异三聚体G蛋白在细胞外钙调素调控rbcS基因表达中的作用

以转基因烟草悬浮培养细胞为材料,对异三聚体Ｇ蛋白在胞外钙调素（ＣａＭ）促进ｒｂｃＳ基因表达跨膜信号转导中的作用进行了研究．细菌毒素实验表明,Ｇ蛋白激活剂ＣＴＸ可以促进转基因烟草ｒｂｃＳ基因表达,而其抑制剂ＰＴＸ则抑制ｒｂｃＳ基因表达;同时证实ＣＴＸ可以恢复被ＣａＭ抗血清抑制的ｒｂｃＳ基因表达,而ＰＴＸ可以抑制外源ＣａＭ促进的ｒｂｃＳ基因表达,通过提纯包埋有ＧＴＰａｓｅ活性测定荧光底物的正向型质膜囊     

绒毡层乌氏体在Ca2+运输中的作用

利用焦锑酸钾沉淀法研究了小麦花药发育过程中Ｃａ＾２＋的分布,四分体末期,在绒毡层内表面、药室和花粉的表面均分布的携带Ｃａ＾２＋的乌氏体,并且乌氏体和花粉的表面相接触,分表面开始有Ｃａ＾２＋的积累,单核花粉期,其药室内分布有大量携带Ｃａ＾２＋的乌氏体,花粉表面的Ｃａ＾２＋境我,成熟花粉时期,萌发和花粉管的生长,Ｔｉｒｌａｐｕｒ等人的应用荧光标记方法研究了花粉发育过程中花药Ｃａ＾２＋的分布,认为Ｃａ＾     

导管分子程序化死亡过程中Ca~(2+)的时空变化

利用焦锑酸钾沉淀法研究了辣椒叶片导管分子程序化死亡（ＰＣＤ）过程中Ｃａ２＋分布的变化．在导管分子形成初期，液泡和细胞核占据细胞的大部分体积，Ｃａ２＋主要分布在细胞间隙和细胞壁上；当壁次生加厚开始后，液泡、细胞核与其他细胞器解体，细胞内Ｃａ２＋明显增多；细胞质进一步解体，Ｃａ２＋在未进行次生加厚的细胞壁上明显增多，而次生加厚带上非常少；随着细胞质更进一步的消失，Ｃａ２＋主要分布于未次生加厚的细胞壁侧，次生加厚带上仍然非常少；在细胞内物质彻底消失后，Ｃａ２＋在次生加厚带部位上分布增加，而在未次生加厚的壁上减少．观察结果表明：在导管分子ＰＣＤ的初期、细胞壁次生加厚期和成熟期，Ｃａ２＋的分布发生时空变化，可能表明它对细胞壁次生加厚具有调节和提高 Ｃａ２＋运输效率的作用．     

部分抑制CDK4基因的表达导致V79-8细胞的G1期的延长

Ｖ７９－８细胞是一个没有可测定Ｇ１和Ｇ２期的变异细胞株,其母系细胞Ｖ７９有Ｇ１期但没有Ｇ２期,为了探讨Ｖ７９－８的Ｇ１期缺乏是否与ＣＤＫ４的调控有关,研究了ＣＤＫ４对其细胞周期的影响,构建反义ＣＤＫ４质粒转染Ｖ７９－８细胞筛选得到Ｖ７９－８－ａｓＣＤＫ４细胞,通过研究Ｖ７９－８－ａｓＣＤＫ５与对照组细胞２的细胞２生长曲线,测定其细胞的ＧＴ（细胞倍增时间）用ＦＣＭ测定细胞２周期中各个周期时相所占的比     

维甲酸对人腹主动脉平滑肌细胞增殖的影响

通过免疫组织化学和电子显微镜的方法鉴定了原代培养的人腹主动脉平滑肌细胞且研究全反式维甲酸对其增殖的影响,发现ａｔＲＡ使ＳＭＣ的增殖速度变慢,经ａｔＲＡ处理的细胞中ｃｙｃｌｉｎＤ１,ＣＤＫ４的表达分别降低了３９％和３８％,ｃ－ｍｙｃ基因的表达的平降低了４３．６％,而平滑肌牧场划的ａ－ａｃｔｉｎ的表达不受影响。说明ａｔＲＡ可能通过降低细胞中ｃ－ｍｙｃ,ＣＤＫ４,ｃｙｃｌｉｎＤ１的基因表达水平而抑制ＳＭ     

