茶树RAPD分析体系的优化

以福鼎大白茶为材料,采用美国的PTC-100^Tm热循环仪,对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的主要因素进行了研究。确定了茶树RAPD的最适反应体系和扩增程序,即在30μl反应体系中,含40ng模板,2mmol/LMgCl2,各0.2mmol/LdNTPs,0.15μmol/L引物和1.5UTaqDNA聚合酶;扩增程序为;第1步预变性94℃,180s,第2步变性92℃,50s;第3步退火35℃,50s;第4步链延伸72℃,100s;循环41次,后延伸72℃,300s。     

老年获得性肺炎病原菌及耐药分析

目的：了解老年人获得性肺炎的病原菌及耐药趋势。方法：对本院1999年6月－2001年6月两年间老年性获得性肺炎患者的痰标本进行细菌学分离鉴定及耐药分析。结果：老年院内感染以G杆菌为主67．19％,其次是真菌22．08及G^ 球菌10．73％。G杆菌中以大肠埃希菌（29．12％）,非发酵菌（24．88％）和肺炎克雷伯菌（20．19％）为主,在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱β－内酰酶株（ESBLS）占49．52％,真菌中以白色假丝酵母菌（68．57％）为主;G^ 球菌中以凝固酶阴性葡萄球菌为主（87．88％）,耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）占63．64％。2000年6月－2001年6月所分离的细菌与上一年相比,真菌由15．43％增加到29．03％（P＜0．01）,G^＋细菌由6．17％增加到15．48％（P＜0．01）,G杆菌由78．4％下降到55．48％（P＜0．01）。所分离细菌除对亚胺培南,特治星（哌位西林／他唑巴坦）及万古霉素耐药率较低外,常用的抗生素显示较高的耐药率。结论：老年性获得性肺炎以G^- 杆菌为主,而真菌的感染也不容忽视;致病菌呈多重耐药趋势,其感染菌谱的变迁和多重耐药率的升高应该引起高度重视,合理应用抗生素应有法规制度。     

儿童乳牙根尖周炎感染根管厌氧细菌学分析

目的：报告50例5-8.5岁儿童根尖周炎患者感染根管73颗乳牙厌氧菌分离鉴定及体外药敏试验的结果,方法：采用K-B法。结果：89.04%(65/73)的患牙共检出厌氧菌150株,平均每例标本检出2.3株,常用抗厌氧菌药物替硝唑（TNZ）、甲硝唑（MNZ）对革兰阴性厌氧菌（产黑色素普氏菌,中间普氏菌,解脲拟杆菌,具核梭杆菌,牙龈二氧化碳噬纤维菌）有较好的抑菌作用;林可霉素对革兰阳性厌氧菌（厌氧消化链球菌,嗜酸乳杆菌）的作用则强于TNZ和MNZ,氯霉素（C）和乙旋螺旋霉素（AS）抗厌氧菌的作用则弱于前三者。结论：分析儿童乳牙根尖周炎感染根管菌群来决定抗菌药物的选择,在临床治疗上是必要的。     

胚特异性表达T-6b降低拟南芥种子中碳水化合物含量

T-6b为农杆菌T-DNA上的一个起致瘤作用的基因,在营养组织中过量表达后能导致突起和肿瘤的形成;在胚乳中的过表达能提高胚成熟种子的生物量与含油量。本文用油菜中胚特异性表达Napin基因的启动子启动拟南芥T-6b基因的表达。结果显示,当T-6b在胚表达以后,种子褶皱,生物量下降,种子中多种碳水化合物含量降低。这一结果与T-6b在胚乳中表达的表型结果有所差别。     

马铃薯遗传转化体系的优化及玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb的导入

以马铃薯脱毒试管苗茎段为转化受体材料,建立并优化了农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系。通过农杆菌介导法将玉米淀粉分支酶基因(Starch branching enzyme b,SBEⅡb)的过表达载体转化马铃薯,接种762个茎段,共获得35株抗性植株。经PCR检测获得了4株转基因阳性植株;对转基因植株进一步进行GUS活性组织化学染色,发现转基因植株的茎段与试管薯均被染上蓝色,表明外源SBEⅡb基因已整合到马铃薯基因组,且正常表达。     

禽流感抗原基因NA,HA的克隆及其表达载体的构建

HA和NA是禽流感病毒重要的保护性抗原基因,为了得到禽流感植物疫苗,本试验采用高保真PCR扩增方法得到目的基因,分别克隆到pMD18-T载体.经测序证实核酸序列正确后,克隆到含有GUS基因的高效植物双元表达载体pB1121上,获得含有HA/NA基因的植物双元表达载体pB1121-HA和pB1121-NA,采用冻融法将含HA/NA基因的植物双元表达载体转入根癌农杆菌LBA4404,菌液浸染生菜子叶,共培48小时后进行GUS基因表达检测,x-glue染色显蓝色,说明带有HA/NA的植物双元表达载体构建成功,为下一步的生菜转HA/NA基因研究奠定基础.     

ICU患者铜绿假单胞菌获得性肺炎耐药研究

目的监测重症监护病房（ICU）铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）的感染状况及耐药变迁,指导临床合理使用抗菌药物。方法对2003年至2007年间,我院ICU收治的患者下呼吸道分泌物进行培养及体外耐药试验。结果铜绿假单胞菌是ICU下呼吸道感染的主导致病菌且感染率呈逐年上升的趋势（46．3％-81．0％）,细菌对三代头孢、亚胺培南及氨基糖苷类药物的耐药性也呈逐年上升的趋势,并呈现多重耐药的特性。结论铜绿假单胞菌是ICU院内下呼吸道感染的常见病原菌,其多重耐药性及应引起高度重视。     

马铃薯抗病基因工程研究

马铃薯是世界上最主要的粮食作物之一,但真菌性病害、病毒性病害和细菌性病害等对马铃薯的危害非常严重,成为制约其产量的主要影响因素之一。近年来,随着基因工程的迅速发展,通过转基因的方法在提高马铃薯抗病性方面取得了较大进展,对其进展进行了综述。     

非淋菌性泌尿生殖道炎支原体感染及耐药变迁

目的探讨解脲支原体（Uu）及人型支原体（Mh）在非淋菌性泌尿生殖道炎的感染状况,分析近3年来支原体的感染及耐药变迁。方法采用培养法（Mycoplasma IST）对NGGU的分泌物进行支原体的培养、体外药敏试验及分析。结果支原体阳性率为47．0％,其中Uu阳性率为34．0％,Uu＋Mh阳性率为11．4％,Mh阳性率为1．6％;交沙霉素、强力霉素等药物的敏感率无明显变化,而喹诺酮类的耐药率则呈逐渐上升趋势,环丙沙星及氧氟沙星的耐药率分别从2002年的38．9％及40．0％上升到了2004年的79．2％及66．4％。结论支原体的耐药率正逐步增加,其中喹诺酮类的高耐药率提示其在治疗支原体感染中的地位改变,泌尿生殖道支原体的药物敏感监测对临床治疗具有重要意义。