重组人肿瘤坏死因子中二硫键的测定

本文通过电喷雾质谱对流基乙醇还原二硫键的过程进行了动态监测。通过对还原过程中质量数变化的监测，确定了重组人肿瘤坏死因子中二硫键的数目，正确区分正常表达的重组人肿瘤坏死因子和基因工程改构产品，为基因工程产品鉴定提供了一条新的途径。蛋白质中的二硫键在蛋白质高级结构的稳定性及生物学活性中都有着重要的作用［1］，研究二硫键的结合情况始终是生化领域的一个重要课题。二硫键是两个半胱氨酸残基之间形成的一个化学健，它使多肽键的不同区域紧密连接，维持分子折叠结构的稳定性。分子中是否存在二硫键，以及二硫键是否正确结合在蛋白质化学中是一个十分重要的问题。人肿瘤坏死因子（hTNF）是近年来研究较广泛的一种细胞因子，其一级结构中第69位和101位为半胱氨酸，在分子内形威一对二硫键［2］。在hTNF的蛋白质工程研究中，有人将69位和101位Cys的分别用AsP和Arg取代，获得改构的TNF仍具有TNF的生物学活性。因此鉴定rhTNF中是否存在二硫键成为区分rhTNF和改构TNF的重要途径。     

蛋白质组学中的有机质谱

本文综述了基体辅助激光解析电离飞行时间质谱，电喷雾电离串联质谱的发展及其在蛋白质组学中的应用。     

MALDI-TOF-MS分析基因重组糖蛋白rhEPO的一级结构

Matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) is a rather new ‘soft ionization’ techniques. Because of its high sensitivity and accuracy, it has been widely used in detection and characterization of macromolecules such as peptides, proteins and olignucleotides. It also has been applied successfully in the analysis of posttranslational modification of proteins, such as phosphorylation and glycosylation. Compared with the conventional chemical methods, mass spectrometry is simple, rapid and does not require radiolabeling. In this research, a systematic method to analyse glycoprotein by MALDI-TOF-MS was developed. A practical sample--recombinant human erythropoietin was analysed by the method. The molecular weight, content of carbohydrate and glycosylation sites of the glycoprotein were determined by MALDI-TOF-MS, combined with the endo-glycosidase digestion and peptide mapping. The experimental result shows that MALDI-TOF-MS is a very powerful technique in the characterization of glycosylation proteins.     

本芴醇的质谱研究:快原子轰击、电喷雾电离和电子轰击质谱的比较

本文研究了本芴醇的 FAB- MS和 ESI- MS,并与 EI- MS的研究结果进行了比较。研究结果表明 ESI是质谱电离技术中最软的电离技术 ,它与 EI和FAB的裂解方式不同。本芴醇在 FAB- MS的主要裂解途径和在 EI- MS中的相似 ,均是本芴醇侧链上的胺基发生 β开裂 ,生成基峰 M/ Z1 42的 CH2 =+ N( C4 H9) 2 离子。 ESI-MS分析时通常获得 M/ Z52 8的 [M+ H]+ 离子 ,分析时增加锥孔 (进样孔 )电压 ,本芴醇在源内发生 CID,首先发生脱水反应 ,然后继续裂解。     

基质辅助激光解吸飞行时间质谱及毛细管电泳对基因工程产品─重组人表皮生长因子的质量控制研究

本文应用基质辅助激光解吸飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）测定基因工程产品一重组人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）的分子量，用毛细管电泳仪测定了其纯度，并得到用Ｇｌｕ－蛋白酶切后ｒｈＥＧＦ的质量肽图，其中８１％的肽段与理论值相符，无规则裂解只占８％。由此建立了一种对基因工程产品进行质量控制及研究蛋白质一级结构的新方法，此方法快速、简便，灵敏度极高，相对误差小于０．５％。     

临床质谱学的最新进展:质谱成像方法及其应用

质谱成像技术将基质辅助激光解吸电离质谱的离子扫描与图像重建技术结合,直接分析生物组织切片,产生任意质荷比(m/z)化合物的二维或三维分布图。综述质谱成像原理、方法学及应用发展趋势。     

应用MALDI-TOF-MS鉴定重组人粒／巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）的结构

人粒／巨噬细胞集落刺激因子(hGM—CSF)的主要生物学功能是刺激髓祖细胞增殖和成熟，提高中性、嗜酸性粒细胞细胞和巨噬细胞的数量。在临床上rhGM-CSF用于癌症化疗而引起的白细胞减少症，骨髓移植等疾病，以及作为爱滋病的辅助药以增强病人的脊髓功能。由于rhGM-CSF临床上应用比较广泛，     

应用质谱和液──质联用研究抗疟新药苯芴醇在人体的代谢

苯芴醇是军事医学科学院邓蓉仙教授等研制的一种抗疟新药,它的化学名是β－二丁胺苯－［２,７－二氯－９－（对氯苯亚甲基－４－芴］乙醇。由于该药在现有的抗疟药中具有全新的化学结构,临床上治疗恶性疟的疗效好和毒副反应低等特点,已于１９９０年获国家发明一等奖。研制成的含有苯芴醇与蒿甲醇的复方片剂,己与瑞士Ｃｉｂａ－Ｇｅｉｇｙ公司合作在世界上６０多个国家申请了它的剂型销售专利。但至今未见有苯芴醇在人体内代谢变化的研究报告。为了解苯芴醇在人体内是否发生生物转化,本研究应用质谱和液一质联用等技术对苯芴醉在人体内…     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测定重组人白细胞介素—3(IL—3)等六种基因工程产品

本文应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI／TOF－MS）测定了重组人白细胞介素－3（IL－3）、人表皮生长因子（hEGF）等六种基因工程产品，建立了一种对基因工程产品进行质量控制的新方法，此方法稳定、快速、灵敏，准确度达0．3％，仅需fmol样品即可测定。