     

QuEChERS前处理结合超高效液相色谱-串联质谱法同时检测茶叶中14种农药残留

建立了QuEChERS（Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged,Safe）前处理结合超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定茶叶中14种农药残留的方法。茶叶样品经含1%乙酸的乙腈提取,QuEChERS净化柱净化后直接进行UPLC-MS/MS测定。比较了4种QuEChERS净化柱对茶叶提取液的净化效果和农药残留的回收率,选取净化效果和回收率最好的净化柱进一步考察方法的基质效应、线性关系、回收率等。结果表明,方法的检出限为0.001~2.000 μg/L,定量限为0.003~5.000 μg/L;14种农药在相应浓度范围内呈良好的线性关系,决定系数R2为0.9926~0.9989。在100、500、800 μg/kg 3个添加水平下14种农药的回收率为71.2%~117.4%,相对标准偏差为1.1%~14.2%。该方法具有操作简单快速、灵敏度高、回收率好等优点,能够满足茶叶中多农残快速检测要求。     

用尺寸排阻色谱测定蛋白质的构象转化点

建立了用尺寸排阻色谱研究蛋白质构象改变转化点的方法,测定了核糖核酸酶A在尺寸排阻色谱系统中的分配系数Kd,并用荧光检测器监测了加热所导致的蛋白质内源性荧光变化,从而计算出了核糖核酸酶A的热变性转化温度.通过液相色谱梯度洗脱系统在线增加尿素浓度,测定Kd值的动态变化,计算出使溶菌酶发生变性的尿素溶液浓度.用所建立的方法绘制了蛋白质变性前后的尺寸排阻色谱工作曲线,探讨了溶液pH对核糖核酸酶A热稳定性的影响.     

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高效液相色谱法测定体外培养NB4、HL60细胞内及培养液中紫杉醇含量

本文采用反相高效液相色谱法测定了体外培养NB4、HL60细胞内及培养液中紫杉醇浓度，以炔诺酮为内标物，样品用乙醚在pH9.0条件下提取后进样，流动相为甲醇:水:乙腈（30:40:30），流速0.8ml/min，紫外检测波长230nm，线性范围20～320ng/ml，最低检测浓度为20ng/ml，日内、日间差异均小于10%。     

GC-TOF-MS技术快速鉴定抗风湿痛

应用高分辨GC-TOF-MS对抗风湿痛胶囊中的未知西药成分进行快速鉴定。使用不同极性的有机溶剂进行提取，将提取物分别离心，取上清液进行气质联用分析，并借助Nist2002数据库进行鉴定，用精确分子质量和元素分析进行确证。分析发现，此抗风湿痛胶囊中添加了甲氧苄氨嘧啶、磺胺甲恶唑、安定、可待因、茶碱等5种西药。用液质联用仪对甲氧苄氨嘧啶、磺胺甲恶唑进行了定量分析。该方法可用于未知混合物的分析，同样适用于中药制剂中其他西药成分的快速检出。     

毛细管电泳-激光诱导荧光检测测定脑啡肽方法的建立及其应用

建立脑啡肽(ENK)柱前荧光素异硫氰酸盐(FITC)衍生化,毛细管区带电泳-激光诱导荧光检测(CZE-LIF)测定的方法,并对FITC衍生化的影响因素和毛细管电泳的分离条件进行优化.毛细管电泳的分离条件为:75 μm(内径)×67 cm石英毛细管柱;60 mmol/L pH 9.4 Tris-硼砂缓冲液;电压350 kV/cm;柱温25℃;压力进样3 s;LIF检测,λex/λem为488/520nm.以脑啡肽(ENK)标准品的浓度和电泳峰面积建立标准工作曲线,得到回归方程A=0.494 66 0.085 92c,线性范围是35.2～563.1 fmol/μL,(n=7),r=0.998 5,检测限为1.6×10-15 mol/μL(S/N=3).大鼠脑部微透析液样品中脑啡肽应用此方法测定含量为7.4×10-15 mol/μL.     

ABI 473A蛋白序列仪电磁阀控制系统技术特点及检修技术

本文主要介绍ABI473A蛋白序列仪电磁阀控制系统常见和特殊故障的检修技术及电磁阀控制系统技术特点。