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从假菠萝麻叶汁中用乙醇分部沉淀法得到一种蛋白酶,对酪蛋白有强烈的水解活性,经Sephadex G-100柱层析和SP-Sephadex C-50离子交换柱层析等步骤纯化,可得到六角形结晶。结晶酶液经PAGE圆盘电泳,每条胶柱上只显示一条蛋白带,其活性在pH4。5-10、55℃范围内较稳定,最适pH8.5最适温度50℃,Km(酪蛋白)值为0.185%(W/V)。用SDS-PAGE和Sephadex 相似文献
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21科41种(变种)植物叶片几丁质酶系的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
对广州地区常见的21科41种(变种)植物叶片几丁质酶系研究的结果表明,所有受试植物都具有几丁质酶活性。几丁质酶不仅存在于被子植物的双子叶植物和单子叶植物中,而且也存在于裸子植物及蕨类植物中。几丁质酶活性及比活性均较高的有蕹菜、葱、蕨类植物、蒜、茄科植物、玉米、菜豆、番木瓜等。植物一般都具有两种几丁质酶:外切酶和内切酶。几丁质外切酶活性及比活性均较高的有蕨类植物、葱、茄科植物等。几丁质内切酶活性及比活性均较高的有蕹菜、裸子植物等。不同植物几丁质外切酶与内切酶的比例相差较大。有些植物的几丁质酶系以外切酶为主,如茄科植物、大部分豆科植物、番木瓜等;有些植物以内切酶为主,如裸子植物、伞形科植物、蕹菜等;有些植物的外切酶与内切酶含量相差不大。 相似文献
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剑麻蛋白酶的分离纯化及其部分特性的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用乙醇分步沉淀和 DEAE-纤维素柱层析,可从剑麻 Agave sisalana 叶汁中分离到一个均一的蛋白酶组分,其结晶为平面六边形。该酶可为半胱氨酸和 EDTA 所激活,受 PCMB(p-chloromercuribenzoatc)、DTNB(5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic acid))及 Hg~(2 )、Ag~( )、Cu~(2 )的可逆抑制和碘乙酸(pH 7.5)的不可逆抑制。该酶以酪蛋白为底物时,酶反应的最适 pH 值约为7.5,最适温度为50℃,Km 值为0.0625%酪蛋白,该酶在45℃(含45℃)以下较为稳定。且在6.0—10.0的 pH 值范围内稳定。 相似文献
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以壳聚糖为载体,成二醛为交联剂将木瓜蛋白酶固定化。5%戊二醛在4-6℃下处理载体5h,加酶液(3.5mg/mL蛋白,pH7.2)固定12h,活力回收达32%,作用于酪蛋白的半衰期为36天,其表观K_m(酪蛋白)值为0.075%(W/V),溶液酶的K_m值为0.086%;最适pH7.0~7.5,溶液酶为7.0~8.5。固定化酶在pH8.5以下,溶液酶在9.0以下活力稳定。固定化酶在45℃以下,溶液酶在75℃以下稳定。用6mol/L脲洗脱固定化酶4次(5.5h)活力仍有54.5%。用固定化酶处理啤酒浊度比对照下降了1.5-3.7倍,蛋白质含量下降了44%,冷藏(4℃)120天无冷混浊现象发生并保持了啤酒原有风味和理化性状。 相似文献
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尼龙经CaCl_2和H_2O的甲醇溶液处理,稀HCl水解用戊二醛交联以制备固定化木瓜蛋白酶。在溶液酶浓度为1mg/mL pH7.5—8.0、4—15℃条件下固定3h,活力回收42.5%,相对活力46%,偶联效率52%,半衰期72天。溶液酶Km值和固定化酶K_m~(aPP)值(底物酪蛋白W/V,%)分别为0.28%和0.35%。溶液酶和固定化酶分别在pH6.5和pH8.0以下活力稳定;最适pH分别为7.0和8.0;在65℃处理30min活力分别为原有活力的89%和66%。当酪蛋白浓度为1.5%和2.5%以上活力分别受到抑制。固定化酶在6mol/L脲中连续浸洗5次共6h其活力稳定,仍有原活力的44.4%;用以处理啤酒浊度比对照下降了2-11倍;蛋白质含量下降了55%;冷藏(4℃)120天,无冷混浊发生;同时各项理化指标和风味不变。 相似文献
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分别以不同浓度(A_(450nm)表示)的高压灭活白色葡萄球菌、大肠杆菌及水杨酸对萝卜溶菌酶进行不同时间的诱导.结果表明,诱导时间24h效果最好,白色葡萄球菌最适浓度A_(450nm)为0.94,酶的活力提高了2.34倍;大肠杆菌最适浓度是A_(450)nm为0.55,诱导酶活力提高了0.75倍,以0.2%的水杨酸为诱导物时,第4d和第8d的效果最好,酶活力分别提高了2.4和1.7倍.以酶作用产物进行田间叶面喷施和叶面喷施加根部灌施进行诱导,48h后酶活力提高2.16和3.66倍. 相似文献
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研究了蔗糖、KH2PO4、NH4NO3比对烟草细胞生长和CoQ10量的影响,结果表明,当蔗糖浓度为30g/L时,CoQ10总量最高,此时细胞产量、CoQ10含量和总量分别为19.8g/L、414.7μg/g(dwt)、8212μg/L。在上述蔗糖浓度下,当KH2PO4起始浓度为340mg/L、NH4NO3为12时,细胞产量、CoQ10含量和总量分别最高,高于此比例时有利于CoQ10形成
,但不利于细胞生长。 相似文献
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萝卜块根中两个具溶菌酶活性的几丁质结合蛋白的纯化及其特性 总被引:1,自引:0,他引:1
通过亲和层析和羧甲基一纤维素离子交换层析从萝卜的块根中分离到两个具溶菌酶活性的酶组份:CBP1和CBP2。两者经SDS-PAGE均显示单一蛋白染色条带,其对应的分子量分别为26.9kD和24.8kD。两种蛋白除有溶菌酶活性外,还有几丁质酶活性,但无壳聚糖酶活性。各种类型的几丁质对CBP1和CBP2都有较强的吸附作用,而在还原/非还原的单向SDS-PAGE中却观察不到两者分子中存在二硫键。 相似文献
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荔枝果皮过氧化物酶的纯化及部分酶学性质研究 总被引:12,自引:0,他引:12
经硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose和Sephadex G-75柱层析分离,从荔枝果皮中分离提纯了过氧化物酶(POD),该酶被纯化了12.5倍,产率为1.9%。经SDS-PAGE确定为单一条带。该酶最适反应温度为35℃,对热具有较强的稳定性,经75℃处理30min,酶活性只损失50%。最适pH约为6.5,但在pH4.0—8.0范围内活力仍比较稳定。该酶在25℃和0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)条件下对愈创木酚、邻苯二酚和没食子酸的Km分别是2.75、12.4和12.8mmol/L。二硫苏糖醇和抗坏血酸能完全抑制POD活性,L-半胱氨酸、柠檬酸、FeS04、GSH、SDS和ZnS04对POD活性有一定的抑制作用,而FeCl,和CuSOt对POD则有较好的激活作用。 相似文献