PKCα反义RNA对乳腺癌细胞增殖及cyclinD1和CDK4表达的影响

ＰＫＣ,ｃｙｃｌｉｎ和ＣＤＫ基因直接参于调控细胞的增殖与分化,因此它们在细胞癌变中的作用已成为重要的研究课题。利用反义ＲＮＡ技术抑制ＰＫＣａ基因的表达,然后观察分析了乳腺癌细胞增殖的变化以及对ｃｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４基因表达的影响。     

大鼠胰腺β细胞内的钙库诱发钙信号

以单个大鼠胰腺β细胞为实验对象,用显微荧光法测量不同刺激下的钙信号,有外Ｃａ＾２＋条件下,分别以葡萄糖、ＫＣｌ和甲苯磺丁脲（ｔｏｌｂｕｔａｍｉｄｅ）刺激细胞,均能导致细胞内自由Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高,无外钙条件下,５ｍｍｏｌ／Ｌ咖啡因（ｃａｆｆｅｉｎｅ）或乙酰甲胆碱（ＭＣｈ）亦能独立地导致［Ｃａ＾２＋］ｉ升高,说明β细胞内存在ＩＰ３型和ｒｙａｎｏｄｉｎｅ型两类钙库,咖啡因和乙酰甲胆     

钙调素mRNA在烟草花药发育过程中的原位定位

利用ＲＮＡ原位杂交技术，以地高辛标记的反义ＲＮＡ为探针，研究了烟草花药发育过程中钙调素ｍＲＮＡ时空分布特点。烟草花药各个不同发育阶段均有钙调素ｍＲＮＡ的分布，但表达水平有明显的时空差异。花药发育早期，钙调素ｍＲＮＡ表达很强，主要分布于表皮，绒毡层和药隔和薄壁细胞等，尤其是即将进行减数分裂的小孢子母细胞核部位和减数分裂时期的染色体部位有较多的ｍＲＮＡ积累，随着花药的发育，药壁和花粉中的表达量逐渐减弱     

表达cryIA/gna双价抗虫基因烟草兼抗棉铃虫和蚜虫

利用人工合成的、密码子优化后的雪花莲凝集素（ＧＮＡ）基因,与人工合成的ＣＦＭ ｃｒｙＩＡ构建了双价抗虫基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得２８株卡那酶素抗性植株,经ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹检测,证实了双价抗虫基因在烟草基因组中的整合,转基因烟草杀棉铃虫试验表明,４０％转基因烟草植株对棉铃虫具有高抗性;Ｂｔ杀虫蛋白ＥＬＩＳＡ检测获得与虫试较一致结果,抗虫性较强株Ｋ１１号ＣｒｙＩ     

genistein抑制人TNF-α诱导的猪内皮细胞对人单核细胞和自然杀伤细胞的黏附

研究了蛋白质酷氨酸磷酸化在ｈＴＮＦ－α诱导猪主动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）黏附分子Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）和血管细胞黏附分子－１（ＶＣＡＭ－１）表达以及在增强人外周血单核细胞（ＰＢＭｏ）和自然杀伤细胞（ＰＢＮＫ）黏附中的作用,以选择性的蛋白质酷氨酸激酶（ＰＴＫｓ）抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ预处理ＰＡＥＣ,剂量依赖性也抑制了ｈＴＮＦ－α增强的ＰＡＥＣ对ＰＢＭｏ和ＰＢＮＫ的黏附。这种抑制作用发生在     

VK3诱导的植物细胞凋亡及其机理

ＶＫ３可诱导烟草细胞的凋亡,表现为：染化体凝集,凋亡小体形成,ＤＮＡ末端断裂、降解形成梯状电泳,此过程伴随特异核酸酶的激活,其活性依赖于Ｃａ＾２＋,Ｍｇ＾２＋,可被Ｚｎ＾２＋和ＥＤＴＡ（Ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ）抑制。ＤＮＡ降解可被ＤＥＶＤ（Ａｃ－Ａｓｐ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－ａｌｄｅｈｙｄｅ）抑制。核纤层蛋白降解为３５ｋｕ片段,ＤＥＶＤ,ＰＭＳＦ（Ｐｈｅｎｙｌｍｅｔ     

