钙调素依赖型蛋白激酶在烟草中的免疫定位

应用钙调素依赖型蛋白激酶（ＣａＭＫ）抗体从免疫学上研究了ＣａＭＫ在烟草不同组织中的分布规律。结果表明ＣａＭＫ主要分布于发育早期的花药、发育中的胚珠和幼胚、侧根原基、芽的顶端分生组织和叶原基、成熟叶片中的叶肉细胞及维管束中，在叶片表皮毛顶端细胞气孔保卫细胞中也有大量的ＣａＭＫ分布。成熟的茎和根部分没有明显的ＣａＭＫ分布。烟草中ＣａＭＫ的分布规律与前人报道的有关ＣａＭ的分布规律一致，显示ＣａＭＫ介导的     

拟南芥钙调素结合蛋白激酶的克隆和特性分析

通过筛选拟南芥cDNA文库结合RACE的方法，克隆了一个全长cDNA-AtCBK1.Northem杂交和mRNA原位分析表明该基因在生长旺盛的部位和维管组织中大量表达。利用昆虫细胞表达系统，表达并纯化了重组蛋白AtCBK1，钙调素结合实验和自磷酸化、底物磷酸化分析直接证明了其酶活性受钙/钙调素调控，毛细管电泳检测其自磷酸化氨基酸为苏氨酸。系统进行分析推测AtCBK1可能来源于一个古老的CRK，与动物的CaMK在进化上可能来自不同的祖先。结果充分说明AtCBK1编码一个拟南芥中全新类型的钙调素结合的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。