拮抗油菜菌核病的海洋细菌筛选及其活性物质的分子检测

以油菜核盘菌为病原指示菌,对1021株海洋细菌进行抗菌筛选,从中得到了144株具抗菌活性的菌株.在建立筛选新型特异性拮抗化合物资源库的同时,重点分析了筛选的302株海洋假单胞菌,对其中具有较强抗菌活性的19株假单胞菌进行了产活性物质合成基因的分子检测.结果表明,菌株1A06832和SH-46扩增获得了2,4-二乙酰基间...     

海洋细菌抗菌筛选及深海独岛枝芽胞杆菌A493活性物质分离鉴定

以水稻黄单胞菌等植物病原菌为指示菌,采用平板对峙法对411株海洋细菌进行了抗菌筛选,初筛获得具有抗菌活性的海洋菌株81株,复筛获得具有稳定抗菌活性的菌株7株,最后通过测定抗菌谱,得到1株抗菌谱特异并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽胞杆菌（Virgibacillus dokdonensis）A493.对水稻白叶枯病害的温室生防实验表明,经过A493无菌发酵上清波处理,水稻生长20 d后对水稻白叶枯病害的防治效果达到了66.7％,且对水稻的正常生长无不良影响.通过离子交换色谱法提取,再经2次薄层层析硅胶板回收分离,得到了纯化活性物质,经过ESI-MS＂分析,初步判断活性物质分子量为317 Da.Doskochilova系统纸层析结果显示活性物质很可能为新的氨基糖苷类物质.     

深海独岛枝芽孢杆菌A493产活性物质特性与发酵条件优化研究

以一株抗菌谱较窄并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽孢杆菌(V.dokdonensis)A493为研究对象,研究了其产活性物质特性及发酵条件的优化。A493产抗菌活性物质可以耐受100℃的高温,在pH值4～10和紫外照射环境中活性稳定,可以通过3kDa的超滤管,对蛋白酶不敏感,只能溶解于水和甲醇。酸沉淀和硫酸铵沉淀实验结果排除了活性物质是脂肽类物质的可能性,初步研究显示该活性物质可能是极性较强的水溶性活性小分子新化合物。确定A493最佳发酵条件为:接种菌龄12h、接种量1%、发酵时间48h、发酵温度28℃、培养转速180r·min-1、250mL锥形瓶中的装液量为70mL。优化后,其单位体积发酵液抑菌效果提高了18.7%,活性物质对水稻黄单胞菌的抑菌效价相当于15.6μg·mL-1的标准链霉素。     

深海枝芽胞杆菌A493产生的新活性物质Z11的抗菌机理

以一株抗菌谱窄的深海枝芽胞杆菌（Virgibacillus dokdonensis）A493为研究对象,对其产生的新的氨基糖苷类抗菌活性物质Z11抑制水稻黄单胞菌的浓度范围和抗菌作用机理进行了研究。结果表明Z11抑制水稻黄单胞菌的浓度范围为14-56μg·mL^-1;机理研究显示Z11不改变水稻黄单胞菌细胞膜的通透性,但能影响其蛋白质的合成及细胞壁合成关键酶N-乙酰葡糖胺-1-磷酸尿苷酰转移酶（GlmU）的活性。     

海洋细菌Bacillus mojavensis 1A00437 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及功能研究

Bacillus mojavensis 1A00437是分离自太平洋的一株芽胞杆菌,成功克隆了该菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因并在原核系统获得高效表达。测序结果表明,该基因的ORF全长681bp,编码一条226个氨基酸的蛋白,蛋白大小25.3kDa。该酶的最适pH值及最适反应温度分别为6.5、60℃。研究表明,1mmol·L-1 Ca2+、Mn2+可显著抑制该重组酶活性,该重组酶对稻瘟病菌无抗性,但对小麦纹枯病菌及水稻纹枯病菌具有明显抑制作用。饲料体外消化实验表明,该重组酶对稻糠、玉米粉具有显著降解效果。为该酶用作抗真菌剂及饲料添加剂提供了理论基础。     

苏云金芽孢杆菌工程菌芽孢形态发生的特征

苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白的表达及晶体的形成与芽孢的发育有关。本文利用电子显微镜观察了苏云金芽孢杆菌工程菌不同发育时期芽孢的形态结构特点。结果表明，整个芽孢的发育过程依次经历了前芽孢、双层膜芽孢、初生芽孢壁形成、芽孢衣与孢外壁形成以及皮层形成等过程。这与一般芽孢的发育过程不同，即芽孢衣与孢外壁的形成时期早于皮层；另外发现孢外壁包被有膜结构，这表明杀虫晶体蛋白的超量表达可能会影响到芽孢的发育。     

农药残留检测新方法研究进展

介绍了农药残留检测的步骤与方法.农药残留检测主要分为4个步骤:样品的提取、净化、浓缩和检测.提取方法主要有震荡法、索式提取法,固相微萃取法、超临界流体萃取法、快速溶剂萃取法等.净化方法主要有:液-液分配净化法、柱层析法、磺化法等.浓缩方法主要有:蒸发浓缩、反渗透浓缩、K-D浓缩仪浓缩等.检测方法主要有:气相色谱-质谱联用法、荧光分析法、酶抑制法、免疫分析法、生物传感器检测法、红外光谱法、拉曼光谱法等.评述了这些方法的优点与缺陷,提出了今后的发展方向.     

深海微生物絮凝剂HBF-3的剂型研究

对深海微生物絮凝剂HBF-3的剂型进行了研究。结果表明,以5％蔗糖为保护剂,采用冷冻干燥技术将发酵液制成固体剂型,冻干的HBF-3能够迅速复溶于水,絮凝活性为82.4％,维持了较高的絮凝活性;采用旋转蒸发浓缩将发酵液制成液体剂型,HBF-3浓缩液按浓缩倍数稀释后的絮凝活性与初始发酵液相比,变化不大;在液体剂型HBF-3...