一种新的红细胞源性降压因子的作用机制

研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子（ＥＤＤＦ）的降压机制,重点探讨其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响,以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐静脉ＶＳＭＣ（ＨＵＶ）,钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）和正常对照Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜培养的ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）「Ｃａ＆２＋」ｉ及（「Ｃａ＾２＿」ｎ）的变化;用流式细胞仪测定     

红树科6属cpDNA和nrDNA序列相对速率检验及分歧时间估计

基于红树科６属１０种及外类群的ｃｐＤＮＡｍａｔＫ基因和ｒｂｃＬ基因序列以及ｎｒＤＮＡＩＴＳ区序列,分别构建了分子系统发育树,对不同系统发育树中有关分支间的核苷酸序列置换速率进行了差异显著性检验,根据相对速率检验结果,结合现有分子进化资料,推算属间的首次分枝时间为１３２．２５Ｍａ前,分布于内陆的竹节树族９除竹节树外）与分布于海红树族间的平均分歧时间为６４．１３Ｍａ前、而陆生的大叶竹节树和旁杞木间的分     

人外周血单个核细胞不同亚群对猪内皮细胞的粘附作用

细胞介导的免疫应答是异种器官移面临的主要障碍,细胞粘附是细胞间相互识别的第一步。采用流式细胞术粘附测定法研究了人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中单核细胞（Ｍｏ）、自然杀伤细胞（ＮＫ）和Ｔ淋巴细胞（Ｔ）对猪主动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）粘附的差异性,以及人细胞因子γ－干扰素或／和肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）预刺激ＰＡＥＣ２４ｈ对ＰＢＭＣ不同亚群粘附的影响。ＰＢＭＣ不同亚群对ＰＡＥＣ粘附能力大小以Ｍｏ,     

一个东亚钳蝎K+通道阻断剂cDNA的克隆和序列分析

蝎毒液中的Ｋ＾＋通道阻断对于研究细胞特定Ｋ＾＋通道的药理学特性和生理学作用具有生要的价值。根据已报道的一种Ｃａ＾２＋激活Ｋ＾＋通道阻断剂ＢｍＰ０１的氨基酸序列设计１对“背对背”筒并引物,运用反向ＰＣＲ策略从中国东亚钳蝎毒腺组织中首次克隆到其全长ｃＤＮＡ,     

经络物质基础及其功能性特征的实验探索和研究展望

人体经络穴位的物质基础是以结缔组织为基础,连带其中的血管,神经丛和淋巴管等交织而成的复杂体系。与穴位位置相对应的深层组织结构中,富集有Ｃａ,Ｐ,Ｋ,Ｆｅ,Ｚｎ,Ｍｎ等的元素。这个物质基础中的液晶态胶原纤维具有高效率传输红外光的特征波段。     

膜结合型巨噬细胞集落刺激因子介导的内吞及其半衰期

膜结合型巨噬细胞集落刺激因子（ｍ－Ｍ－ＣＳＦ）是巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）的异型体,兼有粘附分子和反向传导信号的作用．以ｍ－Ｍ－ＣＳＦ高表达的Ｊ６－１细胞系为模型,研究了重组人 Ｍ－ＣＳＦ可溶性受体（ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ－ｓＲ）与 ｍ－Ｍ－ＣＳＦ的结合、内化和再循环．结果显示： ｍ－Ｍ－ＣＳＦ与 ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ－ｓＲ的结合具高亲和性（ Ｋｄ＝ １．７８×１０－１２ ｍｏｌ／Ｌ）,且 ｍ－Ｍ－ＣＳＦ能介导能量和温度依赖的 ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ－ｓＲ内化（ｔ_１／２＝ ２０ｍｉｎ）;内化的 ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ－ｓＲ能以 ｍ－Ｍ－ＣＳＦ结合的形式回到细胞表面,表明： ｍ－Ｍ－ＣＳＦ有受体样介导内化和再循环作用．用间接免疫荧光法和流式细胞仪测定了４株白血病细胞系和正常人脐血单个核细胞的ｍ－Ｍ－ＣＳＦ、膜结合型Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ、胞质和胞核Ｍ－ＣＳＦ及胞质和胞核Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ的半衰期,结果显示：４株白血病细胞系的各种Ｍ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ半衰期均长于正常人脐血单个核细胞相应Ｍ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ的半衰期,提示：白血病细胞降解Ｍ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ的速率明显降低;胞内Ｍ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ－Ｒ在瘤细胞中的作用值得研究．     

烟草花叶病毒及番茄花叶病毒弱毒疫苗N14基因组重组体的构建与侵染性分析

用基因交换的方法将烟草花叶病毒普通株（中国分离物,ＴＭＶ－Ｃｖ和番茄花叶病毒弱毒疫苗Ｎ１４基因组的运动蛋白（ＭＰ）、外壳蛋白（ＣＰ）基因编码区和３＇非编码区嵌合于Ｎ１４和ＴＭＶ－ＣＶ ５＇非编码区和复制酶基因的下游,构建重组病毒克隆ｐＴＮ和ｐＮＴ,并进行体外转录和烟草侵染试验结果 ｐＴＮ和 ｐＮＴ体外转录物对烟草均具侵染性：前者感染枯斑三生烟（ Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔｏｂａｃｕｍ ｃｖ．Ｓａｍｓｕｎ ＮＮ）,等量感染的枯斑形成数比 ＰＴＭＶ－Ｃｖ少;感染普通烟（ Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔｏｂａｃｕｍ ｃｖ． Ｈｕａｎｇｍ－ｉａｏｙｕ,黄苗榆品种）,出现典型系统症状,但叶片畸形率较低．后者感染枯斑三生烟,等量感染的枯斑形成数比ｐＮ１４多;感染普通烟仍不出现系统症状．结果表明：重组病毒ＴＮ和ＮＴ仍能在试验用烟草中增殖,前者在普通烟上基本表现为ＴＭＶ－Ｃｖ的强病毒性状,后者在普通烟上表现为Ｎ１４的弱病毒性状; ＴＭＶ－ＣＶ和 Ｎ１４的复制酶与 ＭＰ, ＣＰ和 ３＇非编码区之间为非严紧型连接,两者在类似的各亚基因组之间可进行功能互补．初步推测,Ｎ１４复制酶编码基因的突变区对Ｎ１４的致弱起主要作用;其运动蛋白编码基因的突变区对被侵染烟草     

光合放氧中心结构和放氧机理的新模型

目前在放氧中心的结构和放氧机理方面均存在许多重要问题待解决。结合最新研究成果，提出了放氧中心结构和放氧机理新模型，在新结构模型中，２个Ｈ２Ｏ分子不对称地结合于“Ｃ”形结构开口端２个低价的Ｍｎ＾Ⅱ１和Ｍｎ＾Ⅲ４上，并保持较大距离；２个组氨酸的咪唑环通过Ｎ原子与２个高价的Ｍｎ＾Ⅳ２，Ｍｎ＾Ⅳ３结合；Ｃｌ结合于Ｍｎ＾Ⅲ４，并与Ｃａ相连；Ｃａ通过Ｏ桥和ＣＯＯ－相连使２个Ｍｎ２０２单元保持特定空间构型。整个     

小鼠胸腺髓质型CD8单阳性细胞两个亚群功能比较

ＴＣＲαβ＾＋ＣＤ４＾－ＣＤ８＾＋细胞为异质性细胞群体,可能还要经历表型乃至功能的进一步成熟。利用细胞表型配伍分析,将髓质型ＣＤ８ＳＰ细胞分为７个亚群,并推测其表型成熟的前后顺序。为了进一步印证发育过程,分离纯化６Ｃ１０＾－ＣＤ６９＾＋和６Ｃ１０＾－Ｑａ－２＾＋ＣＤ８ＳＰ细胞亚群,按其表型,分别代表髓质ＣＤ８ＳＰ细胞发育成熟过程的早中期和最后阶段,比较它们之间是否存在功能差异,并且以脾脏ＣＤ８＾Ｔ